| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Summary | 第11-13页 |
| 第一章 伞滑刃线虫属分类学研究 | 第13-28页 |
| 1 伞滑刃线虫属分类学地位 | 第13页 |
| 2 伞滑刃线虫属的形态学特征 | 第13-14页 |
| 3 伞滑刃线虫的种类及其分布 | 第14页 |
| 4 伞滑刃线虫属中具严重危害性的种 | 第14-19页 |
| 4．1 椰子红环腐线虫 | 第14-17页 |
| 4．2 松材线虫 | 第17-19页 |
| 4．2．1 松材线虫的分布与危害 | 第17-18页 |
| 4．2．2 松材线虫的寄主范围与传播方式 | 第18-19页 |
| 4．2．3 松材线虫的鉴别特征 | 第19页 |
| 5 伞滑刃线虫的分类与鉴定 | 第19-28页 |
| 5．1 蛋白质 | 第20-22页 |
| 5．1．1 酶学 | 第20-21页 |
| 5．1．2 血清学方法 | 第21-22页 |
| 5．2 激素 | 第22页 |
| 5．3 脂类 | 第22页 |
| 5．4 核酸 | 第22-28页 |
| 5．4．1 DNA探针 | 第23-24页 |
| 5．4．2 PCR为基础的分子标记 | 第24-28页 |
| 第二章 单克隆抗体及其在植物线虫学中的应用 | 第28-36页 |
| 1 单克隆抗体制备技术概述 | 第28-30页 |
| 1．1 杂交瘤技术 | 第28-29页 |
| 1．1．1 杂交瘤技术的原理 | 第28-29页 |
| 1．1．2 杂交瘤技术的基本流程 | 第29页 |
| 1．2 噬菌体展示技术 | 第29-30页 |
| 2 单克隆抗体与多克隆抗体 | 第30-33页 |
| 3．1 单克隆抗体在植物病原线虫诊断中的应用 | 第31页 |
| 3．2 单克隆抗体技术在植物病原线虫与寄主互作中的应用 | 第31-32页 |
| 3．3 单克隆抗体在植物病原线虫结构学中的应用 | 第32-33页 |
| 4 植物线虫学中常用的免疫检测技术 | 第33-36页 |
| 4．1 沉淀法 | 第33-34页 |
| 4．1．1 双扩散法 | 第33页 |
| 4．1．2 免疫电泳法 | 第33-34页 |
| 4．2．1 间接 ELISA | 第34页 |
| 4．2．2 双抗体夹心ELISA | 第34页 |
| 4．3 免疫印迹检测法 | 第34-35页 |
| 4．3．1 斑点免疫结合技术 | 第34页 |
| 4．3．2 Western印迹 | 第34-35页 |
| 4．4 免疫胶体金技术 | 第35页 |
| 4．5 免疫荧光技术 | 第35-36页 |
| 第三章 外滑刃属研究进展 | 第36-38页 |
| 1 外滑刃线虫属分类学地位 | 第36页 |
| 2 外滑刃线虫属的形态学特征 | 第36页 |
| 3 外滑刃线虫的种类及其分布 | 第36-38页 |
| 第四章 几种伞滑刃属线虫的形态与rDNA PCR-RFLP鉴定研究 | 第38-62页 |
| 1 材料与方法 | 第38-46页 |
| 1．1 材料 | 第38页 |
| 1．1．1 供试线虫 | 第38页 |
| 1．1．2 试剂与仪器 | 第38页 |
| 1．2 方法 | 第38-46页 |
| 1．2．1 线虫的分离与培养 | 第38-40页 |
| 1．2．2 线虫永久玻片的制作 | 第40页 |
| 1．2．3 形态观察与鉴定 | 第40-41页 |
| 1．2．4 环境扫描电镜样品的制备 | 第41页 |
| 1．2．5 线虫 DNA提取 | 第41页 |
| 1．2．6 PCR扩增 | 第41-42页 |
| 1．2．7 PCR产物的纯化 | 第42-43页 |
| 1．2．8 PCR纯化产物酶切 | 第43页 |
| 1．2．9 DNA克隆 | 第43-46页 |
| 2 结果与讨论 | 第46-62页 |
| 2．1 松材线虫与拟松材线虫 | 第46-51页 |
| 2．1．1 形态测量 | 第46页 |
| 2．1．2 雌虫尾尖突与交合伞的特征及其在种内和种间的变异 | 第46-48页 |
| 2．1．3 ITS区 PCR扩增及其 PCR-RFLP分析 | 第48-51页 |
| 2．2 B．rainulfi | 第51-54页 |
| 2．2．1 形态学特征描述与形态测量 | 第51-52页 |
| 2．1．2 PCR扩增及克隆 DNA的测序分析 | 第52页 |
| 2．1．3 PCR-RFLP分析 | 第52-54页 |
| 2．3 B． thailandae | 第54-59页 |
| 2．3．1 形态学特征描述与测量 | 第54-56页 |
| 2．3．2 PCR扩增及克隆DNA的测序分析 | 第56-57页 |
| 2．3．3 ITS-PCR-RFLP分析 | 第57-59页 |
| 2．4 伞滑刃线虫的ITS序列比较分析 | 第59-62页 |
| 第五章 利用 Dyplex-PCR以及28S RNA基因的PCR-RFLP对伞滑刃线虫的鉴定研究 | 第62-70页 |
| 第一节 利用 Duplex-PCR对松材线虫的特异性检测 | 第62-70页 |
| 1 材料与方法 | 第62-66页 |
| 1．1 材料 | 第62-63页 |
| 1．1．1 虫源 | 第62页 |
| 1．1．2 试剂与仪器 | 第62-63页 |
