| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一部分 文献综述 | 第8-35页 |
| 1 玉米基因转化的受体系统 | 第8-13页 |
| ·原生质体受体系统 | 第9-10页 |
| ·愈伤组织受体系统 | 第10-11页 |
| ·外植体受体系统 | 第11-13页 |
| 2 玉米基因导入技术及其发展 | 第13-23页 |
| ·DNA直接导入的基因转化技术 | 第13-18页 |
| ·聚乙二醇(PEG)介导的基因转化 | 第13页 |
| ·脂质体介导法 | 第13-14页 |
| ·电穿孔法 | 第14-15页 |
| ·碳化硅纤维介导DNA转移法 | 第15页 |
| ·注射法 | 第15-16页 |
| ·超声波导入法 | 第16页 |
| ·基因枪法 | 第16-18页 |
| ·农杆菌介导法 | 第18-23页 |
| ·农杆菌介导的玉米遗传转化的研究 | 第19页 |
| ·遗传转化原理 | 第19-20页 |
| ·农杆菌感染玉米能力低的原因 | 第20-21页 |
| ·影响农杆菌转化玉米效率的因素 | 第21-23页 |
| 3 外源基因的表达调控 | 第23-25页 |
| 4 转基因植物中的选择标记基因 | 第25-33页 |
| ·常用的选择标记基因 | 第25-26页 |
| ·选择标记基因的安全性 | 第26-29页 |
| ·抗生素标记基因对环境中的非靶标生物的影响 | 第26-27页 |
| ·植物中食品标记基因的安全性 | 第27-29页 |
| ·除草剂抗性基因可能存在杂草化的生态学风险 | 第29页 |
| ·去除选择标记基因的策略 | 第29-33页 |
| ·共转化 | 第29-30页 |
| ·位点特异性重组 | 第30-31页 |
| ·转座子介导法 | 第31-32页 |
| ·MAT载体系统 | 第32-33页 |
| 5 本研究的目的、意义 | 第33-35页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第35-48页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| ·供试玉米材料 | 第35页 |
| ·质粒载体 | 第35页 |
| ·菌种 | 第35-36页 |
| 2 方法 | 第36-48页 |
| ·双T-DNA单子叶植物表达载体的构建及工程菌的转化 | 第36-40页 |
| ·双T-DNA单子叶植物表达载体的构建 | 第36-38页 |
| ·双T-DNA单子叶植物表达载体的检验 | 第38-39页 |
| ·农杆菌工程菌的制备 | 第39页 |
| ·所用培养基的配制 | 第39-40页 |
| ·农杆菌法转化玉米愈伤 | 第40-43页 |
| ·受体材料准备 | 第40页 |
| ·农杆菌的准备 | 第40页 |
| ·农杆菌共培养法转化愈伤组织 | 第40-41页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选与分化 | 第41页 |
| ·炼苗与移栽 | 第41-42页 |
| ·植物培养基的配制 | 第42页 |
| ·重要试剂的配制 | 第42-43页 |
| ·分子检测 | 第43-48页 |
| ·植物DNA的提取 | 第43-44页 |
| ·转基因玉米的PCR鉴定 | 第44-45页 |
| ·转基因玉米的PCR-Southern鉴定 | 第45-48页 |
| 第三部分 实验结果 | 第48-57页 |
| 1 双T-DNA单子叶植物表达载体 | 第48-49页 |
| ·构建的双T-DNA单子叶植物表达载体 | 第48页 |
| ·双T-DNA单子叶植物表达载体酶切鉴定结果 | 第48-49页 |
| 2 玉米胚性愈伤组织的农杆菌介导法转化体系 | 第49-57页 |
| ·农杆菌共培养法转化愈伤组织的结果 | 第49-50页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选和分化 | 第50-54页 |
| ·最适的潮霉素筛选浓度 | 第50-51页 |
| ·分化最适的潮霉素浓度 | 第51-52页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第52-53页 |
| ·抗性愈伤组织的分化 | 第53-54页 |
| ·抗性苗的炼苗与大田移栽 | 第54页 |
| ·转基因植株的分子检测结果 | 第54-57页 |
| ·T_0代转基因植株的PCR检测结果 | 第54-55页 |
| ·T_0代转基因植株的PCR-Southern检测结果 | 第55-57页 |
| 第四部分 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65页 |