第一章 前言 | 第1-17页 |
·植物病原细菌Xcc的概述 | 第8页 |
·植物病原菌的致病生化因子 | 第8-11页 |
·多糖 | 第9页 |
·毒素 | 第9页 |
·生长激素 | 第9页 |
·胞外酶 | 第9-10页 |
·依赖于hrp基因的效应蛋白分子 | 第10-11页 |
·胞外多糖(EPS)的研究进展 | 第11-13页 |
·胞外多糖的结构 | 第11页 |
·胞外多糖的生物合成及调控 | 第11-12页 |
·胞外多糖与致病性 | 第12-13页 |
·脂多糖(LIPOPOLYSACCHARIDE,LPS)的研究进展 | 第13-16页 |
·脂多糖的基本结构和化学组成 | 第13页 |
·脂多糖的生物合成 | 第13-14页 |
·脂多糖的生物学功能 | 第14-15页 |
·Xcc脂多糖研究进展 | 第15-16页 |
·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-32页 |
·材料 | 第17-22页 |
·菌株和质粒 | 第17-18页 |
·培养基、培养条件及菌种保存 | 第18-19页 |
·培养基 | 第18页 |
·培养条件 | 第18页 |
·菌种保存 | 第18-19页 |
·常用抗菌素 | 第19页 |
·常用溶液、缓冲液 | 第19-22页 |
·方法 | 第22-32页 |
·DNA的沉淀 | 第22页 |
·DNA溶液中蛋白质及RNA的去除 | 第22-23页 |
·DNA的凝胶电泳 | 第23页 |
·细菌总DNA的提取 | 第23-24页 |
·Xcc总DNA的快速提取 | 第23页 |
·Xcc总DNA的大量提取 | 第23-24页 |
·质粒的提取 | 第24页 |
·DNA酶切 | 第24页 |
·DNA的连接 | 第24-25页 |
·DNA的电脉冲转化 | 第25页 |
·PCR扩增DNA片段 | 第25-26页 |
·PCR引物的设计 | 第25-26页 |
·PCR反应 | 第26页 |
·三亲本接合 | 第26-27页 |
·整合突变体的构建 | 第27页 |
·整合突变体的验证 | 第27页 |
·突变体的功能互补 | 第27页 |
·脂多糖(LPS)分析 | 第27页 |
·胞外多糖的检测 | 第27-28页 |
·胞外酶的检测 | 第28页 |
·胞外蛋白酶的检测 | 第28页 |
·胞外淀粉酶的检测 | 第28页 |
·胞外纤维素酶的检测 | 第28页 |
·致病性试验 | 第28-29页 |
·过敏反应试验 | 第29页 |
·细菌在寄主内的生长繁殖的测定 | 第29页 |
·细菌在培养基中的生长繁殖曲线的绘制 | 第29-32页 |
第三章 结果与分析 | 第32-51页 |
·用TN5gusA5插入突变体初步筛选致病相关基因 | 第32页 |
·wxcB基因的生物信息学分析 | 第32-40页 |
·wxcB基因在基因组上的位置 | 第32-33页 |
·wxcB基因演绎的氨基酸序列 | 第33-35页 |
·wxcB基因推测蛋白的基本性质分析 | 第35-37页 |
·wxcB基因推测蛋白的同源性比较 | 第37-39页 |
·Xcc B100 WXCB蛋白的结构功能域分析 | 第39-40页 |
·wxcB基因整合突变体的构建 | 第40-41页 |
·wxcB基因整合突变体的验证 | 第41页 |
·整合突变体的功能互补 | 第41-43页 |
·wxcB基因功能鉴定 | 第43-51页 |
·检测致病力 | 第43-45页 |
·突变体及互补菌株致病力的统计学分析 | 第43-44页 |
·过敏反应试验 | 第44-45页 |
·检测生长繁殖情况 | 第45-48页 |
·培养基上(中)生长繁殖情况 | 第45-47页 |
·寄主体内的生长情况 | 第47-48页 |
·检测致病生化因子 | 第48-51页 |
·LPS分析 | 第48-49页 |
·EPS检测 | 第49页 |
·胞外酶检测 | 第49-51页 |
第四章 结论与讨论 | 第51-54页 |
·结论 | 第51页 |
·讨论 | 第51-54页 |
·wxcB基因编码产物的功能预测 | 第51-53页 |
·功能互补试验的两点解释 | 第53-54页 |
·互补菌株胞外多糖增产的原因 | 第53页 |
·反式互补,致病性不完全恢复的原因 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
致谢 | 第61页 |