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铅对SD乳鼠成骨细胞毒性机理的研究

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
第一章 文献的综述第13-21页
 1 铅的细胞毒性损伤机理第13-16页
   ·铅对钙磷代谢的影响第13-14页
   ·铅对碱性磷酸酶和骨钙素的影响第14-15页
   ·铅对细胞内钙离子及钙调蛋白影响第15-16页
 2 磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C第16-18页
   ·磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C 的概述第16-17页
   ·钙离子与磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C 的相互关系第17-18页
 参考文献第18-21页
第二章 SD 乳鼠成骨细胞的体外培养及鉴定第21-29页
 1 材料第21-22页
   ·试验动物第21-22页
   ·主要试剂与材料第22页
   ·主要仪器第22页
 2 方法第22-24页
   ·溶液的配制第22-23页
   ·大鼠成骨细胞的分离培养第23页
   ·成骨细胞的鉴定第23-24页
     ·形态学观察第23页
     ·碱性磷酸酶(ALP)染色第23页
     ·矿化结节染色第23-24页
 3 结果第24-26页
   ·大鼠成骨细胞的形态第24-25页
   ·成骨细胞的鉴定第25-26页
 4 讨论第26-27页
   ·成骨细胞的来源、分离及培养第26页
   ·成骨细胞的鉴定第26-27页
 参考文献第27-29页
第三章 铅对成骨细胞形态与增殖分化的影响第29-37页
 1 材料第30页
   ·试验动物第30页
   ·主要试剂第30页
   ·主要仪器第30页
 2 方法第30-32页
   ·主要试剂的配制第30页
   ·成骨细胞分离培养及鉴定第30-31页
   ·置相差显微镜观察成骨细胞的形态第31页
   ·MTT 法检测成骨细胞增殖第31页
   ·细胞内ALP 活性的测定第31页
   ·统计分析第31-32页
 3 结果第32-34页
   ·铅对成骨细胞形态的影响第32-33页
   ·铅对成骨细胞增殖的影响第33页
   ·铅对成骨细胞ALP 活性的影响第33-34页
 4 讨论第34-35页
   ·铅对成骨细胞形态的影响第34-35页
   ·铅对成骨细胞增殖分化的影响第35页
 参考文献第35-37页
第四章 铅对成骨细胞钙调蛋白的影响第37-49页
 1 材料第37-41页
   ·试验动物第37页
   ·成骨细胞培养相关材料及仪器第37页
   ·总蛋白抽提相关材料及仪器第37-38页
   ·钙调蛋白的mRNA 纯度与浓度相关材料与仪器第38页
   ·逆转录PCR(RT–PCR) 相关材料及仪器第38页
   ·琼脂糖凝胶电泳的相关材料及仪器第38-39页
   ·SDS-PAGE 相关材料及仪器第39-40页
   ·免疫印迹(Western Blotting)相关材料及仪器第40-41页
 2 方法第41-44页
   ·成骨细胞分离培养及鉴定第41页
   ·总RNA 的抽提与测定第41页
   ·逆转录合成cDNA第41-43页
   ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳第43页
   ·SDS-PAGE 与Western Blot 实验第43-44页
   ·统计分析第44页
 3 结果第44-46页
   ·抽提的成骨细胞总mRNA 纯度与浓度的测定第44-45页
   ·成骨细胞钙调蛋白表达量的测定第45-46页
 4 讨论第46-48页
 参考文献第48-49页
第五章 铅对成骨细胞PC-PLC 的影响第49-58页
 1 材料第49-51页
   ·成骨细胞培养相关材料及仪器第49页
   ·PC–PLC 酶活性测定相关材料及仪器第49-50页
   ·蛋白浓度测定的相关材料及仪器第50页
   ·SDS-PAGE 相关材料及仪器第50页
   ·免疫印迹(Western Blot)相关材料及仪器第50-51页
 2 方法第51-52页
   ·分组及细胞培养第51页
   ·PC-PLC 活性的测定第51页
   ·细胞裂解液中总蛋白的测定第51页
   ·磷脂酰胆碱特异性磷脂酶蛋白表达量的测定第51-52页
   ·统计分析第52页
 3 结果第52-55页
   ·醋酸铅溶液对PC-PLC 活性的影响第52-53页
   ·成骨细胞PC-PLC 活性的测定第53-54页
   ·醋酸铅对成骨细胞磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C 蛋白含量的影响第54-55页
 4 讨论第55-56页
 参考文献第56-58页
全文结论第58-59页
致谢第59-60页
攻读学位期间发表的学术论文目录第60页

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