流通色谱介质的研制和生物大分子色谱分离
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-35页 |
| ·生物技术 | 第12-13页 |
| ·生物分离及液相色谱技术 | 第13-17页 |
| ·离子交换色谱 | 第13-14页 |
| ·凝胶过滤色谱 | 第14-15页 |
| ·亲和色谱 | 第15页 |
| ·共价色谱 | 第15-16页 |
| ·疏水作用色谱 | 第16页 |
| ·分配色谱 | 第16-17页 |
| ·色谱介质 | 第17-18页 |
| ·天然高分子材料 | 第17-18页 |
| ·无机介质 | 第18页 |
| ·刚性有机树脂 | 第18页 |
| ·乳状液与多级乳化 | 第18-24页 |
| ·乳状液 | 第18-24页 |
| ·乳状液的定义 | 第18-19页 |
| ·关于乳状液的类型的理论 | 第19-22页 |
| ·乳状液的稳定性 | 第22页 |
| ·影响乳状液稳定的因素 | 第22-24页 |
| ·多级乳化 | 第24页 |
| ·DNA 药物与质粒 | 第24-29页 |
| ·质粒 | 第25页 |
| ·基因治疗的现状 | 第25-26页 |
| ·质粒 DNA 的纯化 | 第26-29页 |
| ·发酵 | 第26-27页 |
| ·细胞裂解 | 第27页 |
| ·质粒 DNA 纯化的研究现状 | 第27-29页 |
| ·流通色谱及理论 | 第29-32页 |
| ·流通色谱 | 第29-30页 |
| ·流通色谱原理 | 第30-32页 |
| ·本文工作的目的及内容 | 第32-35页 |
| ·研究的背景 | 第32-33页 |
| ·研究的目的 | 第33页 |
| ·研究的内容 | 第33-35页 |
| 第二章 用甘油溶液作为致孔剂制备双孔介质 | 第35-59页 |
| ·引言 | 第35-37页 |
| ·光聚合原理及分类 | 第35-37页 |
| ·离子交换机理 | 第37页 |
| ·实验材料与设备 | 第37-38页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·实验仪器与设备 | 第37页 |
| ·溶液的配制 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-46页 |
| ·双孔介质的合成 | 第38-41页 |
| ·致孔剂的去除 | 第41-42页 |
| ·微球介质的表征 | 第42-43页 |
| ·配基修饰及修饰密度的测定 | 第43-44页 |
| ·静态吸附容量的测定 | 第44页 |
| ·两种色谱柱的背压与流速的关系 | 第44-45页 |
| ·动态吸附容量的测定 | 第45页 |
| ·双孔流通色谱柱的柱效 | 第45-46页 |
| ·分离模型蛋白混合物 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-57页 |
| ·乳化剂用量对第一次乳化液稳定性的影响 | 第46-47页 |
| ·乳化过程的测定 | 第47-48页 |
| ·双孔介质的性能测定 | 第48-49页 |
| ·微孔球的表征 | 第49-50页 |
| ·比表面积的测定 | 第50页 |
| ·密度的测定 | 第50页 |
| ·吸附容量的测定 | 第50页 |
| ·孔径的测定 | 第50-51页 |
| ·静态吸附容量 | 第51-52页 |
| ·流速对背压的影响 | 第52页 |
| ·动态吸附容量 | 第52-55页 |
| ·流速对色谱柱柱效的影响 | 第55-56页 |
| ·分离模型蛋白混合物 | 第56-57页 |
| ·本章小结 | 第57-59页 |
| 第三章 利用碳酸钙悬浮液作为致孔剂制备双孔介质 | 第59-72页 |
| ·引言 | 第59-60页 |
| ·实验材料与设备 | 第60-62页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·实验仪器与设备 | 第60-62页 |
| ·实验方法 | 第62-66页 |
| ·碳酸钙悬浮液的制备 | 第62-63页 |
| ·利用碳酸钙悬浮液作为致孔剂制备双孔微球 | 第63-64页 |
| ·致孔剂的去除 | 第64页 |
| ·表面修饰 | 第64页 |
| ·微球介质的表征 | 第64-65页 |
| ·配基修饰及修饰密度的测定 | 第65页 |
| ·静态吸附容量的测定 | 第65页 |
| ·两种色谱柱的背压与流速的关系 | 第65页 |
| ·动态吸附容量的测定 | 第65-66页 |
| ·结果与讨论 | 第66-71页 |
| ·两类微球物理特征的比较 | 第66-68页 |
| ·流速与背压的关系 | 第68-69页 |
| ·静态吸附 | 第69页 |
| ·动态吸附 | 第69-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 第四章 利用双孔介质纯化分子伴侣 GroEL | 第72-87页 |
| ·引言 | 第72-74页 |
| ·实验试剂与设备 | 第74-76页 |
| ·实验试剂 | 第74页 |
| ·实验设备 | 第74页 |
| ·缓冲液的配制 | 第74-76页 |
| ·破碎与样品缓冲液 | 第74-75页 |
| ·SDS-PAGE 电泳相关试剂的配制 | 第75-76页 |
| ·考马斯亮蓝 G-250 溶液的配制 | 第76页 |
| ·实验方法 | 第76-79页 |
| ·发酵培养与 GroEL 蛋白料液的获得 | 第76-77页 |
| ·料液蛋白浓度的测定 | 第77页 |
| ·色谱介质的预处理与装柱 | 第77页 |
| ·双孔色谱介质填充柱的分离步骤 | 第77页 |
| ·色谱介质填充柱分离纯化 GroEL 蛋白的研究 | 第77-78页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析方法 | 第78页 |
| ·料液的穿透分析 | 第78-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-85页 |
| ·梯度洗脱 | 第79-82页 |
| ·穿透点的确定 | 第82页 |
| ·阶跃洗脱的研究 | 第82-85页 |
| ·本章小结 | 第85-87页 |
| 第五章 利用双孔介质纯化质粒的研究 | 第87-105页 |
| ·引言 | 第87页 |
| ·实验材料与设备 | 第87-89页 |
| ·实验试剂 | 第87页 |
| ·实验设备 | 第87页 |
| ·溶液的配制 | 第87-89页 |
| ·实验方法 | 第89-93页 |
| ·双孔介质的合成 | 第89页 |
| ·菌体的活化与质粒的粗提 | 第89-90页 |
| ·质粒的分离 | 第90页 |
| ·样品的检测 | 第90-92页 |
| ·质粒的定性分析 | 第90-92页 |
| ·质粒的定量分析 | 第92页 |
| ·不同分子量的质粒 DNA 对分离结果的影响 | 第92页 |
| ·初始盐浓度对分离的影响 | 第92-93页 |
| ·穿透实验 | 第93页 |
| ·实验结果与讨论 | 第93-104页 |
| ·对质粒的初分离 | 第93-94页 |
| ·不同分子量大小的质粒的分离纯化 | 第94-95页 |
| ·不同进样量质粒的纯化 | 第95-97页 |
| ·不同流速质粒的纯化 | 第97-99页 |
| ·不同初始盐浓度对质粒分离的影响 | 第99-101页 |
| ·粗提液的穿透实验 | 第101-104页 |
| ·双孔介质的再生 | 第104页 |
| ·本章小结 | 第104-105页 |
| 第六章 总结与展望 | 第105-107页 |
| ·全文结论 | 第105-106页 |
| ·创新点 | 第106页 |
| ·对今后工作的建议与展望 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-119页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第119-120页 |
| 附录 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121页 |