| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1．1 骨质疏松症及其对人类的危害 | 第10页 |
| 1．2 骨质疏松症的治疗 | 第10页 |
| 1．3 降钙素在治疗骨质疏松中的疗效及前景 | 第10-12页 |
| 1．3．1 降钙素 | 第10-11页 |
| 1．3．2 降钙素在治疗骨质疏松中的疗效及前景 | 第11页 |
| 1．3．3 降钙素的生产方法 | 第11-12页 |
| 1．4 植物生物反应器优点 | 第12-13页 |
| 1．4．1 生物反应器 | 第12页 |
| 1．4．2 传统的生物反应器缺陷 | 第12-13页 |
| 1．4．3 植物反应器的优点 | 第13页 |
| 1．5 植物生物反应器生产药用蛋白现状和前景 | 第13-16页 |
| 1．5．1 利用转基因植物生产疫苗 | 第14-15页 |
| 1．5．2 利用转基因植物生产其它蛋白质和多肽 | 第15-16页 |
| 1．5．3 利用植物生物反应器生产鲑鱼降钙素的优点 | 第16页 |
| 1．6 植物转基因历史概述 | 第16-17页 |
| 1．6．1 植物转基因研究历史简要回顾 | 第16-17页 |
| 1．6．2 生菜转基因研究现状 | 第17页 |
| 1．7 转基因安全性考虑 | 第17-18页 |
| 1．8 选题依据 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2．1 材料 | 第19页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第19页 |
| 2．1．2 菌株和质粒 | 第19页 |
| 2．1．3 酶与试剂盒 | 第19页 |
| 2．1．4 细菌培养基 | 第19页 |
| 2．1．5 植物培养基 | 第19页 |
| 2．1．6 激素和抗生素 | 第19页 |
| 2．2 方法 | 第19-29页 |
| 2．2．1 目的基因的设计合成策略与融合基因构建 | 第19-23页 |
| 2．2．1．1 msCT设计与合成 | 第19-20页 |
| 2．2．1．2 pil基因克隆 | 第20-22页 |
| 2．2．1．3 msCT与pil融合 | 第22-23页 |
| 2．2．2 含“twin T-DNA”植物双元表达载体构建策略 | 第23-27页 |
| 2．2．2．1 pE8 with RB and LB目的片段(平端+Sac Ⅰ)的获得 | 第23-25页 |
| 2．2．2．2 pCA2300(平端+Sac Ⅰ)片段的获得 | 第25-26页 |
| 2．2．2．3 连接、转化、鉴定 | 第26页 |
| 2．2．2．4 p35S-2300-twin T-DNA：：gus构建 | 第26页 |
| 2．2．2．5 p35S-2300-twin T-DNA：：pil-msCT：：noster构建 | 第26页 |
| 2．2．2．6 工程菌的制备(植物表达载体转化农杆菌) | 第26-27页 |
| 2．2．3 生菜农杆菌介导的遗传转化(无菌操作) | 第27-28页 |
| 2．2．4 转基因生菜PCR检测 | 第28页 |
| 2．2．4．1 植物(生菜)总DNA小量抽提法(用于PCR检测) | 第28页 |
| 2．2．4．2 PCR检测体系和反应条件 | 第28页 |
| 2．2．5 田间栽培 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-43页 |
| 3．1 msCT设计和融合基因的构建 | 第29-34页 |
| 3．1．1 msCT设计及鉴定 | 第29-30页 |
| 3．1．2 菌毛蛋白基因的克隆 | 第30-32页 |
| 3．1．3 融合基因pil-msCT的构建 | 第32-34页 |
| 3．2 含“twin T-DNA”植物双元表达载体构建 | 第34-40页 |
| 3．2．1 生菜基因组DNA提取及pE8(LB+RB)获得 | 第34-35页 |
| 3．2．2 pCh2300(平端+Sac Ⅰ)片段的获得 | 第35-36页 |
| 3．2．3 连接、转化、鉴定 | 第36-37页 |
| 3．2．4 p35S-2300-twin T-DNA：：gus：：noster构建 | 第37-38页 |
| 3．2．5 p35S-2300-twin T-DNA：：pil-msCT：：noster构建 | 第38-40页 |
| 3．2．6 工程菌制备 | 第40页 |
| 3．3 生菜遗传转化 | 第40-41页 |
| 3．4 转基因生菜的PCR检测 | 第41-42页 |
| 3．4．1 DNA提取 | 第41页 |
| 3．4．2 目的基因PCR初步检测 | 第41-42页 |
| 3．5 转msCT生菜T1代PCR检测 | 第42-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-47页 |
| 4．1 sCT基因设计的依据 | 第43页 |
| 4．2 共培养时几个因素对转化效率的影响 | 第43-44页 |
| 4．3 转基因植物的安全性 | 第44页 |
| 4．4 转基因生菜进一步分子检测和生菜表达sCT活性 | 第44-45页 |
| 4．5 鲑鱼降钙素植物反应器研制的产业化现状和前景 | 第45-47页 |
| 全文结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
