提要 | 第1-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-67页 |
第一章 卵泡和卵母细胞发生的分子调控机制 | 第13-27页 |
1 生殖系a 因子 | 第15页 |
2 新生卵巢同源盒基因 | 第15-16页 |
3 Oct4、Sox2 和 Nanog | 第16-18页 |
4 KIT 配体(KITL)和 KIT | 第18页 |
5 抗苗勒激素 | 第18-19页 |
6 叉头转录因子2 | 第19-20页 |
7 神经营养因子和它们的受体 | 第20-21页 |
8 生长分化因子9 和骨形态发生蛋白15 | 第21-22页 |
9 成纤维细胞生长因子2 和成纤维细胞生长因子7 | 第22-23页 |
10 白血病抑制因子 | 第23-24页 |
11 胰岛素样生长因子家族 | 第24-25页 |
12 类固醇 | 第25-27页 |
第二章 哺乳动物体外受精、孤雌激活和核移植技术的研究进展 | 第27-45页 |
1 体外受精 | 第27-30页 |
·研究概况 | 第27-28页 |
·研究方法及进展 | 第28-30页 |
2 孤雌生殖 | 第30-34页 |
·研究概况 | 第30-31页 |
·卵母细胞孤雌激活的方法 | 第31-34页 |
3 细胞核移植 | 第34-45页 |
·研究进展 | 第34-35页 |
·哺乳动物核移植的基本操作程序 | 第35-45页 |
第三章 哺乳动物卵母细胞的成熟和早期胚胎的体外培养 | 第45-67页 |
1 卵母细胞体外成熟 | 第45-56页 |
·研究简史 | 第45页 |
·卵母细胞体外成熟的主要环节 | 第45-46页 |
·影响卵母细胞体外成熟的因素 | 第46-56页 |
2 胚胎的培养 | 第56-67页 |
·胚胎的培养历史概况 | 第56-57页 |
·培养液的种类,培养液的基本成分及其功用 | 第57-67页 |
第二篇 试验部分 | 第67-183页 |
第一章 Figla 基因的克隆 | 第67-97页 |
1 材料与方法 | 第67-78页 |
·材料 | 第67-71页 |
·方法 | 第71-78页 |
2 结果与分析 | 第78-92页 |
·Figla 基因的 PCR 扩增 | 第78-79页 |
·克隆片断测序结果 | 第79-80页 |
·基因结构分析 | 第80-88页 |
·磷酸化位点和激酶特异磷酸化位点的预测 | 第88页 |
·Figla 基因序列二级结构预测 | 第88-89页 |
·三级结构预测 | 第89-90页 |
·保守结构域预测 | 第90-91页 |
·Figla 基因m RNA 在各组织间的表达情况 | 第91-92页 |
3 讨论 | 第92-95页 |
·SMART 技术 | 第92-93页 |
·Figla 及其相关基因序列分析 | 第93-94页 |
·Figla 基因功能预测分析 | 第94-95页 |
4 小结 | 第95-97页 |
第二章 牛和猪卵母细胞和早期胚胎中相关基因表达的检测方法的建立 | 第97-127页 |
1 材料与方法 | 第98-107页 |
·实验材料 | 第98-100页 |
·方法 | 第100-107页 |
2 结果 | 第107-118页 |
·内参引物的鉴定与选择 | 第107-113页 |
·比较不同方法提取卵母细胞和胚胎total RNA | 第113-115页 |
·比较不同细胞保存方法对total RNA 提取的影响 | 第115-117页 |
·比较不同保存方法对cDNA 品质的的影响 | 第117页 |
·实时荧光定量 PCR 条件的优化 | 第117-118页 |
3 讨论 | 第118-125页 |
·荧光染料法在哺乳动物卵母细胞和早期胚胎发育相关基因研究中的应用 | 第118-119页 |
·从微量细胞中提取 RNA 技术 | 第119-121页 |
·引物对实时荧光定量 PCR 的影响 | 第121-122页 |
·模板、引物模板配比关系对实时荧光定量 PCR 的影响 | 第122-123页 |
·内参基因的选择对基因表达相对定量结果的影响 | 第123-125页 |
4 小结 | 第125-127页 |
第三章 Figla 基因和BDNF 基因在猪和牛卵母细胞和早期胚胎中定量表达的研究 | 第127-159页 |
1 材料和方法 | 第128-138页 |
·牛 IVF、PA 和 NT 胚胎的制备和培养 | 第128-132页 |
·猪 PA 胚胎的制备和培养 | 第132-133页 |
·囊胚冷冻 | 第133页 |
·荧光定量 PCR 分析 | 第133-137页 |
·BDNF 荧光染色 | 第137页 |
·统计分析 | 第137-138页 |
2 结果与分析 | 第138-153页 |
·NT 胚胎的获得 | 第138-139页 |
·猪和牛卵母细胞和早期胚胎的获得 | 第139-140页 |
·引物的鉴定与选择 | 第140-146页 |
·Figla 和 BDNF 基因表达水平 | 第146-152页 |
·BDNF 在牛囊胚中的定位表达研究 | 第152-153页 |
3 讨论 | 第153-157页 |
·基因表达的相对定量 | 第153-155页 |
·Figla基因和BDNF基因在哺乳动物卵母细胞和早期胚胎中的表达 | 第155-156页 |
·不同类型的胚胎在 mRNA 水平中表达差异的研究 | 第156-157页 |
4 小结 | 第157-159页 |
第四章 BDNF、NGF 对猪和牛早期胚胎发育的影响 | 第159-183页 |
1 材料和方法 | 第160-163页 |
·材料 | 第160-161页 |
·方法 | 第161页 |
·试验设计 | 第161-163页 |
2 结果与分析 | 第163-176页 |
·培养液中添加 BDNF 对牛 IVF 胚胎体外发育的影响 | 第164-166页 |
·培养液中添加 BDNF 对牛 PA 胚胎体外发育的影响 | 第166-167页 |
·培养液中添加 NGF 对牛 IVF 胚胎体外发育的影响 | 第167-168页 |
·培养液中添加 NGF 对牛 PA 胚胎体外发育的影响 | 第168-170页 |
·培养液中添加 BDNF 对猪 PA 胚胎体外发育的影响 | 第170-171页 |
·培养液中添加 NGF 对猪 PA 胚胎体外发育的影响 | 第171-173页 |
·培养液中添加 BDNF 对牛颗粒细胞体外生长的影响 | 第173-174页 |
·培养液中添加 NGF 对牛颗粒细胞体外增生的影响 | 第174-175页 |
·颗粒细胞生长情况分析 | 第175-176页 |
3 讨论 | 第176-182页 |
·BDNF 与生殖系统的关系 | 第176-179页 |
·NGF 与生殖系统的关系 | 第179-181页 |
·颗粒细胞与胚胎发育的关系 | 第181-182页 |
4 小结 | 第182-183页 |
结论 | 第183-185页 |
参考文献 | 第185-210页 |
中文摘要 | 第210-214页 |
英文摘要 | 第214-218页 |
致谢 | 第218-220页 |
导师简介 | 第220-221页 |
作者简介 | 第221-222页 |