摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
文献综述 | 第11-21页 |
第一章 Wnt 信号通路概述 | 第11-15页 |
·Wnt 基因家族 | 第11-12页 |
·Wnt 蛋白 | 第12页 |
·Wnt 信号通路的类型 | 第12-13页 |
·Wnt/β-catenin 信号通路 | 第13-15页 |
第二章 Wnt 信号通路在脂肪发育过程中的作用 | 第15-21页 |
·脂肪组织发育的一般规律 | 第15-17页 |
·脂肪细胞的增殖分化过程 | 第15-16页 |
·转录因子调控脂肪细胞分化 | 第16-17页 |
·Wnt 信号通路与脂肪细胞分化的关系 | 第17-21页 |
·wnt 信号抑制脂肪形成 | 第17-18页 |
·wnt 信号抑制脂肪细胞分化的机制 | 第18-21页 |
试验研究 | 第21-58页 |
前言 | 第21-22页 |
第三章 猪脂肪组织发育过程中的形态学研究 | 第22-27页 |
·材料与方法 | 第22-24页 |
·试验动物 | 第22页 |
·主要试剂及配方 | 第22-23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
·组织的准备 | 第23页 |
·石蜡切片的制备 | 第23页 |
·石蜡切片HE 染色 | 第23页 |
·冰冻切片的制备 | 第23页 |
·冰冻切片油红O 染色 | 第23-24页 |
·结果与分析 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-27页 |
第四章 猪脂肪组织发育过程中Wnt/β-catenin 信号通路相关基因及脂肪细胞分化转录因 子的时序表达 | 第27-39页 |
·材料与方法 | 第27-31页 |
·试验动物 | 第27页 |
·主要试剂及配方 | 第27-28页 |
·主要仪器 | 第28-29页 |
·总RNA 提取(TRIzol 法) | 第29页 |
·反转录 | 第29-30页 |
·PCR 扩增 | 第30页 |
·免疫组化 | 第30页 |
·统计分析 | 第30-31页 |
·结果判定 | 第31页 |
·结果与分析 | 第31-37页 |
·猪脂肪组织发育过程中Wnt/β-catenin 信号通路相关基因的时序表达 | 第31-32页 |
·猪脂肪组织发育过程中脂肪细胞分化转录因子的时序表达 | 第32-34页 |
·猪脂肪组织发育过程中β-catenin 蛋白的时序表达 | 第34-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
第五章 TNF-α通过Wnt/β-catenin 信号通路抑制猪前体脂肪细胞的分化 | 第39-51页 |
·材料与方法 | 第39-43页 |
·试验动物 | 第39页 |
·主要试剂及配方 | 第39-41页 |
·主要仪器 | 第41-42页 |
·猪原代脂肪细胞的分离培养 | 第42页 |
·细胞油红O 染色 | 第42页 |
·总RNA 的提取和半定量PCR(参看4.1.4-4.1.6) | 第42页 |
·蛋白表达分析 | 第42-43页 |
·β-catenin 逆转录病毒干扰载体的构建及转染 | 第43页 |
·统计分析 | 第43页 |
·结果与分析 | 第43-49页 |
·TNF-α抑制猪前体脂肪细胞的分化 | 第43页 |
·TNF-α影响Wnt/β-catenin 信号通路中的相关基因的表达 | 第43-45页 |
·干扰β-catenin 削弱TNF-α对脂肪细胞分化的抑制作用 | 第45-49页 |
·讨论 | 第49-51页 |
第六章 猪β-catenin 基因全长CDS 序列的克隆 | 第51-58页 |
·材料与方法 | 第51-54页 |
·试验动物 | 第51页 |
·主要试剂及配方 | 第51页 |
·主要仪器 | 第51-52页 |
·总RNA 提取(TRIzol 法)(参见第四章4.1.4) | 第52页 |
·反转录(参见第四章4.1.5) | 第52页 |
·PCR 扩增 | 第52页 |
·扩增产物的分离和克隆 | 第52-54页 |
·克隆产物的鉴定 | 第54页 |
·结果与分析 | 第54-57页 |
·脂肪组织提取 RNA 的完整性 | 第54-55页 |
·Ta 对 β-catenin 引物扩增效率的影响 | 第55页 |
·β-catenin 和 β-actin 基因循环数的确定 | 第55-56页 |
·重组质粒的 PCR 初步鉴定 | 第56页 |
·克隆所得序列及 GenBank 登陆号 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-58页 |
结论 | 第58-59页 |
有待于进一步完善或深入研究的问题 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录 | 第66-69页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简介 | 第71页 |