| 1．2 方法 | 第63-66页 |
| 1．2．1 线虫的分离与培养 | 第63页 |
| 1．2．2 引物 | 第63-64页 |
| 1．2．3 线虫 DNA提取 | 第64页 |
| 1．2．4 特异性 PCR扩增 | 第64-65页 |
| 1．2．5 序列测定与 PCR一RFLP鉴定 | 第65页 |
| 1．2．6 Duplex PCR扩增 | 第65-66页 |
| 2 结果 | 第66-69页 |
| 2．1 特异性扩增 | 第66页 |
| 2．2 PCR-RFLP分析 | 第66-67页 |
| 2．3 Duplex PCR分析 | 第67-69页 |
| 3． 讨论 | 第69-70页 |
| 第二节 28S RNA基因的PCR-RFLP对伞滑刃线虫的鉴定分析 | 第70-80页 |
| 1 材料与方法 | 第70-72页 |
| 1．1 材料 | 第70页 |
| 1．1．1 虫源 | 第70页 |
| 1．1．2 试剂与仪器 | 第70页 |
| 1．2 方法 | 第70-72页 |
| 1．2．1 线虫的分离与培养 | 第70页 |
| 1．2．2 线虫 DNA提取 | 第70页 |
| 1．2．3 线虫 PCR扩增 | 第70-71页 |
| 1．2．4 PCR产物的纯化 | 第71页 |
| 1．2．S PCR-RFLP分析 | 第71-72页 |
| 1．2．6 DNA克隆 | 第72页 |
| 1．2．7 DNA序列测定与分析 | 第72页 |
| 2． 结果 | 第72-77页 |
| 2．1 PCR扩增 | 第72-73页 |
| 2．2 PCR-RFLP分析 | 第73-74页 |
| 2．2．1 多种限制性内切酶对伞滑刃线虫28S RNA基因D2D3区酶切分析 | 第73页 |
| 2．2．2 Bsh1236I在伞滑刃线虫属和外滑刃线虫属内种鉴别中的作用 | 第73-74页 |
| 2．3 DNA序列测定与比对分析 | 第74-77页 |
| 2．3．1 序列测定 | 第74页 |
| 2．3．2 序列比对分析 | 第74-77页 |
| 3 讨论 | 第77-80页 |
| 第六章 松材线虫单克隆抗体的制备 | 第80-90页 |
| 1 材料与方法 | 第80-85页 |
| 1．1 材料 | 第80-81页 |
| 1．1．1 虫源 | 第80-81页 |
| 1．1．2 细胞、动物和试剂 | 第81页 |
| 1．1．3 免疫原 | 第81页 |
| 1．2 方法 | 第81-85页 |
| 1．2．1 蛋白含量测定(Bradford法) | 第81页 |
| 1．2．2 动物免疫 | 第81页 |
| 1．2．3 杂交瘤细胞株的建立 | 第81-82页 |
| 1．2．4 阳性孔的筛选及克隆 | 第82页 |
| 1．2．5 杂交瘤细胞株的保存和复苏 | 第82页 |
| 1．2．6 特异性鉴定—间接 ELISA法 | 第82-83页 |
| 1．2．7 腹水抗体制备、效价的测定与亚类鉴定 | 第83页 |
| 1．2．8 Western印迹检测 | 第83-85页 |
| 2 结果 | 第85-88页 |
| 2．1 各伞滑刃线虫粗提蛋白 | 第85-86页 |
| 2．2 小鼠免疫 | 第86页 |
| 2．3 细胞的筛选与克隆 | 第86页 |
| 2．4 单抗腹水的特异性检测、效价测定及 Ig亚类鉴定 | 第86-88页 |
| 2．5 Western印迹分析 | 第88页 |
| 3． 讨论 | 第88-90页 |
| 第七章 两种外滑刃线虫属种群的形态学和分子鉴定 | 第90-97页 |
| 1 材料与方法 | 第90-91页 |
| 1．1 材料 | 第90页 |
| 1．1．1 虫源 | 第90页 |
| 1．1．2 试剂与仪器 | 第90页 |
| 1．2 方法 | 第90-91页 |
| 1．2．1 线虫的分离与培养 | 第90页 |
| 1．2．2 线虫永久玻片的制作 | 第90页 |
| 1．2．3 形态观察与鉴定 | 第90-91页 |
| 1．2．4 线虫 DNA提取 | 第91页 |
| 1．2．5 线虫 PCR扩增 | 第91页 |
| 1．2．6 PCR产物的纯化 | 第91页 |
| 1．2．7 PCR纯化产物酶切 | 第91页 |
| 1．2．8 DNA克隆 | 第91页 |
| 2 结果 | 第91-94页 |
| 2．1 形态及其测量 | 第91-92页 |
| 2．1．1 形态学特征描述 | 第91-92页 |
| 2．1．2 形态测量 | 第92页 |
| 2．2 PCR扩增及克隆DNA测序 | 第92-93页 |
| 2．2．1 松外滑刃线虫 | 第92-93页 |
| 2．2．2 华美外滑刃线虫 | 第93页 |
| 2．3 PCR-RFLP分析 | 第93-94页 |
| 2．3．1 ITS-PCR-RFLP分析 | 第93-94页 |
| 2．3．2 28S RNA基因PCR-RFLP分析 | 第94页 |
| 3 讨论 | 第94-97页 |
| 参考文献 | 第97-106页 |
| 附录A:常用试剂与仪器 | 第106-108页 |
| 常用试剂 | 第106-107页 |
| 常用仪器 | 第107-108页 |
| 附录B:常用试剂与缓冲液的配制 | 第108-114页 |
| 1 常用试剂配制 | 第108-110页 |
| 2 常用缓冲液配制 | 第110-114页 |
