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Figla和BDNF对猪和牛卵母细胞及早期胚胎生长发育的影响

提要第1-13页
第一篇 文献综述第13-67页
 第一章 卵泡和卵母细胞发生的分子调控机制第13-27页
  1 生殖系a 因子第15页
  2 新生卵巢同源盒基因第15-16页
  3 Oct4、Sox2 和 Nanog第16-18页
  4 KIT 配体(KITL)和 KIT第18页
  5 抗苗勒激素第18-19页
  6 叉头转录因子2第19-20页
  7 神经营养因子和它们的受体第20-21页
  8 生长分化因子9 和骨形态发生蛋白15第21-22页
  9 成纤维细胞生长因子2 和成纤维细胞生长因子7第22-23页
  10 白血病抑制因子第23-24页
  11 胰岛素样生长因子家族第24-25页
  12 类固醇第25-27页
 第二章 哺乳动物体外受精、孤雌激活和核移植技术的研究进展第27-45页
  1 体外受精第27-30页
   ·研究概况第27-28页
   ·研究方法及进展第28-30页
  2 孤雌生殖第30-34页
   ·研究概况第30-31页
   ·卵母细胞孤雌激活的方法第31-34页
  3 细胞核移植第34-45页
   ·研究进展第34-35页
   ·哺乳动物核移植的基本操作程序第35-45页
 第三章 哺乳动物卵母细胞的成熟和早期胚胎的体外培养第45-67页
  1 卵母细胞体外成熟第45-56页
   ·研究简史第45页
   ·卵母细胞体外成熟的主要环节第45-46页
   ·影响卵母细胞体外成熟的因素第46-56页
  2 胚胎的培养第56-67页
   ·胚胎的培养历史概况第56-57页
   ·培养液的种类,培养液的基本成分及其功用第57-67页
第二篇 试验部分第67-183页
 第一章 Figla 基因的克隆第67-97页
  1 材料与方法第67-78页
   ·材料第67-71页
   ·方法第71-78页
  2 结果与分析第78-92页
   ·Figla 基因的 PCR 扩增第78-79页
   ·克隆片断测序结果第79-80页
   ·基因结构分析第80-88页
   ·磷酸化位点和激酶特异磷酸化位点的预测第88页
   ·Figla 基因序列二级结构预测第88-89页
   ·三级结构预测第89-90页
   ·保守结构域预测第90-91页
   ·Figla 基因m RNA 在各组织间的表达情况第91-92页
  3 讨论第92-95页
   ·SMART 技术第92-93页
   ·Figla 及其相关基因序列分析第93-94页
   ·Figla 基因功能预测分析第94-95页
  4 小结第95-97页
 第二章 牛和猪卵母细胞和早期胚胎中相关基因表达的检测方法的建立第97-127页
  1 材料与方法第98-107页
   ·实验材料第98-100页
   ·方法第100-107页
  2 结果第107-118页
   ·内参引物的鉴定与选择第107-113页
   ·比较不同方法提取卵母细胞和胚胎total RNA第113-115页
   ·比较不同细胞保存方法对total RNA 提取的影响第115-117页
   ·比较不同保存方法对cDNA 品质的的影响第117页
   ·实时荧光定量 PCR 条件的优化第117-118页
  3 讨论第118-125页
   ·荧光染料法在哺乳动物卵母细胞和早期胚胎发育相关基因研究中的应用第118-119页
   ·从微量细胞中提取 RNA 技术第119-121页
   ·引物对实时荧光定量 PCR 的影响第121-122页
   ·模板、引物模板配比关系对实时荧光定量 PCR 的影响第122-123页
   ·内参基因的选择对基因表达相对定量结果的影响第123-125页
  4 小结第125-127页
 第三章 Figla 基因和BDNF 基因在猪和牛卵母细胞和早期胚胎中定量表达的研究第127-159页
  1 材料和方法第128-138页
   ·牛 IVF、PA 和 NT 胚胎的制备和培养第128-132页
   ·猪 PA 胚胎的制备和培养第132-133页
   ·囊胚冷冻第133页
   ·荧光定量 PCR 分析第133-137页
   ·BDNF 荧光染色第137页
   ·统计分析第137-138页
  2 结果与分析第138-153页
   ·NT 胚胎的获得第138-139页
   ·猪和牛卵母细胞和早期胚胎的获得第139-140页
   ·引物的鉴定与选择第140-146页
   ·Figla 和 BDNF 基因表达水平第146-152页
   ·BDNF 在牛囊胚中的定位表达研究第152-153页
  3 讨论第153-157页
   ·基因表达的相对定量第153-155页
   ·Figla基因和BDNF基因在哺乳动物卵母细胞和早期胚胎中的表达第155-156页
   ·不同类型的胚胎在 mRNA 水平中表达差异的研究第156-157页
  4 小结第157-159页
 第四章 BDNF、NGF 对猪和牛早期胚胎发育的影响第159-183页
  1 材料和方法第160-163页
   ·材料第160-161页
   ·方法第161页
   ·试验设计第161-163页
  2 结果与分析第163-176页
   ·培养液中添加 BDNF 对牛 IVF 胚胎体外发育的影响第164-166页
   ·培养液中添加 BDNF 对牛 PA 胚胎体外发育的影响第166-167页
   ·培养液中添加 NGF 对牛 IVF 胚胎体外发育的影响第167-168页
   ·培养液中添加 NGF 对牛 PA 胚胎体外发育的影响第168-170页
   ·培养液中添加 BDNF 对猪 PA 胚胎体外发育的影响第170-171页
   ·培养液中添加 NGF 对猪 PA 胚胎体外发育的影响第171-173页
   ·培养液中添加 BDNF 对牛颗粒细胞体外生长的影响第173-174页
   ·培养液中添加 NGF 对牛颗粒细胞体外增生的影响第174-175页
   ·颗粒细胞生长情况分析第175-176页
  3 讨论第176-182页
   ·BDNF 与生殖系统的关系第176-179页
   ·NGF 与生殖系统的关系第179-181页
   ·颗粒细胞与胚胎发育的关系第181-182页
  4 小结第182-183页
结论第183-185页
参考文献第185-210页
中文摘要第210-214页
英文摘要第214-218页
致谢第218-220页
导师简介第220-221页
作者简介第221-222页

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