第一章 前言 | 第1-20页 |
·HIV 病毒简介 | 第7-12页 |
·HIV 的分型与分布 | 第7-8页 |
·HIV-1 的分子生物学 | 第8-10页 |
·HIV-1 的形态结构 | 第8-10页 |
·HIV-1 的生活周期和致病机制 | 第10-12页 |
·腺病毒载体疫苗简介 | 第12-18页 |
·腺病毒的结构,分类及生活周期 | 第12-17页 |
·腺病毒作为载体的优点 | 第17-18页 |
·本论文设计的构思 | 第18-20页 |
·实验思路 | 第18-19页 |
·实验程序 | 第19-20页 |
第二章 实验材料和方法 | 第20-38页 |
·材料、仪器和试剂 | 第20-25页 |
·材料 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21-22页 |
·常用试剂配置 | 第22-25页 |
·实验方法 | 第25-38页 |
·质粒的小量提取 | 第25-26页 |
·大肠杆菌E.coli 化学感受态的制备 | 第26页 |
·大肠杆菌E.coli 电转感受态的制备 | 第26-27页 |
·连接产物转化E.coli 电转化感受态细胞 | 第27-28页 |
·用PCR 方法检测gagpol 及腺病毒 | 第28页 |
·利用Lipofectamine 2000 转染细胞 | 第28-29页 |
·用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测蛋白表达 | 第29-30页 |
·Western Blot | 第30-31页 |
·50%组织培养感染剂量法(TCID50) | 第31-32页 |
·CsCl 密度梯度离心法纯化腺病毒 | 第32页 |
·微量法(Lowary)法测蛋白浓度 | 第32-33页 |
·动物免疫实验 | 第33-38页 |
·免疫小鼠 | 第33-34页 |
·血清中抗体水平检测 | 第34页 |
·细胞免疫水平检测 | 第34-38页 |
第三章 结果与讨论 | 第38-64页 |
·重组腺病毒质粒的构建及鉴定 | 第38-47页 |
·抗HIV-1 重组腺病毒抗原的选择依据 | 第38-44页 |
·Teasy-gagpol 质粒的构建及鉴定 | 第44-45页 |
·pshuttle-gagpol 及rAd-gagpol 质粒的构建及鉴定 | 第45-47页 |
·质粒转染293 细胞 | 第47页 |
·rAd-gagpol 中gagpol 基因的表达检测 | 第47-48页 |
·用PCR 方法对重组腺病毒的鉴定 | 第48-50页 |
·对腺病毒的鉴定 | 第48-49页 |
·对GagPol 的鉴定 | 第49-50页 |
·CsCl 密度梯度离心纯化腺病毒及指标检测 | 第50-53页 |
·CsCl 密度梯度离心纯化腺病毒 | 第50-51页 |
·Lowry 法测提纯前后总蛋白量 | 第51页 |
·重组腺病毒滴度测定 | 第51-53页 |
·腺病毒gagpol 表达高峰检测 | 第53-54页 |
·动物免疫原性的研究 | 第54-64页 |
·体液免疫效果分析 | 第54-55页 |
·细胞免疫效果分析 | 第55-64页 |
·CTL 反应检测细胞免疫水平 | 第55-57页 |
·ELISPOT 实验检测细胞免疫 | 第57-64页 |
中文摘要 | 第64-66页 |
ABSTRACT | 第66-69页 |
致 谢 | 第69页 |