摘要 | 第1-5页 |
Summary | 第5-11页 |
缩略词一览表 | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-34页 |
1. 猪抗病育种研究进展 | 第14-20页 |
·免疫应答与猪抗病育种 | 第15-18页 |
·猪抗病相关基因研究概况 | 第18-20页 |
2. 研究基因表达方法概述 | 第20-29页 |
·差别筛选技术 | 第21页 |
·扣除杂交 | 第21-22页 |
·mRNA 差异显示技术 | 第22-24页 |
·代表性差异分析 | 第24-25页 |
·抑制性消减杂交技术 | 第25-26页 |
·基因表达系列分析 | 第26-28页 |
·基因芯片 | 第28页 |
·表达序列标签串联排列连接 | 第28页 |
·GeneCalling | 第28-29页 |
3. 全长cDNA 克隆的方法 | 第29-31页 |
·cDNA 文库筛选 | 第29页 |
·cDNA 末端快速扩增 | 第29-30页 |
·反向 PCR(inverse PCR) | 第30-31页 |
·电子克隆 | 第31页 |
4. 立题依据和研究内容 | 第31-34页 |
第二章 不同品种猪免疫指标、生产性能的测定比较 | 第34-52页 |
前言 | 第34-35页 |
1 材料与方法 | 第35-41页 |
·实验动物 | 第35页 |
·样品采集 | 第35页 |
·主要仪器和试剂 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
2 结果与分析 | 第41-44页 |
·不同品种猪免疫指标测定结果及其相关分析 | 第41-42页 |
·不同品种猪部分生产性能测定及其相关分析 | 第42页 |
·免疫指标与生产性能相关性分析 | 第42-43页 |
·不同品种猪发病情况记录 | 第43-44页 |
3 讨论与结论 | 第44-52页 |
·免疫指标 | 第44-48页 |
·白细胞总数 | 第44-45页 |
·中性粒细胞NBT 还原力 | 第45-46页 |
·血清IgG 含量 | 第46页 |
·细胞因子 | 第46-48页 |
·白细胞介素12 | 第47页 |
·γ干扰素 | 第47-48页 |
·生产性能 | 第48页 |
·免疫指标与生产性能的关系 | 第48页 |
·展望 | 第48-52页 |
第三章 不同品种猪血液、脾脏差异显示研究 | 第52-84页 |
前言 | 第52-53页 |
1 材料与方法 | 第53-66页 |
·试验材料 | 第53-56页 |
·试验动物 | 第53页 |
·样品采集 | 第53页 |
·主要仪器设备 | 第53页 |
·常规试剂及试剂盒 | 第53-54页 |
·引物 | 第54-55页 |
·聚丙烯凝胶电泳及硝酸银染色 | 第55页 |
·差异片段的反Northern 杂交鉴定 | 第55-56页 |
·差异片段克隆 | 第56页 |
·方法 | 第56-66页 |
·总RNA 提取 | 第56-57页 |
·总RNA 纯化、检测及RNA 池组建 | 第57-58页 |
·反转录 | 第58页 |
·DDRT-PCR | 第58-59页 |
·8%非变性聚丙烯凝胶电泳及硝酸银染色 | 第59-60页 |
·差异条带回收 | 第60页 |
·差异片段的二次PCR 扩增 | 第60页 |
·差异表达条带的反Northern 杂交验证 | 第60-63页 |
·反Northern 杂交验证为阳性的差异表达条带的回收 | 第63页 |
·连接载体 | 第63-64页 |
·转化 | 第64页 |
·重组质粒鉴定 | 第64-65页 |
·测序 | 第65页 |
·序列比对分析 | 第65-66页 |
2 结果与分析 | 第66-74页 |
·总 RNA 提取 | 第66页 |
·总 RNA 纯化 | 第66页 |
·mRNA 差异显示结果 | 第66-67页 |
·差异条带的二次 PCR 扩增 | 第67-68页 |
·差异表达片断的反 Northern 点杂交验证 | 第68-69页 |
·差异片断克隆及其重组质粒鉴定 | 第69-70页 |
·差异表达片段序列比对分析 | 第70-74页 |
3 讨论 | 第74-84页 |
·关于 DDRT-PCR | 第74-76页 |
·差异表达基因功能分析 | 第76-84页 |
·18S核糖体RNA | 第76-77页 |
·Slingshot2 | 第77-78页 |
·微管肌动蛋白交联因子 | 第78-79页 |
·CC 趋化性细胞因子受体基因 | 第79-80页 |
·亮氨酸氨基肽酶 | 第80页 |
·MHCⅠ | 第80-81页 |
·上皮膜蛋白2 | 第81-84页 |
第四章 差异表达 EST 生物信息学研究 | 第84-96页 |
前言 | 第84-85页 |
1 材料与方法 | 第85-87页 |
·试验材料 | 第85页 |
·试验方法 | 第85-87页 |
2 结果 | 第87-92页 |
·比对结果及 Unigene 编号获得 | 第87页 |
·利用 DNAMAN 软件进行序列拼接 | 第87页 |
·拼接序列 ORF 分析 | 第87页 |
·引物设计 | 第87-88页 |
·RT-PCR 验证 | 第88页 |
·重组质粒菌体 PCR 鉴定 | 第88-89页 |
·扩增序列与电子延伸序列相似性比较分析 | 第89-92页 |
3 讨论 | 第92-96页 |
·关于生物信息学 | 第92-93页 |
·电子克隆 | 第93页 |
·生物学软件 | 第93-94页 |
·展望 | 第94-96页 |
第五章 结论 | 第96-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-114页 |
附录一 | 第114-125页 |
附录二 | 第125-126页 |
个人简历 | 第126-127页 |
导师简介 | 第127-128页 |