| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| ·中国石油生产的现状 | 第9-10页 |
| ·中国石油生产的回顾 | 第9页 |
| ·中国石油生产存在问题 | 第9-10页 |
| ·解决困境的方法----微生物采油 | 第10-14页 |
| ·什么是微生物采油 | 第10-11页 |
| ·微生物强化采油技术的发展现状 | 第11-12页 |
| ·微生物强化采油机理 | 第12-14页 |
| ·构建石油微生物基因工程菌的技术方案 | 第14-15页 |
| ·热休克蛋白 | 第15-17页 |
| ·什么是热休克蛋白 | 第15-16页 |
| ·热休克蛋白逆境抗性的机制 | 第16页 |
| ·热休克蛋白对细胞的作用 | 第16-17页 |
| ·工具菌种的介绍 | 第17-19页 |
| ·Zymomonas mobilis | 第17页 |
| ·大肠杆菌(Escherichia coli) | 第17-18页 |
| ·超嗜热菌强烈火球菌（Pyrococcus furiosus） | 第18页 |
| ·石油微生物 hub5PN | 第18-19页 |
| 第二章 石油微生物基因工程菌的构建 | 第19-36页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·材料与方法 | 第19-21页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·主要的培养基的配制 | 第21页 |
| ·主要溶液与缓冲液的配制 | 第21-22页 |
| ·细菌的培养 | 第22-23页 |
| ·分子实验操作 | 第23-29页 |
| ·PCR 反应 | 第23页 |
| ·质粒提取 | 第23-24页 |
| ·染色体的提取 | 第24页 |
| ·DNA 片段的纯化回收 | 第24-25页 |
| ·酶切与连接 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳实验方法 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·石油微生物 hub5PN 感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·转化与筛选 | 第28页 |
| ·克隆的鉴定 | 第28页 |
| ·转座与筛选 | 第28-29页 |
| ·基因工程菌 mb6 和 mb7 的构建 | 第29-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| ·石油微生物基因工程菌 Tmb7(hub5PN)的获得 | 第35-36页 |
| 第三章 基因工程菌的耐受实验 | 第36-44页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-43页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·仪器试剂和设备 | 第37页 |
| ·基因工程菌的成活率试验 | 第37-43页 |
| ·结论 | 第43-44页 |
| ·Hsp 基因能够提高基因工程菌的耐酸性 | 第43页 |
| ·Hsp 基因能够提高对高盐的耐受性 | 第43页 |
| ·Hsp 基因能够提高基因工程菌的高温耐受性 | 第43-44页 |
| 第四章 启动子的筛选 | 第44-50页 |
| ·引言 | 第44页 |
| ·石油微生物 hub5PN 染色体的提取 | 第44页 |
| ·hub5PN 染色体的不完全酶切 | 第44-45页 |
| ·质粒 pK75 的构建 | 第45-47页 |
| ·质粒 pK76 的构建 | 第47-48页 |
| ·K75 和 K76 的荧光强度的测定 | 第48-49页 |
| ·K75 和 K76 对氯霉素的耐受性试验 | 第49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第五章 研究总结 | 第50-51页 |
| ·研究结论 | 第50页 |
| ·研究创新点 | 第50页 |
| ·研究展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 硕士研究生期间参加的研究项目 | 第54-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |