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流通色谱介质的研制和生物大分子色谱分离

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
前言第10-12页
第一章 文献综述第12-35页
   ·生物技术第12-13页
   ·生物分离及液相色谱技术第13-17页
     ·离子交换色谱第13-14页
     ·凝胶过滤色谱第14-15页
     ·亲和色谱第15页
     ·共价色谱第15-16页
     ·疏水作用色谱第16页
     ·分配色谱第16-17页
   ·色谱介质第17-18页
     ·天然高分子材料第17-18页
     ·无机介质第18页
     ·刚性有机树脂第18页
   ·乳状液与多级乳化第18-24页
     ·乳状液第18-24页
       ·乳状液的定义第18-19页
       ·关于乳状液的类型的理论第19-22页
       ·乳状液的稳定性第22页
       ·影响乳状液稳定的因素第22-24页
     ·多级乳化第24页
   ·DNA 药物与质粒第24-29页
     ·质粒第25页
     ·基因治疗的现状第25-26页
     ·质粒 DNA 的纯化第26-29页
       ·发酵第26-27页
       ·细胞裂解第27页
       ·质粒 DNA 纯化的研究现状第27-29页
   ·流通色谱及理论第29-32页
     ·流通色谱第29-30页
     ·流通色谱原理第30-32页
   ·本文工作的目的及内容第32-35页
     ·研究的背景第32-33页
     ·研究的目的第33页
     ·研究的内容第33-35页
第二章 用甘油溶液作为致孔剂制备双孔介质第35-59页
   ·引言第35-37页
     ·光聚合原理及分类第35-37页
     ·离子交换机理第37页
   ·实验材料与设备第37-38页
     ·实验材料第37页
     ·实验仪器与设备第37页
     ·溶液的配制第37-38页
   ·实验方法第38-46页
     ·双孔介质的合成第38-41页
     ·致孔剂的去除第41-42页
     ·微球介质的表征第42-43页
     ·配基修饰及修饰密度的测定第43-44页
     ·静态吸附容量的测定第44页
     ·两种色谱柱的背压与流速的关系第44-45页
     ·动态吸附容量的测定第45页
     ·双孔流通色谱柱的柱效第45-46页
     ·分离模型蛋白混合物第46页
   ·结果与讨论第46-57页
     ·乳化剂用量对第一次乳化液稳定性的影响第46-47页
     ·乳化过程的测定第47-48页
     ·双孔介质的性能测定第48-49页
     ·微孔球的表征第49-50页
     ·比表面积的测定第50页
     ·密度的测定第50页
     ·吸附容量的测定第50页
     ·孔径的测定第50-51页
     ·静态吸附容量第51-52页
     ·流速对背压的影响第52页
     ·动态吸附容量第52-55页
     ·流速对色谱柱柱效的影响第55-56页
     ·分离模型蛋白混合物第56-57页
   ·本章小结第57-59页
第三章 利用碳酸钙悬浮液作为致孔剂制备双孔介质第59-72页
   ·引言第59-60页
   ·实验材料与设备第60-62页
     ·实验材料第60页
     ·实验仪器与设备第60-62页
   ·实验方法第62-66页
     ·碳酸钙悬浮液的制备第62-63页
     ·利用碳酸钙悬浮液作为致孔剂制备双孔微球第63-64页
     ·致孔剂的去除第64页
     ·表面修饰第64页
     ·微球介质的表征第64-65页
     ·配基修饰及修饰密度的测定第65页
     ·静态吸附容量的测定第65页
     ·两种色谱柱的背压与流速的关系第65页
     ·动态吸附容量的测定第65-66页
   ·结果与讨论第66-71页
     ·两类微球物理特征的比较第66-68页
     ·流速与背压的关系第68-69页
     ·静态吸附第69页
     ·动态吸附第69-71页
   ·本章小结第71-72页
第四章 利用双孔介质纯化分子伴侣 GroEL第72-87页
   ·引言第72-74页
   ·实验试剂与设备第74-76页
     ·实验试剂第74页
     ·实验设备第74页
     ·缓冲液的配制第74-76页
       ·破碎与样品缓冲液第74-75页
       ·SDS-PAGE 电泳相关试剂的配制第75-76页
       ·考马斯亮蓝 G-250 溶液的配制第76页
   ·实验方法第76-79页
     ·发酵培养与 GroEL 蛋白料液的获得第76-77页
     ·料液蛋白浓度的测定第77页
     ·色谱介质的预处理与装柱第77页
     ·双孔色谱介质填充柱的分离步骤第77页
     ·色谱介质填充柱分离纯化 GroEL 蛋白的研究第77-78页
     ·SDS-PAGE 电泳分析方法第78页
     ·料液的穿透分析第78-79页
   ·结果与讨论第79-85页
     ·梯度洗脱第79-82页
     ·穿透点的确定第82页
     ·阶跃洗脱的研究第82-85页
   ·本章小结第85-87页
第五章 利用双孔介质纯化质粒的研究第87-105页
   ·引言第87页
   ·实验材料与设备第87-89页
     ·实验试剂第87页
     ·实验设备第87页
     ·溶液的配制第87-89页
   ·实验方法第89-93页
     ·双孔介质的合成第89页
     ·菌体的活化与质粒的粗提第89-90页
     ·质粒的分离第90页
     ·样品的检测第90-92页
       ·质粒的定性分析第90-92页
       ·质粒的定量分析第92页
     ·不同分子量的质粒 DNA 对分离结果的影响第92页
     ·初始盐浓度对分离的影响第92-93页
     ·穿透实验第93页
   ·实验结果与讨论第93-104页
     ·对质粒的初分离第93-94页
     ·不同分子量大小的质粒的分离纯化第94-95页
     ·不同进样量质粒的纯化第95-97页
     ·不同流速质粒的纯化第97-99页
     ·不同初始盐浓度对质粒分离的影响第99-101页
     ·粗提液的穿透实验第101-104页
     ·双孔介质的再生第104页
   ·本章小结第104-105页
第六章 总结与展望第105-107页
   ·全文结论第105-106页
   ·创新点第106页
   ·对今后工作的建议与展望第106-107页
参考文献第107-119页
攻读博士期间发表的论文第119-120页
附录第120-121页
致谢第121页

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