| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| ·苏云金芽孢杆菌概述 | 第9-10页 |
| ·苏云金芽孢杆菌杀虫毒素 | 第10-16页 |
| ·苏云金芽孢杆菌杀虫毒素种类 | 第10页 |
| ·苏云金芽孢杆菌δ-内毒素的分类 | 第10-12页 |
| ·苏云金芽孢杆菌cry 基因的鉴定 | 第12-14页 |
| ·苏云金芽孢杆菌δ-内毒素的分子结构及其功能 | 第14-15页 |
| ·Bt 杀虫晶体蛋白的作用机理 | 第15-16页 |
| ·苏云金芽孢杆菌的应用 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第17-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-28页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·菌株与质粒 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19-21页 |
| ·试验方法 | 第21-28页 |
| ·苏云金杆菌DNA 模板的制备 | 第21页 |
| ·DNA 的PCR 扩增 | 第21-23页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第23页 |
| ·感受态细胞的制备（CaC12 法） | 第23页 |
| ·转化 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第24页 |
| ·序列测定及分析 | 第24页 |
| ·E.coli 质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·双酶切 | 第25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳回收 | 第25页 |
| ·T4 DNA-lignase 连接 | 第25页 |
| ·pMAL-c2X-cry1A622 表达载体的鉴定 | 第25-26页 |
| ·目的基因的诱导表达及优化 | 第26页 |
| ·蛋白质的SDS－PAGE 凝胶电泳 | 第26页 |
| ·生物测定 | 第26-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-42页 |
| ·苏云金芽胞杆菌S249 CRY1 型基因的鉴定 | 第28-31页 |
| ·苏云金杆菌质粒DNA 提取样品的检测 | 第28页 |
| ·Cry1 型基因的鉴定 | 第28-31页 |
| ·苏云金芽胞杆菌S249 中的CRY1AB 基因的克隆及序列测定 | 第31-37页 |
| ·利用P-1 引物对进行长片段PCR 扩增及其产物的克隆 | 第31-33页 |
| ·克隆的cry1Ab 基因全序列 | 第33-37页 |
| ·CRY1AB22 基因的E.COLI 中的表达 | 第37-42页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·利用引物P-1Ab 进行PCR 扩增及产物克隆 | 第37-39页 |
| ·含cry1Ab22 基因表达质粒的构建 | 第39页 |
| ·cry1Ab22 基因的表达 | 第39-41页 |
| ·cry1Ab22 产物的活性及生物测定 | 第41-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-44页 |
| ·BTS249 质粒DNA 的提取 | 第42页 |
| ·RFLP 图谱的分析 | 第42页 |
| ·BT-CRY 全长基因PCR 扩增 | 第42页 |
| ·关于感受态细胞 | 第42-43页 |
| ·CRY1AB 基因的多样性 | 第43页 |
| ·结论与未来工作设想 | 第43-44页 |
| ·结论 | 第43页 |
| ·未来工作设想 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录 | 第49-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
