| 内容提要 | 第1-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-26页 |
| ·乙肝病毒（HBV）简介 | 第9-14页 |
| ·乙型肝炎病毒的流行情况 | 第9-10页 |
| ·乙型肝炎病毒的分子生物学 | 第10-12页 |
| ·乙型肝炎病毒在体内的清除 | 第12-14页 |
| ·HBV 治疗性DNA 疫苗 | 第14-17页 |
| ·治疗性DNA 疫苗的作用机理 | 第14-15页 |
| ·HBV 治疗性DNA 疫苗的研究进展 | 第15-17页 |
| ·HBV 治疗性DNA 疫苗面临的挑战 | 第17页 |
| ·重组MVA 病毒疫苗的研究进展 | 第17-19页 |
| ·细胞因子IL-2 的佐剂效应 | 第19-23页 |
| ·细胞因子概述 | 第19页 |
| ·细胞因子类基因佐剂的优点 | 第19-20页 |
| ·细胞因子类基因佐剂的作用机理 | 第20-21页 |
| ·IL-2 在疫苗中的应用 | 第21-23页 |
| ·PRIME-BOOST 免疫策略的优势 | 第23-25页 |
| ·本论文设计思路 | 第25-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-51页 |
| ·常用材料和仪器、试剂 | 第26-32页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·常用试剂配制 | 第28-32页 |
| ·HBV 小蛋白基因(S)与人白细胞介素2（hIL-2）共表达载体质粒的构建和表达 | 第32-40页 |
| ·PCR 合成hIL-2 基因 | 第32-34页 |
| ·内部核糖体插入位点(IRES)基因的获得 | 第34页 |
| ·大肠杆菌E.coli 化学感受态的制备 | 第34页 |
| ·连接产物或质粒转化感受态细胞 | 第34-35页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒 | 第35页 |
| ·BamHⅠ/BglⅡ酶切鉴定 T-easy-hIL-2 和 T-easy-IRES 质粒 | 第35-36页 |
| ·HBV 小蛋白基因（S）与人白细胞介素2（hIL-2）共表达载体质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·阳性对照质粒pVR1012-hIL-2 的构建 | 第37页 |
| ·HBV 重组共表达质粒在真核细胞中的表达分析 | 第37-39页 |
| ·质粒大量提取与定量 | 第39-40页 |
| ·HBV 重组痘病毒载体疫苗的构建 | 第40-44页 |
| ·PCR 扩增HBs 基因片段 | 第40页 |
| ·基因片段HBs 与穿梭质粒pSC11 连接 | 第40页 |
| ·MVA 病毒和穿梭质粒的同源重组 | 第40-42页 |
| ·阳性重组病毒的PCR 鉴定 | 第42页 |
| ·重组病毒在不同细胞系中表达表面抗原 | 第42页 |
| ·重组痘病毒的扩增和纯化 | 第42-43页 |
| ·重组痘病毒滴度测定 | 第43-44页 |
| ·prime-boost 免疫策略的研究 | 第44-51页 |
| ·免疫小鼠 | 第44-45页 |
| ·抗体水平检测 | 第45页 |
| ·CTL 实验 | 第45-48页 |
| ·ELISPOT 实验 | 第48-51页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第51-68页 |
| ·HBV 小蛋白基因（S）与人白细胞介素2（HIL-2）共表达质粒的构建、表达及活性测定 | 第51-57页 |
| ·构建HBV 共表达质粒 | 第51-54页 |
| ·hIL-2 基因的合成 | 第51-52页 |
| ·PCR 提取内部核糖体插入位点(IRES)基因 | 第52页 |
| ·BamHⅠ/BglⅡ酶切鉴定 T-easy-hIL-2 和 T-easy-IRES | 第52页 |
| ·共表达载体质粒的构建和BamHⅠ/BglⅡ双酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·阳性对照质粒pVR1012/hIL-2 的构建 | 第53-54页 |
| ·HBV 各表达质粒目的基因的表达分析 | 第54-56页 |
| ·ELISA 检测HBV 表面抗原基因的表达 | 第54页 |
| ·western blotting 检测hIL-2 的表达 | 第54-55页 |
| ·MTT 法测定hIL-2 的活性 | 第55-56页 |
| ·定量大提质粒 | 第56页 |
| ·本节小结 | 第56-57页 |
| ·重组MVA 疫苗的构建及鉴定 | 第57-64页 |
| ·穿梭载体的构建 | 第57-59页 |
| ·HBV 表面抗原基因的构建 | 第57-58页 |
| ·HBV 表面抗原基因与T-easy 载体连接 | 第58页 |
| ·穿梭载体(HBS/PSC11)的构建结果 | 第58-59页 |
| ·重组MVA 疫苗的制备 | 第59-63页 |
| ·穿梭载体与MVA 在CEF 中同源重组后的瞬时表达分析 | 第59-60页 |
| ·重组MVA 病毒10 轮筛选后的鉴定结果 | 第60-61页 |
| ·重组病毒S/rMVA 扩增后在不同细胞中的抗原表达量与滴度测定 | 第61-63页 |
| ·本节小结 | 第63-64页 |
| ·HBV DNA PRIME/RMVA BOOST 联合疫苗免疫效果的研究 | 第64-68页 |
| ·抗体水平检测 | 第64-65页 |
| ·CTL 实验 | 第65-66页 |
| ·ELISPOT 实验 | 第66-67页 |
| ·本节小结 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 中文摘要 | 第79-83页 |
| ABSTRACT | 第83-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 导师简介 | 第88-90页 |
| 作者简历 | 第90页 |
