| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 1 抗软腐病转aiiA基因魔芋的抗病性分析 | 第13-29页 |
| ·魔芋及其软腐病防治研究进展 | 第13-23页 |
| ·魔芋简介 | 第13-17页 |
| ·魔芋资源及其分布 | 第13页 |
| ·魔芋的生物学习性 | 第13-14页 |
| ·魔芋的成分 | 第14页 |
| ·魔芋的功用 | 第14-16页 |
| ·魔芋研究概况及发展前景 | 第16-17页 |
| ·魔芋软腐病的防治研究进展 | 第17-20页 |
| ·软腐病的危害 | 第17-18页 |
| ·魔芋软腐病防治的研究进展 | 第18-19页 |
| ·aiiA基因及其在防治软腐病中的应用 | 第19-20页 |
| ·魔芋转化的研究进展 | 第20-23页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化机理及应用 | 第20-21页 |
| ·魔芋转基因研究进展 | 第21-23页 |
| ·材料与方法 | 第23-24页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·培养基与培养条件 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-24页 |
| ·魔芋的种植 | 第23-24页 |
| ·转基因魔芋的抗病性检测 | 第24页 |
| ·胡萝卜软腐欧文氏菌SCG1悬浮液的制备 | 第24页 |
| ·软腐病接种及鉴定 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-27页 |
| ·魔芋植株的种植及其传代 | 第24页 |
| ·转基因魔芋的抗软腐病检测 | 第24-27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 2 利用双向电泳技术分析枯草芽胞杆菌BSn5中的一种新型抑菌蛋白 | 第29-56页 |
| ·枯草芽胞杆菌产生的抑菌物质及蛋白质双向电泳和质谱技术简介 | 第29-38页 |
| ·枯草芽胞杆菌产生的抑菌物质 | 第29-31页 |
| ·枯草芽胞杆菌简介 | 第29页 |
| ·枯草芽胞杆菌产生的抑菌物质 | 第29-31页 |
| ·枯草芽胞杆菌分泌的低分子量抗菌素 | 第29-30页 |
| ·枯草芽胞杆菌产生的高分子量抗菌蛋白质 | 第30-31页 |
| ·细菌的分泌系统及分泌机制 | 第31-34页 |
| ·革兰氏阴性细菌的分泌系统 | 第31-33页 |
| ·Ⅰ型分泌系统 | 第31页 |
| ·Ⅱ型分泌系统 | 第31-32页 |
| ·Ⅲ型分泌系统 | 第32页 |
| ·Ⅳ型分泌系统 | 第32页 |
| ·Ⅴ型分泌系统 | 第32-33页 |
| ·革兰氏阳性细菌——枯草芽胞杆菌的分泌系统 | 第33-34页 |
| ·Sec途径 | 第33页 |
| ·Tat途径 | 第33-34页 |
| ·其它分泌途径 | 第34页 |
| ·蛋白质的双向电泳技术 | 第34-35页 |
| ·双向电泳技术简介 | 第34-35页 |
| ·双向电泳技术的应用 | 第35页 |
| ·蛋白质的质谱分析技术 | 第35-38页 |
| ·质谱技术的发展 | 第35-36页 |
| ·质谱技术在蛋白质鉴定中的应用 | 第36页 |
| ·MALDI-TOF的原理 | 第36-38页 |
| ·材料与方法 | 第38-47页 |
| ·实验材料 | 第38-40页 |
| ·菌株与质粒 | 第38页 |
| ·培养基及培养条件 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38-40页 |
| ·基本试剂 | 第38页 |
| ·双向电泳相关溶液 | 第38-39页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳相关溶液 | 第39-40页 |
| ·其余溶液和试剂的配制 | 第40页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·枯草芽胞杆菌BSn5胞外蛋白的提取与纯化 | 第40-41页 |
| ·枯草芽胞杆菌胞外蛋白的提取 | 第40-41页 |
| ·抑菌蛋白APn5粗提液的截留纯化 | 第41页 |
| ·抑菌蛋白APn5溶液的浓度测定 | 第41页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测APn5蛋白 | 第41-42页 |
| ·APn5蛋白抑制软腐病菌的活性检测 | 第42页 |
| ·双向电泳检测APn5蛋白 | 第42-44页 |
| ·第一向等电点聚焦 | 第42-43页 |
| ·胶条的平衡 | 第43页 |
| ·第二向SDS-PAGE电泳 | 第43-44页 |
| ·抑菌蛋白APn5的质谱分析与氨基酸序列测定 | 第44页 |
| ·DNA的制备 | 第44-45页 |
| ·大肠杆菌质粒的制备(碱裂解法) | 第44页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的少量快速提取及检测 | 第44-45页 |
| ·枯草芽胞杆菌总DNA的制备 | 第45页 |
| ·DNA的纯化 | 第45页 |
| ·PCR扩增 | 第45页 |
| ·DNA的体外重组操作 | 第45-46页 |
| ·DNA序列的测定与分析 | 第46-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-55页 |
| ·抑菌蛋白APn5的提取纯化 | 第47-48页 |
| ·抑菌蛋白APn5的提取、截留纯化及SDS-PAGE检测 | 第47页 |
| ·抑菌蛋白APn5溶液的浓度测定 | 第47-48页 |
| ·APn5蛋白抑制胡萝卜软腐欧文氏菌SCG1 | 第48页 |
| ·APn5的双向电泳分析 | 第48-49页 |
| ·APn5的质谱分析 | 第49-51页 |
| ·BSn5中hag基因的敲除 | 第51-55页 |
| ·hag基因敲除的策略 | 第51-52页 |
| ·hag基因和Erm~R抗性基因的PCR扩增及克隆 | 第52-53页 |
| ·hag基因上臂、下臂的PCR扩增和克隆 | 第53页 |
| ·双交换载体pUC19-hag::Erm的构建 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 总结 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67页 |
