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两种HIV-1重组腺病毒疫苗(修饰型,野生型)的构建及免疫原性比较

第一章 前言第1-20页
   ·HIV 病毒简介第7-12页
     ·HIV 的分型与分布第7-8页
     ·HIV-1 的分子生物学第8-10页
       ·HIV-1 的形态结构第8-10页
     ·HIV-1 的生活周期和致病机制第10-12页
   ·腺病毒载体疫苗简介第12-18页
     ·腺病毒的结构,分类及生活周期第12-17页
     ·腺病毒作为载体的优点第17-18页
   ·本论文设计的构思第18-20页
     ·实验思路第18-19页
     ·实验程序第19-20页
第二章 实验材料和方法第20-38页
   ·材料、仪器和试剂第20-25页
     ·材料第20-21页
     ·主要仪器第21-22页
     ·常用试剂配置第22-25页
   ·实验方法第25-38页
     ·质粒的小量提取第25-26页
     ·大肠杆菌E.coli 化学感受态的制备第26页
     ·大肠杆菌E.coli 电转感受态的制备第26-27页
     ·连接产物转化E.coli 电转化感受态细胞第27-28页
     ·用PCR 方法检测gagpol 及腺病毒第28页
     ·利用Lipofectamine 2000 转染细胞第28-29页
     ·用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测蛋白表达第29-30页
     ·Western Blot第30-31页
     ·50%组织培养感染剂量法(TCID50)第31-32页
     ·CsCl 密度梯度离心法纯化腺病毒第32页
     ·微量法(Lowary)法测蛋白浓度第32-33页
     ·动物免疫实验第33-38页
       ·免疫小鼠第33-34页
       ·血清中抗体水平检测第34页
       ·细胞免疫水平检测第34-38页
第三章 结果与讨论第38-64页
   ·重组腺病毒质粒的构建及鉴定第38-47页
     ·抗HIV-1 重组腺病毒抗原的选择依据第38-44页
     ·Teasy-gagpol 质粒的构建及鉴定第44-45页
     ·pshuttle-gagpol 及rAd-gagpol 质粒的构建及鉴定第45-47页
   ·质粒转染293 细胞第47页
   ·rAd-gagpol 中gagpol 基因的表达检测第47-48页
   ·用PCR 方法对重组腺病毒的鉴定第48-50页
     ·对腺病毒的鉴定第48-49页
     ·对GagPol 的鉴定第49-50页
   ·CsCl 密度梯度离心纯化腺病毒及指标检测第50-53页
     ·CsCl 密度梯度离心纯化腺病毒第50-51页
     ·Lowry 法测提纯前后总蛋白量第51页
     ·重组腺病毒滴度测定第51-53页
   ·腺病毒gagpol 表达高峰检测第53-54页
   ·动物免疫原性的研究第54-64页
     ·体液免疫效果分析第54-55页
     ·细胞免疫效果分析第55-64页
       ·CTL 反应检测细胞免疫水平第55-57页
       ·ELISPOT 实验检测细胞免疫第57-64页
中文摘要第64-66页
ABSTRACT第66-69页
致 谢第69页

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