| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-16页 |
| ·蜘蛛拖丝蛋白 | 第8-12页 |
| ·蜘蛛和蜘蛛丝 | 第8-10页 |
| ·蜘蛛丝蛋白的研制 | 第10-11页 |
| ·蜘蛛丝的潜在应用价值 | 第11-12页 |
| ·动物转基因 | 第12-13页 |
| ·动物转基因研究 | 第12页 |
| ·体细胞核移植 | 第12-13页 |
| ·成纤维细胞的应用 | 第13-14页 |
| ·启动子及报告基因 | 第14-15页 |
| ·启动子的相关研究 | 第14页 |
| ·报告基因 | 第14-15页 |
| ·研究目的及意义 | 第15-16页 |
| 2 小鼠成纤维细胞系的建立 | 第16-22页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·实验动物 | 第16页 |
| ·实验药品 | 第16页 |
| ·实验仪器 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-19页 |
| ·胎鼠皮肤的获得及保存 | 第17页 |
| ·成纤维细胞的原代培养 | 第17页 |
| ·成纤维细胞的传代培养 | 第17-18页 |
| ·原代培养细胞的冷冻-复苏及传代培养 | 第18页 |
| ·观察与数据统计 | 第18-19页 |
| ·实验结果 | 第19-20页 |
| ·4℃条件下保存时间及方法对原代培养成纤维细胞贴壁及汇合的影响 | 第19页 |
| ·4℃条件下保存时间及方法对传代培养成纤维细胞贴壁及汇合的影响 | 第19-20页 |
| ·4℃条件下保存时间对原代培养成纤维细胞冷冻-复苏后贴壁及汇合的影响 | 第20页 |
| ·讨论 | 第20-21页 |
| ·本章小结 | 第21-22页 |
| 3 蜘蛛拖丝蛋白基因的合成及二聚化 | 第22-30页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·实验菌种及质粒 | 第22页 |
| ·主要试剂配制 | 第22页 |
| ·主要药品的配制 | 第22-23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-26页 |
| ·人工合成的拖丝蛋白基因单体 | 第24-25页 |
| ·拖丝蛋白基因的二聚化 | 第25-26页 |
| ·实验结果 | 第26-29页 |
| ·讨论 | 第29页 |
| ·本章小结 | 第29-30页 |
| 4 小鼠超高硫角蛋白启动子的克隆及载体构建 | 第30-42页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·实验动物及菌种 | 第30页 |
| ·载体信息 | 第30-31页 |
| ·实验主要试剂 | 第31页 |
| ·主要药品的配制 | 第31-32页 |
| ·只要仪器设备 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-36页 |
| ·小鼠超高硫角蛋白(UHS)启动子的克隆及序列分析 | 第32-34页 |
| ·小鼠超高硫角蛋白(UHS)启动子表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·UHS-GFP的活性检测 | 第35页 |
| ·UHS-β-gal的活性检测 | 第35-36页 |
| ·实验结果 | 第36-40页 |
| ·小鼠超高硫角蛋白(UHS)启动子的克隆 | 第36-37页 |
| ·小鼠超高硫角蛋白(UHS)启动子表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·小鼠超高硫角蛋白(UHS)启动子的活性检测 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 5 真和表达载体的构建及转染小鼠成纤维细胞 | 第42-47页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验动物及菌种 | 第42页 |
| ·载体信息 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·UHS-2S-3.1表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·细胞转染 | 第43页 |
| ·转染细胞的筛选 | 第43页 |
| ·转染细胞的基因组PCR鉴定 | 第43-44页 |
| ·实验结果 | 第44-46页 |
| ·UHS-2S-3.1表达载体的构建与鉴定 | 第44-45页 |
| ·转染细胞的PCR基因组鉴定 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
