| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 1 绪论 | 第11-18页 |
| ·研究背景及项目的提出 | 第11-14页 |
| ·嵌合重组体原核表达载体的构建方案 | 第14-15页 |
| ·具体技术路线 | 第15-18页 |
| 2 双重靶效应的基因嵌合重组体的克隆 | 第18-33页 |
| ·引言 | 第18页 |
| ·材料和方法 | 第18-26页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-33页 |
| ·SDF-1p29,SDF-1p2954 和SDF-1wt 成熟肽编码序列的扩增 | 第26-27页 |
| ·重组质粒SDF-1p2g /pMD18-T、SDF-1p2g54/pMD18-T 和 SDF-1wt/ pMD18-T 的酶切结果 | 第27-28页 |
| ·SDF-1p2g-Hinge/pMD18-T 阳性克隆的筛选及鉴定 | 第28-29页 |
| ·Decorin 的PCR 扩增 | 第29页 |
| ·Decorin/pMD18-T 重组体酶切结果 | 第29-30页 |
| ·PCR 鉴定p2gch/pMD18-T 嵌合重组体 | 第30页 |
| ·p2gch/pET-30a(+)重组体的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·p2g54ch/pET-30a(+)重组体的酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·SDF-1wt/pET-30a(+)阳性克隆的筛选及鉴定 | 第32页 |
| ·PCR 法鉴定wtch/pET-30a(+) | 第32-33页 |
| 3 双重靶效应的基因嵌合重组体的表达、纯化和鉴定 | 第33-43页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·材料与方法 | 第33-37页 |
| ·材料 | 第33-35页 |
| ·方法 | 第35-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-43页 |
| ·基因嵌合重组体p29ch、p2954ch 和wtch 在BL21(DE3)中的表达 | 第37-38页 |
| ·His-tag /P2Gch、His-tag /P2G54ch 和 WTch/ His-tag 嵌合重组体蛋白的 ProBond Resin 镍固相亲和层析 | 第38-41页 |
| ·Western-blotting 结果 | 第41-43页 |
| 4 嵌合蛋白 P2Gch、P2G54ch 和 WTch 的复性 | 第43-47页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-47页 |
| ·嵌合蛋白P2Gch、P2G54ch 和WTch 的复性 | 第45页 |
| ·嵌合体目标蛋白的浓度测定 | 第45-47页 |
| 5 嵌合蛋白活性的初步鉴定 | 第47-50页 |
| ·前言 | 第47页 |
| ·材料与方法 | 第47-48页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-48页 |
| ·MTT 实验结果 | 第48-50页 |
| 6 讨论 | 第50-54页 |
| ·SDF-1/Decorin 嵌合重组体的体外表达 | 第50页 |
| ·SDF-1/Decorin 嵌合蛋白的稳定性 | 第50-51页 |
| ·SDF-1/Decorin 嵌合重组体在大肠杆菌中表达产物的复性 | 第51-52页 |
| ·SDF-1/Decorin 嵌合重组体的潜在用途 | 第52-54页 |
| 7 结论、创新性与展望 | 第54-56页 |
| ·结论 | 第54页 |
| ·本项目的创新之处 | 第54页 |
| ·展望 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 附录 1 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第60页 |
| 附录 2 攻读硕士学位期间科研成果 | 第60页 |
| 附录 3 攻读硕士学位期间参加科研项目 | 第60-64页 |
