中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-13页 |
第一章 文献的综述 | 第13-21页 |
1 铅的细胞毒性损伤机理 | 第13-16页 |
·铅对钙磷代谢的影响 | 第13-14页 |
·铅对碱性磷酸酶和骨钙素的影响 | 第14-15页 |
·铅对细胞内钙离子及钙调蛋白影响 | 第15-16页 |
2 磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C | 第16-18页 |
·磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C 的概述 | 第16-17页 |
·钙离子与磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C 的相互关系 | 第17-18页 |
参考文献 | 第18-21页 |
第二章 SD 乳鼠成骨细胞的体外培养及鉴定 | 第21-29页 |
1 材料 | 第21-22页 |
·试验动物 | 第21-22页 |
·主要试剂与材料 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
2 方法 | 第22-24页 |
·溶液的配制 | 第22-23页 |
·大鼠成骨细胞的分离培养 | 第23页 |
·成骨细胞的鉴定 | 第23-24页 |
·形态学观察 | 第23页 |
·碱性磷酸酶(ALP)染色 | 第23页 |
·矿化结节染色 | 第23-24页 |
3 结果 | 第24-26页 |
·大鼠成骨细胞的形态 | 第24-25页 |
·成骨细胞的鉴定 | 第25-26页 |
4 讨论 | 第26-27页 |
·成骨细胞的来源、分离及培养 | 第26页 |
·成骨细胞的鉴定 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-29页 |
第三章 铅对成骨细胞形态与增殖分化的影响 | 第29-37页 |
1 材料 | 第30页 |
·试验动物 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
2 方法 | 第30-32页 |
·主要试剂的配制 | 第30页 |
·成骨细胞分离培养及鉴定 | 第30-31页 |
·置相差显微镜观察成骨细胞的形态 | 第31页 |
·MTT 法检测成骨细胞增殖 | 第31页 |
·细胞内ALP 活性的测定 | 第31页 |
·统计分析 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-34页 |
·铅对成骨细胞形态的影响 | 第32-33页 |
·铅对成骨细胞增殖的影响 | 第33页 |
·铅对成骨细胞ALP 活性的影响 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-35页 |
·铅对成骨细胞形态的影响 | 第34-35页 |
·铅对成骨细胞增殖分化的影响 | 第35页 |
参考文献 | 第35-37页 |
第四章 铅对成骨细胞钙调蛋白的影响 | 第37-49页 |
1 材料 | 第37-41页 |
·试验动物 | 第37页 |
·成骨细胞培养相关材料及仪器 | 第37页 |
·总蛋白抽提相关材料及仪器 | 第37-38页 |
·钙调蛋白的mRNA 纯度与浓度相关材料与仪器 | 第38页 |
·逆转录PCR(RT–PCR) 相关材料及仪器 | 第38页 |
·琼脂糖凝胶电泳的相关材料及仪器 | 第38-39页 |
·SDS-PAGE 相关材料及仪器 | 第39-40页 |
·免疫印迹(Western Blotting)相关材料及仪器 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-44页 |
·成骨细胞分离培养及鉴定 | 第41页 |
·总RNA 的抽提与测定 | 第41页 |
·逆转录合成cDNA | 第41-43页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第43页 |
·SDS-PAGE 与Western Blot 实验 | 第43-44页 |
·统计分析 | 第44页 |
3 结果 | 第44-46页 |
·抽提的成骨细胞总mRNA 纯度与浓度的测定 | 第44-45页 |
·成骨细胞钙调蛋白表达量的测定 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-49页 |
第五章 铅对成骨细胞PC-PLC 的影响 | 第49-58页 |
1 材料 | 第49-51页 |
·成骨细胞培养相关材料及仪器 | 第49页 |
·PC–PLC 酶活性测定相关材料及仪器 | 第49-50页 |
·蛋白浓度测定的相关材料及仪器 | 第50页 |
·SDS-PAGE 相关材料及仪器 | 第50页 |
·免疫印迹(Western Blot)相关材料及仪器 | 第50-51页 |
2 方法 | 第51-52页 |
·分组及细胞培养 | 第51页 |
·PC-PLC 活性的测定 | 第51页 |
·细胞裂解液中总蛋白的测定 | 第51页 |
·磷脂酰胆碱特异性磷脂酶蛋白表达量的测定 | 第51-52页 |
·统计分析 | 第52页 |
3 结果 | 第52-55页 |
·醋酸铅溶液对PC-PLC 活性的影响 | 第52-53页 |
·成骨细胞PC-PLC 活性的测定 | 第53-54页 |
·醋酸铅对成骨细胞磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C 蛋白含量的影响 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-58页 |
全文结论 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第60页 |