摘要 | 第1-6页 |
一、 文献综述 | 第6-15页 |
1 前言 | 第6页 |
2 性别决定基因 | 第6-10页 |
·SRY基因的发现与证实 | 第6-7页 |
·SRY基因的定位历程 | 第6-7页 |
·SRY基因是TDF的证实 | 第7页 |
·SRY结构 | 第7-8页 |
·SRY基因的作用与功能 | 第8页 |
·它性别决定基因 | 第8-10页 |
·抗苗勒氏管激素基因(AMH) | 第8-9页 |
·类固醇生成因子1(SF | 第9页 |
·威尔姆氏肿瘤抑制基因(WT | 第9页 |
·剂量敏感性反转基因(DSS)和X染色体DSS-AHC决定区基因(DAX | 第9-10页 |
·SOX9基因 | 第10页 |
3 性别决定的分子模 | 第10-11页 |
·Z-基因模型 | 第10页 |
·DSS-基因模型 | 第10页 |
·Jimenez等的模型 | 第10-11页 |
·Jennifer的模型 | 第11页 |
4 性别鉴定的方法及现状 | 第11-15页 |
·细胞遗传学方法 | 第11页 |
·生物化学方法 | 第11-12页 |
·免疫学方法 | 第12-13页 |
·细胞毒性分析法 | 第12页 |
·间接免疫荧光法 | 第12-13页 |
·囊胚形成抑制法 | 第13页 |
·利用怀孕母畜外周血进行胎儿性别鉴定 | 第13页 |
·分子生物学方法 | 第13-15页 |
·Y特异性DNA探针 | 第14页 |
·聚合酶链式反应(PCR)进行鉴定 | 第14页 |
·利用徵卫鉴于鉴定性别 | 第14-15页 |
5 本研究的目的意义 | 第15页 |
二、 材料与方法 | 第15-21页 |
1 、试验材料 | 第15-16页 |
2 、试验方法 | 第16-21页 |
·微卫鉴于标记的选择及引物合成 | 第16-18页 |
·实验的操作流程示意图 | 第18页 |
·数据处理 | 第18页 |
·DNA 提取 | 第18-19页 |
·PCR扩增 | 第19页 |
·PCR产物的检测 | 第19-20页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第19-20页 |
·ABI310遗传分析停留全自动检测 | 第20页 |
·电泳信息收集:基因扫描 | 第20-21页 |
·数据处理:基因分型 | 第21页 |
三、 结果分析 | 第21-48页 |
1 、扩增产物的全自动化分析结果 | 第21-35页 |
2 、扩增产物全自动化分析比较图 | 第35-46页 |
3、性别的判断及等位基因的确定 | 第46-48页 |
四、讨论 | 第48-56页 |
1、SRY基因引物的选择 | 第48-49页 |
·SRY基因引物的同源性 | 第48-49页 |
·SRY基因增片段长度的确定 | 第49页 |
2、微星标记的选择 | 第49-50页 |
3 、所选微卫星标记的等位基因及其多态性 | 第50页 |
4 、多重PCR反应及ABI310遗传分析仪自动检测 | 第50-51页 |
·关于多重PCR反应 | 第50页 |
·ABI310遗传分析仪自动检测 | 第50-51页 |
5 、关于性别鉴定中污染的来源泉和防止 | 第51-52页 |
6 、STR基因扫描技术 | 第52-54页 |
·STR的原理中 | 第52页 |
·Genescan数据分析及其分析软件 | 第52-53页 |
·基因分型中常见问题分析 | 第53-54页 |
·和分型应注意的问题 | 第54页 |
7 、别鉴定方法的优化 | 第54-55页 |
8 、利用所选标记进行性别鉴定的讨论 | 第55-56页 |
五、 结论 | 第56-57页 |
六、 参考文献 | 第57-63页 |
英文摘要 | 第63-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
附表实验所需的主要仪器设备、试剂及消耗材料 | 第66页 |