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Wnt/β-catenin信号通路在猪脂肪组织发育过程中的调控作用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
文献综述第11-21页
 第一章 Wnt 信号通路概述第11-15页
   ·Wnt 基因家族第11-12页
   ·Wnt 蛋白第12页
   ·Wnt 信号通路的类型第12-13页
   ·Wnt/β-catenin 信号通路第13-15页
 第二章 Wnt 信号通路在脂肪发育过程中的作用第15-21页
   ·脂肪组织发育的一般规律第15-17页
     ·脂肪细胞的增殖分化过程第15-16页
     ·转录因子调控脂肪细胞分化第16-17页
   ·Wnt 信号通路与脂肪细胞分化的关系第17-21页
     ·wnt 信号抑制脂肪形成第17-18页
     ·wnt 信号抑制脂肪细胞分化的机制第18-21页
试验研究第21-58页
 前言第21-22页
 第三章 猪脂肪组织发育过程中的形态学研究第22-27页
   ·材料与方法第22-24页
     ·试验动物第22页
     ·主要试剂及配方第22-23页
     ·主要仪器第23页
     ·组织的准备第23页
     ·石蜡切片的制备第23页
     ·石蜡切片HE 染色第23页
     ·冰冻切片的制备第23页
     ·冰冻切片油红O 染色第23-24页
   ·结果与分析第24-25页
   ·讨论第25-27页
 第四章 猪脂肪组织发育过程中Wnt/β-catenin 信号通路相关基因及脂肪细胞分化转录因 子的时序表达第27-39页
   ·材料与方法第27-31页
     ·试验动物第27页
     ·主要试剂及配方第27-28页
     ·主要仪器第28-29页
     ·总RNA 提取(TRIzol 法)第29页
     ·反转录第29-30页
     ·PCR 扩增第30页
     ·免疫组化第30页
     ·统计分析第30-31页
     ·结果判定第31页
   ·结果与分析第31-37页
     ·猪脂肪组织发育过程中Wnt/β-catenin 信号通路相关基因的时序表达第31-32页
     ·猪脂肪组织发育过程中脂肪细胞分化转录因子的时序表达第32-34页
     ·猪脂肪组织发育过程中β-catenin 蛋白的时序表达第34-37页
   ·讨论第37-39页
 第五章 TNF-α通过Wnt/β-catenin 信号通路抑制猪前体脂肪细胞的分化第39-51页
   ·材料与方法第39-43页
     ·试验动物第39页
     ·主要试剂及配方第39-41页
     ·主要仪器第41-42页
     ·猪原代脂肪细胞的分离培养第42页
     ·细胞油红O 染色第42页
     ·总RNA 的提取和半定量PCR(参看4.1.4-4.1.6)第42页
     ·蛋白表达分析第42-43页
     ·β-catenin 逆转录病毒干扰载体的构建及转染第43页
     ·统计分析第43页
   ·结果与分析第43-49页
     ·TNF-α抑制猪前体脂肪细胞的分化第43页
     ·TNF-α影响Wnt/β-catenin 信号通路中的相关基因的表达第43-45页
     ·干扰β-catenin 削弱TNF-α对脂肪细胞分化的抑制作用第45-49页
   ·讨论第49-51页
 第六章 猪β-catenin 基因全长CDS 序列的克隆第51-58页
   ·材料与方法第51-54页
     ·试验动物第51页
     ·主要试剂及配方第51页
     ·主要仪器第51-52页
     ·总RNA 提取(TRIzol 法)(参见第四章4.1.4)第52页
     ·反转录(参见第四章4.1.5)第52页
     ·PCR 扩增第52页
     ·扩增产物的分离和克隆第52-54页
     ·克隆产物的鉴定第54页
   ·结果与分析第54-57页
     ·脂肪组织提取 RNA 的完整性第54-55页
     ·Ta 对 β-catenin 引物扩增效率的影响第55页
     ·β-catenin 和 β-actin 基因循环数的确定第55-56页
     ·重组质粒的 PCR 初步鉴定第56页
     ·克隆所得序列及 GenBank 登陆号第56-57页
   ·讨论第57-58页
结论第58-59页
有待于进一步完善或深入研究的问题第59-60页
参考文献第60-66页
附录第66-69页
缩略词表(Abbreviation)第69-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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