摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第1章 引言 | 第8-14页 |
·雄性发育·雄性感觉神经元·CEM | 第8-10页 |
·线虫 | 第10-12页 |
·线虫的生物学特性 | 第10页 |
·为什么秀丽线虫是优秀模型生物 | 第10-11页 |
·线虫遗传学研究历史和现状 | 第11-12页 |
·选题意义 | 第12-14页 |
第2章 实验材料 | 第14-18页 |
·虫株 | 第14页 |
·菌株 | 第14页 |
·实验器材 | 第14-15页 |
·实验设备 | 第15-16页 |
·实验试剂 | 第16-17页 |
·常用试剂配制及实验材料置备 | 第17-18页 |
第3章 突变体筛选 | 第18-23页 |
·实验原理 | 第18页 |
·EMS 诱变 | 第18页 |
·实验方法 | 第18-21页 |
·线虫常规培养 | 第18-19页 |
·EMS 诱变 | 第19-20页 |
·突变体筛选 | 第20-21页 |
·实验结果 | 第21-23页 |
·THU99/smt18 | 第21-23页 |
第4章 突变体表型分析 | 第23-27页 |
·实验原理 | 第23页 |
·异型杂交(outcross) | 第23页 |
·实验方法 | 第23-24页 |
·异型杂交策略 | 第23-24页 |
·实验结果 | 第24-27页 |
·CEM 缺失 | 第24-25页 |
·尾部发育异常 | 第25-26页 |
·异型杂交结果 | 第26-27页 |
第5章 突变体遗传学分析 | 第27-35页 |
·实验原理 | 第27-30页 |
·ced-3 与经典凋亡通路 | 第27-28页 |
·sop-2 | 第28页 |
·构建双突变体 | 第28-29页 |
·基因互补实验(complementation test) | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-33页 |
·鉴定smt18 是否通过经典凋亡通路调控CEM 死亡 | 第30-33页 |
·ced-3 分子生物学鉴定方法 | 第30-31页 |
·线虫全基因组的获得ced-3 分子生物学鉴定方法 | 第30-31页 |
·线虫PCR | 第31页 |
·酶切和琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
·ced-3;smt18 双突变体 | 第31-33页 |
·构建ced-3;smt18 双突变体 | 第31-32页 |
·鉴定ced-3 是否能抑制Smt18 性状 | 第32-33页 |
·鉴定smt18 与sop-2 是否为等位基因 | 第33页 |
·互补实验 | 第33页 |
·实验结果 | 第33-35页 |
·smt18 不通过经典凋亡通路调控CEM 死亡 | 第33-34页 |
·smt18 非sop-2 等位基因 | 第34-35页 |
第6章 SMT18 定位 | 第35-44页 |
·实验原理 | 第35-40页 |
·染色体定位 | 第35-36页 |
·SNP 定位 | 第36-40页 |
·实验方法 | 第40-43页 |
·染色体定位 | 第40-42页 |
·SNP 定位 | 第42-43页 |
·实验结果 | 第43-44页 |
·smt18 位于II 染色体 | 第43页 |
·smt18 遗传位置非常接近8.16 | 第43-44页 |
第7章 突变基因克隆 | 第44-50页 |
·实验原理 | 第44-46页 |
·DNA 转化 | 第44页 |
·DNA 转化需要考虑的因素 | 第44-46页 |
·显微注射 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-49页 |
·突变基因修复(genetic rescue) | 第46-49页 |
·实验结果 | 第49-50页 |
第8章 结论 | 第50-54页 |
·结果总结 | 第50页 |
·结果分析 | 第50-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附录A 常用溶液配制方法 | 第58-60页 |
附录B 实验中使用的特殊处理流程 | 第60-61页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第61页 |