| 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的检测及其流行情况初步调查 | 第1-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-30页 |
| 1 对虾病毒性疾病研究进展 | 第12-16页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·对虾主要病毒性疾病病原特性 | 第12-15页 |
| ·对虾主要病毒性疾病的诊断 | 第15-16页 |
| 2 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)研究概况 | 第16-25页 |
| ·引言 | 第16-17页 |
| ·IHHNV的病毒特性及分类地位 | 第17页 |
| ·IHHNV感染宿主及传播途径 | 第17-18页 |
| ·IHHNV地理分布及其致病性 | 第18-19页 |
| ·疾病的诊断方法 | 第19-20页 |
| ·常规诊断技术 | 第20-22页 |
| ·临床症状 | 第20-21页 |
| ·组织学方法 | 第21-22页 |
| ·其它常规诊断技术 | 第22页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第22-23页 |
| ·疾病防治 | 第23-25页 |
| ·SPF对虾苗种选育 | 第23页 |
| ·对虾防病养殖技术模式 | 第23页 |
| ·我国对虾苗种繁育和健康养殖中存在的问题与对策 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-30页 |
| 第二章 对虾传染性皮下及造血组织坏死病(IHHN)病理学观察 | 第30-34页 |
| 1 材料与方法 | 第30-32页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·实验用对虾样品 | 第30页 |
| ·试剂和材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·石蜡切片的制备 | 第30-31页 |
| ·电镜切片的制备 | 第31-32页 |
| 2 结果 | 第32-33页 |
| ·组织病理观察 | 第32-33页 |
| ·细胞病理观察 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)和白斑综合征病毒(WSSV)PCR检测技术的建立及病毒流行情况初步调查 | 第34-61页 |
| 第一节 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)PCR检测方法的建立 | 第34-40页 |
| 1 材料与方法 | 第34-36页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·对虾及病毒样品 | 第34页 |
| ·试剂和材料 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·DNA的提取 | 第35页 |
| ·PCR反应条件优化 | 第35页 |
| ·PCR反应特异性和灵敏度 | 第35页 |
| ·电泳 | 第35-36页 |
| 2 结果 | 第36-38页 |
| ·优化的PCR反应 | 第36-37页 |
| ·PCR反应特异性和灵敏度 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第二节 对虾白斑综合征病毒(WSSV)PCR技术 | 第40-45页 |
| 1 材料与方法 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·对虾及病毒样品 | 第40页 |
| ·试剂和材料 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41页 |
| ·DNA的提取 | 第41页 |
| ·PCR反应条件优化 | 第41页 |
| ·PCR反应特异性和灵敏度 | 第41页 |
| ·电泳 | 第41页 |
| 2 结果 | 第41-44页 |
| ·优化的PCR反应 | 第41-43页 |
| ·PCR反应灵敏度分析 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-45页 |
| 第三节 消毒剂对对虾白斑综合征病毒(WSSV)DNA作用效果的比较 | 第45-49页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·对虾及消毒剂样品 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·病毒液的准备 | 第45页 |
| ·消毒剂和病毒液的作用 | 第45-46页 |
| ·斑点杂交检测 | 第46页 |
| ·有效氯含量的测定 | 第46页 |
| 2 结果 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第四节 对虾及其饵料和环境生物样品携带WSSV及IHHNV情况调查 | 第49-56页 |
| 1 材料与方法 | 第49-50页 |
| ·材料来源 | 第49-50页 |
| ·样品的准备 | 第50页 |
| ·DNA提取 | 第50页 |
| ·PCR反应 | 第50页 |
| ·电泳 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-53页 |
| ·不同月份采集的我国沿海部分地区养殖对虾样品携带WSSV和IHHNV状况比较 | 第50-51页 |
| ·不同品种及生长阶段的养殖对虾样品携带WSSV和IHHNV状况比较 | 第51-52页 |
| ·对虾饵料和环境生物中携带WSSV和IHHNV的情况 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-56页 |
| ·IHHNV的流行情况 | 第53-54页 |
| ·WSSV的流行情况 | 第54页 |
| ·WSSV与IHHNV的流行相关性 | 第54-56页 |
| 第五节 多重PCR检测对虾白斑综合征病毒(WSSV)及传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV) | 第56-61页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·对虾及病毒样品 | 第56页 |
| ·试剂和材料 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·DNA的提取 | 第57页 |
| ·多重PCR反应条件优化 | 第57页 |
| ·多重PCR反应特异性和灵敏度 | 第57页 |
| ·电泳 | 第57-58页 |
| 2 结果 | 第58-59页 |
| ·优化的多重PCR反应条件 | 第58-59页 |
| ·多重PCR反应灵敏度分析 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)核酸探针检测技术的建立 | 第61-70页 |
| 第一节 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)核酸探针斑点杂交 | 第61-66页 |
| 1 材料与方法 | 第61-63页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·对虾样品 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62-63页 |
| ·DNA的提取 | 第62页 |
| ·IHHNV感染样品 | 第62页 |
| ·PCR法制备地高辛(DIG)标记DNA探针 | 第62页 |
| ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳分析 | 第62-63页 |
| ·地高辛(DIG)标记DNA探针产量的测定 | 第63页 |
| 2 结果 | 第63-65页 |
| ·PCR反应产物琼脂糖凝胶电泳分析 | 第63-64页 |
| ·PCR制备地高辛(DIG)标记DNA探针产量测定结果 | 第64页 |
| ·地高辛(DIG)标记IHHNV DNA探针斑点杂交检测各样品 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 第二节 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)原位杂交 | 第66-70页 |
| 1 材料与方法 | 第66-68页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·实验用对虾样品 | 第66页 |
| ·试剂和材料 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-68页 |
| ·组织切片的准备 | 第66-67页 |
| ·原位杂交 | 第67-68页 |
| 2 结果 | 第68-69页 |
| ·原位杂交结果观察 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 附录 | 第75-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
