| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-40页 |
| 一、鱼类链球菌病研究进展 | 第13-21页 |
| 1 病原 | 第13-14页 |
| 2 形态特征 | 第14-15页 |
| 3 流行病学 | 第15-16页 |
| 4 症状和病理变化 | 第16页 |
| 5 致病机理 | 第16-17页 |
| 6 诊断方法 | 第17-19页 |
| ·常规诊断方法 | 第17-18页 |
| ·自动化检测技术 | 第18页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第18-19页 |
| 7 疫苗的研究现状 | 第19-21页 |
| 二、鱼类疫苗研究的现状 | 第21-32页 |
| 1 鱼类疫苗的发展历程 | 第21-22页 |
| ·试验探索期 | 第21页 |
| ·生产应用期 | 第21-22页 |
| ·攀登发展期 | 第22页 |
| 2 疫苗的种类 | 第22-26页 |
| ·灭活疫苗 | 第22-23页 |
| ·活疫苗 | 第23页 |
| ·亚单位疫苗 | 第23-24页 |
| ·化学疫苗 | 第24页 |
| ·基因工程疫苗 | 第24页 |
| ·合成肽疫苗 | 第24-25页 |
| ·DNA疫苗 | 第25-26页 |
| 3 疫苗的接种途径 | 第26-27页 |
| ·单一给予方式 | 第26页 |
| ·混合给予方式 | 第26-27页 |
| ·多次给予方式 | 第27页 |
| 4 疫苗免疫效果评价 | 第27-30页 |
| ·特异性免疫水平的检测 | 第27-28页 |
| ·非特异性免疫水平的检测 | 第28-29页 |
| ·免疫保护率(RPS) | 第29页 |
| ·免疫保护指数(PI) | 第29-30页 |
| 5 鱼用疫苗发展的前景及存在的问题 | 第30-32页 |
| 参考文献 | 第32-40页 |
| 第二部分 实验研究 | 第40-85页 |
| 研究一 广西罗非鱼链球菌流行菌株的分离鉴定 | 第40-48页 |
| 1 材料 | 第40-42页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·溶液的配制 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41-42页 |
| 2 方法 | 第42-43页 |
| ·采样及细菌培养 | 第42页 |
| ·细菌的纯化 | 第42页 |
| ·革兰氏染色 | 第42页 |
| ·生化鉴定 | 第42页 |
| ·特异性PCR鉴定 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-46页 |
| ·分离培养与染色结果 | 第44页 |
| ·生化鉴定结果 | 第44页 |
| ·PCR鉴定结果 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 研究二 疫苗候选菌株的筛选和疫苗制备 | 第48-55页 |
| 1 材料 | 第48-50页 |
| ·试验鱼以及饲养管理 | 第48-49页 |
| ·候选菌株 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·培养基的配制 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| 2 方法 | 第50-51页 |
| ·细菌扩大培养 | 第50页 |
| ·耐受试验 | 第50页 |
| ·二次攻毒试验 | 第50页 |
| ·候选菌株半数致死量测定 | 第50-51页 |
| ·候选菌株灭活条件的研究 | 第51页 |
| ·疫苗的制备 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-53页 |
| ·耐受试验和攻毒试验结果 | 第51-52页 |
| ·S005菌株半数致死量测定 | 第52页 |
| ·福尔马林对S005灭活试验的结果 | 第52-53页 |
| ·安全性检测结果 | 第53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 研究三 罗非鱼对海豚链球菌疫苗产生免疫应答和保护效果的研究 | 第55-77页 |
| 一、水族箱饲养条件下海豚链球菌疫苗对罗非鱼免疫效果的研究 | 第55-65页 |
| 1 材料 | 第55页 |
