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乌骨鸡“乌色”相关基因的研究

第一章 文献综述第1-26页
 1 动物黑色素研究第11-18页
   ·黑色素的合成与运输第11-12页
   ·黑色素生物合成的调节与信号传导第12-14页
   ·黑色素基因及其变异第14-16页
   ·环境对黑色素生物合成的影响第16页
   ·黑色素的功能第16页
   ·乌骨鸡的黑色素相关研究第16-18页
 2 基因差异表达研究方法第18-24页
   ·差异显示PCR法第18-20页
     ·RC4D技术第19页
     ·有序差异显示第19页
     ·δ差异显示方法第19-20页
     ·PACS法第20页
   ·消减杂交法第20-22页
     ·代表性差异显示分析技术第21页
     ·抑制消减杂交技术第21-22页
   ·应用第22-24页
 3 研究目标与技术路线第24-26页
第二章 全同胞乌骨鸡与非乌骨鸡的PACS扩增第26-44页
 1 材料与方法第26-38页
   ·材料第26-29页
     ·实验样本第26页
     ·实验试剂第26-29页
   ·方法第29-38页
     ·总RNA的提取与相关检测第29-33页
     ·总RNA的DNaseI消化第33-34页
     ·cDNA合成第34页
     ·编码序列的选择性扩增第34-36页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测与银染显示第36-38页
 2 结果与分析第38-41页
   ·实验样本第38页
   ·总RNA的检测第38-40页
     ·浓度与纯度检测第38-39页
     ·完整性检测第39-40页
   ·选择性差异扩增结果第40-41页
     ·差异扩增结果第40页
     ·凝胶显示结果的保存第40-41页
 3 讨论第41-44页
   ·样本来源第41页
   ·PACS法第41-42页
   ·分离与显示第42-44页
第三章 全同胞乌骨鸡与非乌骨鸡的δ差异显示第44-51页
 1 材料与方法第44-48页
   ·材料第44页
     ·实验样本第44页
     ·实验试剂第44页
   ·方法第44-48页
     ·总RNA的提取与相关检测第44页
     ·总RNA的DNaseI消化第44页
     ·cDNA合成第44-45页
     ·δ差异显示PCR第45-47页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测与银染显示第47-48页
 2 结果与分析第48-50页
   ·实验样本第48页
   ·总RNA的检测第48页
     ·浓度与纯度检测第48页
     ·完整性检测第48页
   ·δ差异显示结果第48-50页
 3 讨论第50-51页
第四章 差异片段的回收、再扩增、纯化与northern blot第51-62页
 1 材料与方法第51-59页
   ·材料第51-52页
     ·凝胶显示差异片段第51页
     ·实验试剂第51-52页
   ·方法第52-59页
     ·差异片段的回收第52-53页
     ·差异片段的再扩增第53-54页
     ·再扩增PCR产物的纯化与回收第54-55页
     ·northern blot第55-59页
 2 结果与分析第59-60页
   ·差异片段的再扩增第59页
   ·northern blot第59-60页
 3 讨论第60-62页
   ·差异片段的选择第60页
   ·差异片段的回收第60-61页
   ·northern blot第61-62页
第五章 阳性差异片段的克隆、测序与序列分析第62-90页
 1 材料与方法第62-72页
   ·材料第62-64页
     ·纯化后的阳性差异片段第62页
     ·实验试剂第62-64页
   ·方法第64-72页
     ·克隆第64-70页
     ·测序第70-71页
     ·序列分析第71-72页
 2 结果与分析第72-88页
   ·克隆第72页
     ·克隆的蓝白筛选第72页
     ·克隆片段的鉴定第72页
   ·测序结果第72-78页
   ·序列分析第78-88页
 3 讨论第88-90页
   ·克隆影响因子的分析第88页
   ·测序有关问题的探讨第88-89页
   ·序列分析结果的讨论第89-90页
第六章 差异片段的基因表达分析第90-101页
 1 材料与方法第90-95页
   ·材料第90页
     ·实验样本第90页
     ·实验试剂第90页
   ·方法第90-95页
     ·总RNA的提取与相关检测第90-91页
     ·差异片段的特异性引物设计第91-93页
     ·RT-PCR第93-94页
     ·PAGE与银染显示第94页
     ·拟相关新基因片段的数据库同源分析第94-95页
 2 结果与分析第95-98页
   ·总RNA的浓度与纯度检测第95页
   ·RT-PCR结果第95-96页
   ·拟相关新基因片段的进一步序列分析第96-98页
 3 讨论第98-101页
   ·肌球蛋白与黑色素第98页
   ·致癌基因与黑色素第98-100页
   ·酶与黑色素第100-101页
第七章 结论第101-104页
参考文献第104-115页
附录A 部分序列测序峰形图第115-119页
附录B 序列同源性搜索结果第119-132页
附录C PCR故障检修第132-134页
附录D 克隆故障指导第134-136页
附录E 银染指导第136-139页
附录F 缩写名称第139-141页
致谢第141-142页
作者简历第142页

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