| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| ·兰科植物遗传转化研究进展 | 第12-14页 |
| ·PEG法 | 第12页 |
| ·电激法 | 第12-13页 |
| ·花粉管通道法 | 第13页 |
| ·基因枪法 | 第13页 |
| ·农杆菌介导法 | 第13-14页 |
| ·影响农杆菌介导兰科植物遗传转化的因素 | 第14-16页 |
| ·农杆菌菌株类型 | 第14-15页 |
| ·菌液浓度 | 第15页 |
| ·酚类化合物 | 第15-16页 |
| ·外植体的类型和处理方式 | 第16页 |
| ·预培养时间 | 第16页 |
| ·共培养时间 | 第16页 |
| ·超声波辅助农杆菌介导法的研究进展 | 第16-18页 |
| ·NAC基因研究进展 | 第18-20页 |
| ·本实验研究意义 | 第20-21页 |
| 第二章 超声波处理辅助根瘤农杆菌介导铁皮石斛遗传转化体系的初步建立 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·根瘤农杆菌菌株类型及质粒载体 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-24页 |
| ·转化感受体的制备 | 第23页 |
| ·PLBs对潮霉素敏感性实验 | 第23页 |
| ·农杆菌的活化及侵染液的制备 | 第23页 |
| ·超声波预处理、侵染和共培养 | 第23页 |
| ·GUS组织化学检测 | 第23-24页 |
| ·转化后PLBs的筛选 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-28页 |
| ·不同浓度潮霉素对PLBs生长的影响 | 第24-26页 |
| ·不同超声时间对GUS瞬时表达率的影响 | 第26-27页 |
| ·不同侵染和共培养时间对GUS瞬时表达率的影响 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-31页 |
| ·超声波处理对遗传转化的影响 | 第28-29页 |
| ·PLBs生理状态、预培养时间和乙酰丁香酮浓度的选择 | 第29-30页 |
| ·不同侵染和共培养时间对遗传转化的影响 | 第30页 |
| ·后续工作 | 第30-31页 |
| 第三章 铁皮石斛兰NAC基因的分离与克隆 | 第31-40页 |
| ·材料与方法 | 第31-36页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·铁皮石斛基因组DNA的提取 | 第36页 |
| ·NAC基因PCR反应 | 第36-37页 |
| ·NAC基因组DNA片段的回收 | 第37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| ·测序结果分析 | 第38-40页 |
| 第四章 NAC基因启动子的克隆与表达载体的构建 | 第40-59页 |
| ·材料与方法 | 第40-48页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-57页 |
| ·5’和3’方向染色体步移结果 | 第48-50页 |
| ·5’未知序列的重组质粒和3’未知序列的重组质粒的双酶切验证 | 第50-51页 |
| ·5’和3’侧翼序列的分析结果 | 第51-56页 |
| ·NAC启动子的克隆及表达载体的鉴定 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及科研成果 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
