目录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
缩写 | 第7-8页 |
1. 前言 | 第8-15页 |
1.1 研究的目的和意义 | 第8页 |
1.2 甜瓜的基因工程研究进展 | 第8-9页 |
1.3 蚜虫对甜瓜的危害 | 第9-10页 |
1.3.2 蚜虫自身取食对甜瓜造成的危害 | 第10页 |
1.4 抗蚜基因简介 | 第10-13页 |
1.4.1 苏云金杆菌毒蛋白基因(Bt基因) | 第10-11页 |
1.4.2 蛋白酶抑制剂基因 | 第11页 |
1.4.3 植物外源凝集素基因 | 第11-12页 |
1.4.4 其他抗虫基因 | 第12-13页 |
1.5 植物外源凝集素ACA | 第13-15页 |
2. 材料与方法 | 第15-28页 |
2.1 材料 | 第15-19页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第15页 |
2.1.2 植物材料 | 第15页 |
2.1.3 测试昆虫 | 第15页 |
2.1.4 主要分子生物学和生物化学试剂 | 第15页 |
2.1.5 培养基 | 第15-16页 |
2.1.6 常用溶液母液的配制 | 第16页 |
2.1.7 常用溶液的配制 | 第16-19页 |
2.2 方法 | 第19-28页 |
2.2.1 pBCACA植物表达载体的构建 | 第19-23页 |
2.2.2 农杆菌介导的烟草转化和再生 | 第23-24页 |
2.2.3 转基因烟草的PCR检测 | 第24页 |
2.2.4 转基因烟草的抗蚜试验 | 第24页 |
2.2.5 转基因烟草Western blot杂交分析 | 第24-25页 |
2.2.6 农杆菌介导的甜瓜转化和再生 | 第25-26页 |
2.2.7 转基因甜瓜的PCR分析 | 第26-27页 |
2.2.8 转基因甜瓜的蚜虫抗性试验 | 第27-28页 |
3. 结果与分析 | 第28-38页 |
3.1 植物表达载体pBCACA的构建 | 第28-31页 |
3.1.1 中间表达载体pBCACA的构建 | 第28-30页 |
3.1.2 pBCACA转化农杆菌 | 第30-31页 |
3.2 ACA基因转化烟草实验 | 第31-34页 |
3.2.1 转基因烟草的PCR检测 | 第31-32页 |
3.2.2 转基因烟草的抗蚜试验 | 第32-33页 |
3.2.3 转基因烟草的Weston blot检测 | 第33-34页 |
3.3 甜瓜的转化和再生 | 第34-35页 |
3.3.1 甜瓜无菌苗的制备 | 第34页 |
3.3.2 甜瓜的转化及培养基条件 | 第34-35页 |
3.3.3 外植体的选用 | 第35页 |
3.4 转基因甜瓜的PCR检测 | 第35-36页 |
3.5 转基因甜瓜植株的获得 | 第36-37页 |
3.6 转基因甜瓜的蚜虫抗性试验 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
致谢 | 第45页 |