中文摘要 | 第1-10页 |
综述 | 第10-41页 |
研究论文 | 第41-84页 |
1 前言 | 第41-43页 |
2 材料与方法 | 第43-60页 |
2.1 实验材料 | 第43-44页 |
2.1.1 植物材料 | 第43页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第43页 |
2.1.3 酶及生化试 | 第43页 |
2.1.4 引物 | 第43-44页 |
2.2 实验方法 | 第44-60页 |
2.2.1 花芽的再生及再生花被片、雄蕊和带有胚珠的心皮的诱导和培养 | 第44-45页 |
2.2.2 总RNA的提取 | 第45页 |
2.2.3 反转录 | 第45-46页 |
2.2.4 目的基因的分离 | 第46-52页 |
2.2.4.1 目的基因cDNA片段的扩增 | 第46-47页 |
2.2.4.2 PCR产物与载体的连接 | 第47页 |
2.2.4.3 连接产物的转化 | 第47-48页 |
2.2.4.3.1 感受态细胞的制备 | 第47-48页 |
2.2.4.3.2 连接产物的转化 | 第48页 |
2.2.4.4 重组质粒的筛选与鉴定 | 第48-50页 |
2.2.4.4.1 补筛选 | 第48页 |
2.2.4.4.2 菌落PCR检测 | 第48-49页 |
2.2.4.4.3 单菌落质粒DNA的检测 | 第49页 |
2.2.4.4.4 序列测定 | 第49-50页 |
2.2.4.5 目的基因3’端片段的克隆 | 第50页 |
2.2.4.6 目的基因5’端片段的分离 | 第50-51页 |
2.2.4.7 目的基因全长cDNA的克隆 | 第51-52页 |
2.2.5 基因的表达分析 | 第52-55页 |
2.2.5.1 Northern杂交分析 | 第52-54页 |
2.2.5.2 RT-PCR结合Southern杂交分析 | 第54-55页 |
2.2.6 农杆菌介导的拟南芥的遗传转化 | 第55-60页 |
2.2.6.1 正义HAG1基因表达载体的构建 | 第55-59页 |
2.2.6.2 根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备、转化 | 第59页 |
2.2.6.2.1 感受态细胞的制备 | 第59页 |
2.2.6.2.2 冻融法转化农杆菌 | 第59页 |
2.2.6.3 遗传转化 | 第59-60页 |
2.2.6.4 转基因植物的Northern杂交分析 | 第60页 |
3 结果与分析 | 第60-79页 |
3.1 花芽的再生及花被片、雄蕊和胚珠的分化 | 第60-63页 |
3.2 HAG1、HPI1和HAP2基因的克隆 | 第63-72页 |
3.2.1 HAG1基因的分离及序列特征 | 第63-66页 |
3.2.2 HPH基因的分离及序列特征 | 第66-68页 |
3.2.3 HAP2基因的分离及序列特征 | 第68-72页 |
3.3 基因的表达分析 | 第72-76页 |
3.3.1 HAG1基因的表达分析 | 第72-74页 |
3.3.2 HPI1基因的表达分析 | 第74-76页 |
3.3.3 HAP2基因的表达分析 | 第76页 |
3.4 HAG1表达载体的构建及功能分析 | 第76-79页 |
4 讨论 | 第79-83页 |
4.1 HAG1、HPIl和HAP2基因的特征分析 | 第79-80页 |
4.2 HAG1的功能分析 | 第80-81页 |
4.3 激素调节HAG1基因的表达 | 第81-83页 |
5 结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-100页 |
英文摘要 | 第100-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
在学期间发表的论文 | 第103页 |