| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 前言 | 第11-31页 |
| 一、 斑马鱼在遗传学及发育生物学研究中的地位 | 第11-16页 |
| (一) 斑马鱼独特生物学优点 | 第11-13页 |
| 1 、 适于大规模饲养 | 第12页 |
| 2 、 产卵量大，发育速度快 | 第12页 |
| 3 、 胚胎发育同步 | 第12页 |
| 4 、 卵子体外受精，体外发育 | 第12页 |
| 5 、 胚体全透明 | 第12-13页 |
| 6 、 具有基因转移分析的潜能 | 第13页 |
| (二) 近年来的研究进展 | 第13-16页 |
| 1 、 用单倍体和二倍体雌核发育技术鉴定突变 | 第13页 |
| 2 、 应用饱和诱变技术产生突变体 | 第13-14页 |
| 3 、 基因转移研究 | 第14页 |
| 4 、 基因组研究 | 第14-16页 |
| 二、 鱼类核型及显带研究进展 | 第16-21页 |
| (一) 鱼类的核型研究概况 | 第16-17页 |
| (二) 鱼类显带研究 | 第17-21页 |
| 1 、 Ag-NORs法显带 | 第17页 |
| 2 、 C-带 | 第17-18页 |
| 3 、 G带、R带、Q带 | 第18页 |
| 4 、 荧光带 | 第18-19页 |
| 5 、 复制带 | 第19页 |
| 6 、 限制性内切酶介导原位切口平移的显带技术 | 第19-21页 |
| 三、 二价体的研究进展 | 第21-23页 |
| 四、 本研究拟定位基因的研究现状 | 第23-25页 |
| 1 、 生长激素基因(Gh) | 第23-24页 |
| 2 、 杆细胞磷酸二酯酶γ亚单位(PDEG)基因 | 第24-25页 |
| 3 、 胶质细胞原纤维酸性(GFAP)基因 | 第25页 |
| 五、 荧光原位杂交技术在染色体进化的研究进展 | 第25-29页 |
| 1 、 基因定位 | 第27-28页 |
| 2 、 染色体描绘 | 第28页 |
| 3 、 染色体的进化 | 第28-29页 |
| 六、 本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| 材料和方法 | 第31-41页 |
| 一、 实验材料 | 第31-34页 |
| (一) 实验动物 | 第31页 |
| (二) 主要试剂及来源 | 第31页 |
| (三) 引物和探针 | 第31-32页 |
| (四) 本研究常用溶液和配方 | 第32-34页 |
| 二、 实验方法 | 第34-41页 |
| 1 、 斑马鱼的饲养及繁殖 | 第34页 |
| 2 、 斑马鱼有丝分裂染色体制备 | 第34页 |
| 3 、 斑马鱼二价体制备 | 第34-35页 |
| 4 、 限制性内切酶显带 | 第35页 |
| 5 、 基因组DNA制备 | 第35-36页 |
| 6 、 基因组DNA的超声波处理 | 第36页 |
| 7 、 三种基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
| 8 、 PCR产物的回收与纯化 | 第37页 |
| 9 、 DNA片段的生物素标记 | 第37-38页 |
| 10 、 生物素标记结果检测 | 第38页 |
| 11 、 染色体描绘 | 第38-39页 |
| 12 、 单基因片段的荧光原位杂交定位 | 第39页 |
| 13 、 荧光原位杂交的信号检测 | 第39-40页 |
| 14 、 原位杂交信号的统计分析 | 第40-41页 |
| 结果 | 第41-50页 |
| 一、 斑马鱼的核型 | 第41页 |
| 二、 斑马鱼粗线期二价体显带 | 第41-44页 |
| 1 、 一步法显带 | 第41-42页 |
| 2 、 限制性内切酶显带 | 第42-44页 |
| 三、 生物素标记探针的标记效率检测及其分析 | 第44页 |
| 四、 人类17号染色体文库特异DNA探针对斑马鱼染色体的描绘 | 第44-45页 |
| 五、 单基因探针的制备 | 第45-47页 |
| 1 、 GH(含银鲫生长激素基因片段)的探针制备 | 第45-46页 |
| 2 、 杆细胞磷酸二酯酶γ亚单位(PDEG)探针的制备 | 第46页 |
| 3 、 胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)探针的制备 | 第46-47页 |
| 六、 应用FISH技术进行斑马鱼基因定位研究结果 | 第47-50页 |
| 1 、 生长激素基因(GH)的FISH定位结果 | 第47-48页 |
| 2 、 杆细胞磷酸二酯酶γ亚单位(PDEG)的FISH定位结果 | 第48-49页 |
| 3 、 胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的FISH定位结果 | 第49-50页 |
| 讨论 | 第50-60页 |
| 一、 斑马鱼二价体制备的技术关键 | 第50-51页 |
| 二、 显带技术讨论 | 第51-52页 |
| 1 、 碱性低渗结合高氯仿一步处理法显带 | 第51页 |
| 2 、 酶切显带 | 第51-52页 |
| 三、 显带机制的探讨 | 第52-54页 |
| 1 、 G显带的本质探讨 | 第52-53页 |
| 2 、 限制性内切酶显带机制的探讨 | 第53-54页 |
| 四、 染色体二价体制备及高分辨显带技术的前景展望 | 第54-55页 |
| 五、 FISH定位基因研究结果讨论 | 第55-56页 |
| 六、 染色体描绘结果与基因定位结果的对比分析及其意义 | 第56-60页 |
| 图版 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-73页 |
| 在读期间发表的论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
