| 第一章 前言 | 第1-50页 |
| 1. 极端微生物简介 | 第8-10页 |
| 2. 嗜热微生物和超嗜热微生物 | 第10-13页 |
| 3. 嗜热酶简介 | 第13-17页 |
| ·酯酶与脂肪酶 | 第14页 |
| ·蛋白酶和肽酶 | 第14-17页 |
| 4. 嗜热酶的稳定性 | 第17-32页 |
| ·热力学稳定性 | 第17-23页 |
| ·酶的动力学稳定性 | 第23-24页 |
| ·嗜热酶热稳定性的结构基础 | 第24-32页 |
| 5. 酶的稳定化研究 | 第32-34页 |
| ·定点突变 | 第32-33页 |
| ·分子动力学模拟与稳定化理性设计 | 第33页 |
| ·酶稳定性的体外定向进化 | 第33-34页 |
| 6. 本论文的研究背景及立论依据 | 第34-36页 |
| 7. 参考文献 | 第36-50页 |
| 第二章 同源比较与突变体构建及酶学性质分析 | 第50-82页 |
| 1. 引言 | 第50页 |
| 2. 材料与方法 | 第50-59页 |
| ·三级结构同源分析 | 第50页 |
| ·溶液配制 | 第50-51页 |
| ·突变体的构建 | 第51-55页 |
| ·蛋白表达与分离纯化 | 第55-56页 |
| ·SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第56-57页 |
| ·考马斯亮兰法测定蛋白质浓度 | 第57页 |
| ·酶学性质分析 | 第57-59页 |
| 3. 结果 | 第59-76页 |
| ·APE1547 的同源结构比较分析 | 第59-64页 |
| ·突变体的构建与鉴定 | 第64-65页 |
| ·蛋白浓度测定的标准曲线 | 第65-66页 |
| ·野生型和突变体的分离纯化 | 第66-70页 |
| ·野生型和突变体的酶学性质 | 第70-74页 |
| ·pH 对野生型及突变体催化活性的影响 | 第74-75页 |
| ·野生型和突变体的底物特异性比较 | 第75-76页 |
| 4. 讨论 | 第76-79页 |
| 5. 小结 | 第79-80页 |
| 6. 参考文献 | 第80-82页 |
| 第三章 热稳定性机制研究 | 第82-114页 |
| 1. 引言 | 第82-83页 |
| 2. 实验方法 | 第83-85页 |
| ·热失活动力学研究 | 第83-84页 |
| ·圆二色谱测定 | 第84页 |
| ·荧光光谱测定 | 第84-85页 |
| ·差式扫描量热测定酶热力学常数 | 第85页 |
| 3. 结果 | 第85-102页 |
| ·野生型和突变体酶的热失活动力学 | 第85-93页 |
| ·野生型和突变体热变性的二级结构变化 | 第93-94页 |
| ·野生型和突变体酶热变性的三级结构变化 | 第94-98页 |
| ·野生型和突变体酶热变性过程的热力学研究 | 第98-102页 |
| 4. 讨论 | 第102-110页 |
| 5. 小结 | 第110-111页 |
| 6. 参考文献 | 第111-114页 |
| 第四章 化学变性剂对稳定性的影响 | 第114-132页 |
| 1. 引言 | 第114页 |
| 2. 实验方法 | 第114-117页 |
| ·荧光光谱测定 | 第114-115页 |
| ·平衡解折叠模型的构建与数据处理 | 第115-116页 |
| ·酶在盐酸胍中的残余活性测定 | 第116页 |
| ·盐酸胍变性后复性过程测定 | 第116-117页 |
| 3. 结果 | 第117-127页 |
| ·野生型和突变体在不同浓度盐酸胍中的解折叠研究 | 第117-120页 |
| ·野生型和突变体在盐酸胍溶液中的残余活性与构象变化分析 | 第120页 |
| ·野生型和突变体解折叠模型拟合与热力学参数 | 第120-124页 |
| ·盐酸胍浓度对复性的影响 | 第124-127页 |
| 4. 讨论 | 第127-130页 |
| 5. 小结 | 第130-131页 |
| 6. 参考文献 | 第131-132页 |
| 结论与展望 | 第132-135页 |
| 一、 结论 | 第132-133页 |
| 二、 展望 | 第133-135页 |
| 创新点 | 第135-136页 |
| 攻读博士期间研究成果 | 第136-138页 |
| 摘要 | 第138-142页 |
| ABSTRACT | 第142-147页 |
| 致谢 | 第147-148页 |
| 作者简历 | 第148页 |