第一章 文献综述 | 第1-26页 |
1 动物黑色素研究 | 第11-18页 |
·黑色素的合成与运输 | 第11-12页 |
·黑色素生物合成的调节与信号传导 | 第12-14页 |
·黑色素基因及其变异 | 第14-16页 |
·环境对黑色素生物合成的影响 | 第16页 |
·黑色素的功能 | 第16页 |
·乌骨鸡的黑色素相关研究 | 第16-18页 |
2 基因差异表达研究方法 | 第18-24页 |
·差异显示PCR法 | 第18-20页 |
·RC4D技术 | 第19页 |
·有序差异显示 | 第19页 |
·δ差异显示方法 | 第19-20页 |
·PACS法 | 第20页 |
·消减杂交法 | 第20-22页 |
·代表性差异显示分析技术 | 第21页 |
·抑制消减杂交技术 | 第21-22页 |
·应用 | 第22-24页 |
3 研究目标与技术路线 | 第24-26页 |
第二章 全同胞乌骨鸡与非乌骨鸡的PACS扩增 | 第26-44页 |
1 材料与方法 | 第26-38页 |
·材料 | 第26-29页 |
·实验样本 | 第26页 |
·实验试剂 | 第26-29页 |
·方法 | 第29-38页 |
·总RNA的提取与相关检测 | 第29-33页 |
·总RNA的DNaseI消化 | 第33-34页 |
·cDNA合成 | 第34页 |
·编码序列的选择性扩增 | 第34-36页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测与银染显示 | 第36-38页 |
2 结果与分析 | 第38-41页 |
·实验样本 | 第38页 |
·总RNA的检测 | 第38-40页 |
·浓度与纯度检测 | 第38-39页 |
·完整性检测 | 第39-40页 |
·选择性差异扩增结果 | 第40-41页 |
·差异扩增结果 | 第40页 |
·凝胶显示结果的保存 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-44页 |
·样本来源 | 第41页 |
·PACS法 | 第41-42页 |
·分离与显示 | 第42-44页 |
第三章 全同胞乌骨鸡与非乌骨鸡的δ差异显示 | 第44-51页 |
1 材料与方法 | 第44-48页 |
·材料 | 第44页 |
·实验样本 | 第44页 |
·实验试剂 | 第44页 |
·方法 | 第44-48页 |
·总RNA的提取与相关检测 | 第44页 |
·总RNA的DNaseI消化 | 第44页 |
·cDNA合成 | 第44-45页 |
·δ差异显示PCR | 第45-47页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测与银染显示 | 第47-48页 |
2 结果与分析 | 第48-50页 |
·实验样本 | 第48页 |
·总RNA的检测 | 第48页 |
·浓度与纯度检测 | 第48页 |
·完整性检测 | 第48页 |
·δ差异显示结果 | 第48-50页 |
3 讨论 | 第50-51页 |
第四章 差异片段的回收、再扩增、纯化与northern blot | 第51-62页 |
1 材料与方法 | 第51-59页 |
·材料 | 第51-52页 |
·凝胶显示差异片段 | 第51页 |
·实验试剂 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-59页 |
·差异片段的回收 | 第52-53页 |
·差异片段的再扩增 | 第53-54页 |
·再扩增PCR产物的纯化与回收 | 第54-55页 |
·northern blot | 第55-59页 |
2 结果与分析 | 第59-60页 |
·差异片段的再扩增 | 第59页 |
·northern blot | 第59-60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
·差异片段的选择 | 第60页 |
·差异片段的回收 | 第60-61页 |
·northern blot | 第61-62页 |
第五章 阳性差异片段的克隆、测序与序列分析 | 第62-90页 |
1 材料与方法 | 第62-72页 |
·材料 | 第62-64页 |
·纯化后的阳性差异片段 | 第62页 |
·实验试剂 | 第62-64页 |
·方法 | 第64-72页 |
·克隆 | 第64-70页 |
·测序 | 第70-71页 |
·序列分析 | 第71-72页 |
2 结果与分析 | 第72-88页 |
·克隆 | 第72页 |
·克隆的蓝白筛选 | 第72页 |
·克隆片段的鉴定 | 第72页 |
·测序结果 | 第72-78页 |
·序列分析 | 第78-88页 |
3 讨论 | 第88-90页 |
·克隆影响因子的分析 | 第88页 |
·测序有关问题的探讨 | 第88-89页 |
·序列分析结果的讨论 | 第89-90页 |
第六章 差异片段的基因表达分析 | 第90-101页 |
1 材料与方法 | 第90-95页 |
·材料 | 第90页 |
·实验样本 | 第90页 |
·实验试剂 | 第90页 |
·方法 | 第90-95页 |
·总RNA的提取与相关检测 | 第90-91页 |
·差异片段的特异性引物设计 | 第91-93页 |
·RT-PCR | 第93-94页 |
·PAGE与银染显示 | 第94页 |
·拟相关新基因片段的数据库同源分析 | 第94-95页 |
2 结果与分析 | 第95-98页 |
·总RNA的浓度与纯度检测 | 第95页 |
·RT-PCR结果 | 第95-96页 |
·拟相关新基因片段的进一步序列分析 | 第96-98页 |
3 讨论 | 第98-101页 |
·肌球蛋白与黑色素 | 第98页 |
·致癌基因与黑色素 | 第98-100页 |
·酶与黑色素 | 第100-101页 |
第七章 结论 | 第101-104页 |
参考文献 | 第104-115页 |
附录A 部分序列测序峰形图 | 第115-119页 |
附录B 序列同源性搜索结果 | 第119-132页 |
附录C PCR故障检修 | 第132-134页 |
附录D 克隆故障指导 | 第134-136页 |
附录E 银染指导 | 第136-139页 |
附录F 缩写名称 | 第139-141页 |
致谢 | 第141-142页 |
作者简历 | 第142页 |