| ·试验动物及日常饲养管理 | 第55页 |
| ·海豚链球菌灭活疫苗 | 第55-56页 |
| ·金黄色葡萄球菌悬液 | 第56页 |
| ·抗菌活力测定菌液 | 第56页 |
| ·ELISA包被抗原 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56-57页 |
| ·ELISA检测所用溶液的配制 | 第57-58页 |
| ·主要仪器 | 第58页 |
| 2 方法 | 第58页 |
| ·试验分组与处理 | 第58页 |
| ·WBC和DLC的测定 | 第58页 |
| ·吞噬活性检测 | 第58-59页 |
| ·血清抗菌活力(Ua) | 第59页 |
| ·血清溶菌酶活性(UI) | 第59-60页 |
| ·血清抗体水平 | 第60页 |
| ·攻毒实验 | 第60页 |
| ·统计学处理 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61页 |
| ·WBC和DLC的检测结果 | 第61-62页 |
| ·吞噬活性检测结果 | 第62页 |
| ·血清抗菌活力(Ua) | 第62-63页 |
| ·血清溶菌酶活性(UI) | 第63-64页 |
| ·血清抗体水平 | 第64-65页 |
| ·疫苗的保护效果 | 第65页 |
| 二、池塘小网箱饲养条件下海豚链球菌疫苗对罗非鱼免疫效果的研究 | 第65页 |
| 1 材料 | 第65-66页 |
| ·试验动物及日常饲养管理 | 第65-66页 |
| 2 方法 | 第66-67页 |
| ·试验分组与处理 | 第66页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活力 | 第66-67页 |
| 3 结果 | 第67-72页 |
| ·WBC和DLC的检测结果 | 第67-68页 |
| ·吞噬活性检测结果 | 第68页 |
| ·血清抗菌活力(Ua) | 第68-69页 |
| ·血清溶菌酶活性(UI) | 第69页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活力 | 第69-70页 |
| ·血清抗体水平 | 第70-71页 |
| ·疫苗的保护效果 | 第71-72页 |
| 三、网箱小试的免疫保护效果 | 第72页 |
| 1 材料 | 第72页 |
| 2 方法 | 第72-73页 |
| 3 结果 | 第73页 |
| 四、讨论 | 第73页 |
| ·疫苗免疫对罗非鱼细胞免疫功能的影响 | 第73-74页 |
| ·疫苗免疫对罗非鱼体液免疫功能的影响 | 第74页 |
| ·疫苗免疫对罗非鱼非特异免疫功能的影响 | 第74-75页 |
| ·疫苗免疫对罗非鱼抗病能力的影响 | 第75页 |
| ·不同免疫途径对罗非鱼免疫功能的影响 | 第75-77页 |
| 研究四 罗非鱼血清免疫球蛋白的纯化及分子量的初步分析 | 第77-85页 |
| 1 材料 | 第77-79页 |
| ·试验动物 | 第77页 |
| ·试剂 | 第77-78页 |
| ·SDS-PAGE试剂的配制 | 第78页 |
| ·Western-blot试剂的配制 | 第78-79页 |
| ·主要仪器 | 第79页 |
| 2 方法 | 第79-81页 |
| ·血清制备 | 第79页 |
| ·饱和硫酸铵分步盐析 | 第79页 |
| ·Sephadex G-200柱层析 | 第79-80页 |
| ·Ig纯化效果的检测 | 第80页 |
| ·兔抗罗非鱼Ig多克隆抗体的制备 | 第80页 |
| ·鲟鱼血清Ig的免疫印迹鉴定 | 第80-81页 |
| 3 结果 | 第81-83页 |
| ·两种提取方法的SDS-PAGE检测结果 | 第81页 |
| ·兔抗罗非鱼Ig血清效价ELISA结果 | 第81页 |
| ·罗非鱼纯化血清Ig结构的初步分析 | 第81-83页 |
| 4 讨论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-90页 |
| 结论 | 第90-91页 |
| 附图 | 第91-92页 |
| 1. 罗非鱼发病的病理症状 | 第91页 |
| 2. 罗非鱼血细胞图片 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 个人简历 | 第93页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文、获奖及参加的学术活动情况 | 第93页 |
