| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-29页 |
| ·伪狂犬病病毒(PRV)研究进展 | 第9-22页 |
| ·PRV 的病原学特性 | 第9-10页 |
| ·PRV 基因组结构 | 第10-14页 |
| ·伪狂犬病病毒诊断方法研究进展 | 第14-17页 |
| ·病原学方法 | 第14-16页 |
| ·血清学方法 | 第16-17页 |
| ·强弱毒鉴别诊断 | 第17页 |
| ·PRV 基因工程疫苗研究进展 | 第17-22页 |
| ·PRV 基因缺失疫苗 | 第18-20页 |
| ·PRV 活载体疫苗 | 第20-22页 |
| ·绿色荧光蛋白（GFP）研究进展 | 第22-29页 |
| ·GFP 的分子结构和发光机制 | 第22-23页 |
| ·GFP的生化性质 | 第23-24页 |
| ·影响GFP表达强度的因素 | 第24-25页 |
| ·GFP 在生物学研究中的应用 | 第25-28页 |
| ·展望 | 第28-29页 |
| 第二章 含（GFP）报告基因的伪狂犬病病毒转移载体的构建 | 第29-47页 |
| 引言 | 第29页 |
| 1 材料与方法 | 第29-40页 |
| ·材料 | 第29-32页 |
| ·菌株与质粒 | 第29页 |
| ·酶与试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29-30页 |
| ·主要溶液及试剂的配制 | 第30-31页 |
| ·其它缓冲液 | 第31-32页 |
| ·PCR 引物设计与合成 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-40页 |
| ·PUSK 质粒载体的改造 | 第32-37页 |
| ·pAcGFP1-C1 质粒的转化、提取与鉴定 | 第37-38页 |
| ·绿色荧光蛋白 AcGFP 基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·含绿色荧光蛋白的伪狂犬病毒转移载体的构建 | 第39-40页 |
| ·质粒载体(PUSBH)的酶切 | 第39页 |
| ·酶切产物的回收 | 第39页 |
| ·载体（PUSBH）的去磷酸化 | 第39页 |
| ·外源目的片段(AcGFP)的酶切回收 | 第39页 |
| ·载体（PUSBH）与外源片段(AcGFP)的链接 | 第39-40页 |
| ·链接产物的转化、质粒提取及鉴定 | 第40页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第40页 |
| ·序列测定 | 第40页 |
| 2 结果 | 第40-44页 |
| ·PUSK 质粒载体的改造 | 第40-42页 |
| ·pAcGFP1-C1 质粒的鉴定 | 第42页 |
| ·重组克隆质粒的 PCR 鉴定 | 第42-43页 |
| ·含绿色荧光蛋白的伪狂犬病病毒转移载体的构建 | 第43-44页 |
| ·序列测定 | 第44页 |
| 3 结论与讨论 | 第44-46页 |
| ·关于 PUSK 载体的改造 | 第44-45页 |
| ·绿色荧光蛋白基因（GFP）与其他几种报告基因的对比 | 第45页 |
| ·重组克隆质粒酶切时的几点说明 | 第45页 |
| ·抽提与胶回收纯化 DNA 的比较 | 第45页 |
| ·关于伪狂犬病病毒转移载体及构建 | 第45-46页 |
| ·关于 PRV gG 基因 | 第46页 |
| 4 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 含（GFP）报告基因的伪狂犬病病毒基因缺失载体的表达 | 第47-54页 |
| 引言 | 第47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-51页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·细胞、病毒、质粒与菌株 | 第47页 |
| ·酶和试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器设备 | 第47-48页 |
| ·主要试剂和溶液的配制 | 第48页 |
| ·试验方法 | 第48-51页 |
| ·细胞的准备 | 第48-49页 |
| ·细胞的复苏 | 第48-49页 |
| ·细胞的冻存 | 第49页 |
| ·PRV 病毒的增殖与收获 | 第49页 |
| ·病毒 DNA 的提取 | 第49页 |
| ·重组转移载体质粒（PUSG）的提取 | 第49-50页 |
| ·转染用细胞的准备 | 第50页 |
| ·转移载体质粒（PUSG）DNA 与 PRV 基因组 DNA 的共转染 | 第50-51页 |
| ·重组病毒的筛选与纯化 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-52页 |
| ·病毒 DNA 的提取 | 第51页 |
| ·转移载体质粒 DNA 的提取 | 第51页 |
| ·转移载体质粒与病毒 DNA 的共转染 | 第51-52页 |
| ·重组病毒的筛选与纯化 | 第52页 |
| 3 分析与讨论 | 第52-53页 |
| ·关于病毒 DNA 的提取 | 第52页 |
| ·关于转移载体质粒 DNA 的提取 | 第52页 |
| ·转移载体质粒与病毒 DNA 共转染效率的优化 | 第52-53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 英文摘要 | 第60-61页 |
