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不同猪种免疫功能及免疫相关基因表达差异研究

摘要第1-5页
Summary第5-11页
缩略词一览表第11-14页
第一章 文献综述第14-34页
 1. 猪抗病育种研究进展第14-20页
   ·免疫应答与猪抗病育种第15-18页
   ·猪抗病相关基因研究概况第18-20页
 2. 研究基因表达方法概述第20-29页
   ·差别筛选技术第21页
   ·扣除杂交第21-22页
   ·mRNA 差异显示技术第22-24页
   ·代表性差异分析第24-25页
   ·抑制性消减杂交技术第25-26页
   ·基因表达系列分析第26-28页
   ·基因芯片第28页
   ·表达序列标签串联排列连接第28页
   ·GeneCalling第28-29页
 3. 全长cDNA 克隆的方法第29-31页
   ·cDNA 文库筛选第29页
   ·cDNA 末端快速扩增第29-30页
   ·反向 PCR(inverse PCR)第30-31页
   ·电子克隆第31页
 4. 立题依据和研究内容第31-34页
第二章 不同品种猪免疫指标、生产性能的测定比较第34-52页
 前言第34-35页
 1 材料与方法第35-41页
   ·实验动物第35页
   ·样品采集第35页
   ·主要仪器和试剂第35-36页
   ·实验方法第36-41页
 2 结果与分析第41-44页
   ·不同品种猪免疫指标测定结果及其相关分析第41-42页
   ·不同品种猪部分生产性能测定及其相关分析第42页
   ·免疫指标与生产性能相关性分析第42-43页
   ·不同品种猪发病情况记录第43-44页
 3 讨论与结论第44-52页
   ·免疫指标第44-48页
     ·白细胞总数第44-45页
     ·中性粒细胞NBT 还原力第45-46页
     ·血清IgG 含量第46页
     ·细胞因子第46-48页
       ·白细胞介素12第47页
       ·γ干扰素第47-48页
   ·生产性能第48页
   ·免疫指标与生产性能的关系第48页
   ·展望第48-52页
第三章 不同品种猪血液、脾脏差异显示研究第52-84页
 前言第52-53页
 1 材料与方法第53-66页
   ·试验材料第53-56页
     ·试验动物第53页
     ·样品采集第53页
     ·主要仪器设备第53页
     ·常规试剂及试剂盒第53-54页
     ·引物第54-55页
     ·聚丙烯凝胶电泳及硝酸银染色第55页
     ·差异片段的反Northern 杂交鉴定第55-56页
     ·差异片段克隆第56页
   ·方法第56-66页
     ·总RNA 提取第56-57页
     ·总RNA 纯化、检测及RNA 池组建第57-58页
     ·反转录第58页
     ·DDRT-PCR第58-59页
     ·8%非变性聚丙烯凝胶电泳及硝酸银染色第59-60页
     ·差异条带回收第60页
     ·差异片段的二次PCR 扩增第60页
     ·差异表达条带的反Northern 杂交验证第60-63页
     ·反Northern 杂交验证为阳性的差异表达条带的回收第63页
     ·连接载体第63-64页
     ·转化第64页
     ·重组质粒鉴定第64-65页
     ·测序第65页
     ·序列比对分析第65-66页
 2 结果与分析第66-74页
   ·总 RNA 提取第66页
   ·总 RNA 纯化第66页
   ·mRNA 差异显示结果第66-67页
   ·差异条带的二次 PCR 扩增第67-68页
   ·差异表达片断的反 Northern 点杂交验证第68-69页
   ·差异片断克隆及其重组质粒鉴定第69-70页
   ·差异表达片段序列比对分析第70-74页
 3 讨论第74-84页
   ·关于 DDRT-PCR第74-76页
   ·差异表达基因功能分析第76-84页
     ·18S核糖体RNA第76-77页
     ·Slingshot2第77-78页
     ·微管肌动蛋白交联因子第78-79页
     ·CC 趋化性细胞因子受体基因第79-80页
     ·亮氨酸氨基肽酶第80页
     ·MHCⅠ第80-81页
     ·上皮膜蛋白2第81-84页
第四章 差异表达 EST 生物信息学研究第84-96页
 前言第84-85页
 1 材料与方法第85-87页
   ·试验材料第85页
   ·试验方法第85-87页
 2 结果第87-92页
   ·比对结果及 Unigene 编号获得第87页
   ·利用 DNAMAN 软件进行序列拼接第87页
   ·拼接序列 ORF 分析第87页
   ·引物设计第87-88页
   ·RT-PCR 验证第88页
   ·重组质粒菌体 PCR 鉴定第88-89页
   ·扩增序列与电子延伸序列相似性比较分析第89-92页
 3 讨论第92-96页
   ·关于生物信息学第92-93页
   ·电子克隆第93页
   ·生物学软件第93-94页
   ·展望第94-96页
第五章 结论第96-97页
致谢第97-98页
参考文献第98-114页
附录一第114-125页
附录二第125-126页
个人简历第126-127页
导师简介第127-128页

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