| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一部分： 引言 | 第7-19页 |
| 1 研究背景及目的 | 第7-13页 |
| ·钙调磷酸酶(CBL)家族 | 第7-8页 |
| ·与CBL相互作用的下游CIPK蛋白家族 | 第8-9页 |
| ·CBL蛋白与CIPK蛋白信号转导系统的激活 | 第9-10页 |
| ·CBL蛋白与CIPK蛋白信号转导系统的表达 | 第10-11页 |
| ·CBL蛋白与CIPK蛋白在植物转导外界胁迫信号中的功能 | 第11-13页 |
| ·SOS信号转导途径 | 第11-12页 |
| ·响应低浓度钾离子的信号转导途径 | 第12页 |
| ·响应高pH值胁迫的信号转导途径 | 第12-13页 |
| 2 实验目的及意义 | 第13页 |
| 3 结构生物学简介 | 第13-19页 |
| ·结构生物学兴起的时代 | 第13-14页 |
| ·结构生物的主要研究技术 | 第14-16页 |
| ·X射线晶体学 | 第14-15页 |
| ·电子晶体学与电镜三维重构技术 | 第15页 |
| ·多维核磁共振技术 | 第15-16页 |
| ·扫描隧道与原子力显微镜技术 | 第16页 |
| ·结构生物学研究现状和展望 | 第16-19页 |
| ·生物大分子三维结构的测试在高速发展 | 第17-18页 |
| ·研究技术方面的新进展 | 第18-19页 |
| 第二部分： 正文 | 第19-38页 |
| 1 实验原理 | 第19-25页 |
| ·PCR实验原理 | 第19页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·SDS-PAGE | 第20-21页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第21页 |
| ·亲和层析 | 第21-22页 |
| ·离子交换层析 | 第22页 |
| ·分子筛 | 第22-23页 |
| ·蛋白晶体生长 | 第23-25页 |
| ·影响蛋白质晶体生长的因素 | 第23-24页 |
| ·蛋白质晶体的生长方法 | 第24-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-38页 |
| ·材料和仪器 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-32页 |
| ·突变体构建 | 第25-28页 |
| ·PCR反应 | 第28页 |
| ·PCR反应产物回收 | 第28页 |
| ·第二次及第三次PCR反应 | 第28-29页 |
| ·限制性酶切反应 | 第29页 |
| ·连接反应 | 第29页 |
| ·感受态细胞制备 | 第29页 |
| ·克隆菌株转化 | 第29页 |
| ·阳性重组子的鉴定与筛选 | 第29-30页 |
| ·质粒提取 | 第30页 |
| ·表达菌株转化及小试表达 | 第30-31页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31页 |
| ·蛋白大量表达纯化 | 第31-32页 |
| ·AmCBL1表面赖氨酸甲基化 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-38页 |
| ·野生型AmCBL1的离子交换和分子筛层析分析 | 第32-34页 |
| ·SDS-PAGE和非变性凝胶电泳 | 第34-35页 |
| ·三个突变体的分子筛层析分析 | 第35页 |
| ·野生型化学修饰后层析分析 | 第35-36页 |
| ·EDTA存在下的非变性胶电泳 | 第36-38页 |
| 第三部分： 结论与讨论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 个人简介 | 第43-45页 |
| 导师简介 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47页 |