| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第一章 前言 | 第17-29页 |
| 1.飞蝗的危害及防治现状 | 第17-18页 |
| 2. 昆虫表皮代谢研究进展 | 第18-22页 |
| 3. miRNA的研究进展 | 第22-27页 |
| 3.1 miRNA的生物合成 | 第23-25页 |
| 3.2 miRNA的作用机制及生物学功能 | 第25-26页 |
| 3.3 miRNA在飞蝗中的研究现状 | 第26-27页 |
| 4．本文研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 飞蝗miRNA的鉴定 | 第29-49页 |
| 1. 引言 | 第29页 |
| 2. 材料和方法 | 第29-40页 |
| 2.1 飞蝗饲养 | 第29-30页 |
| 2.2 小RNA的分离和深度测序 | 第30页 |
| 2.3 飞蝗miRNA的鉴定 | 第30页 |
| 2.4 检测miRNA的真实性 | 第30-33页 |
| 2.5 mRNA荧光定量PCR检测 | 第33-35页 |
| 2.6 LmDrosha基因沉默后miRNA的表达情况 | 第35-38页 |
| 2.7 RNA免疫共沉淀（RIP） | 第38-39页 |
| 2.8 miRNA的Northern blot分析 | 第39-40页 |
| 3. 实验结果 | 第40-47页 |
| 3.1 飞蝗小RNA转录组概述 | 第40-41页 |
| 3.2 飞蝗miRNA的鉴定 | 第41-42页 |
| 3.3 miRNA在基因组上的分布情况分析 | 第42-43页 |
| 3.4 飞蝗Drosha基因干扰后对miRNA形成的影响 | 第43-46页 |
| 3.5 Northern blot检测飞蝗miRNA的真实性 | 第46页 |
| 3.6 飞蝗特异性miRNA与进化上保守miRNA在飞蝗中表达的差异 | 第46-47页 |
| 4.讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 Dicer1在飞蝗miRNA合成中的作用 | 第49-61页 |
| 1. 引言 | 第49页 |
| 2. 材料与方法 | 第49-54页 |
| 2.1 飞蝗饲养 | 第49页 |
| 2.2 飞蝗Dicer1基因全长序列的克隆 | 第49-51页 |
| 2.3 LmDicer1结构功能域及进化分析 | 第51页 |
| 2.4 LmDicer1基因的干扰 | 第51-53页 |
| 2.5 RNAi效果检测及表型观察 | 第53页 |
| 2.6 LmDicer1沉默后miRNA的表达量分析 | 第53-54页 |
| 3. 实验结果 | 第54-59页 |
| 3.1 LmDicer1结构与及其系统发育分析 | 第54-55页 |
| 3.2 LmDicer1沉默效率分析 | 第55-56页 |
| 3.3 LmDicer1沉默后miRNA表达量分析 | 第56-57页 |
| 3.4 LmDicer1功能分析 | 第57-59页 |
| 4. 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 Argonaute1在飞蝗miRNA合成中的作用 | 第61-71页 |
| 1. 引言 | 第61页 |
| 2. 材料和方法 | 第61-64页 |
| 2.1 飞蝗饲养 | 第61页 |
| 2.2 飞蝗AGO1（LmAGO1）结构功能域分析 | 第61-62页 |
| 2.3 LmAGO1基因的干扰 | 第62-63页 |
| 2.4 RNAi效果检测及表型观察 | 第63-64页 |
| 2.5 LmAGO1沉默后miRNA的表达量分析 | 第64页 |
| 3. 实验结果 | 第64-69页 |
| 3.1 LmAGO1结构域及其系统发育分析 | 第64-67页 |
| 3.2 LmAGO1基因功能分析 | 第67-69页 |
| 3.3 LmAGO1基因干扰后miRNA的表达情况分析 | 第69页 |
| 4. 讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 飞蝗miRNA对几丁质代谢基因的调控 | 第71-87页 |
| 1. 引言 | 第71页 |
| 2. 材料与方法 | 第71-77页 |
| 2.1 预测LmCHS1和LmCHT10的miRNAs | 第71页 |
| 2.2 miRNA过表达或者抑制表达操作 | 第71-72页 |
| 2.3 LmCHS1和LmCHT10基因在飞蝗表皮中的定量分析 | 第72-74页 |
| 2.4 体外双荧光素酶活性实验 | 第74-77页 |
| 2.5 RNA免疫共沉淀（RIP）实验 | 第77页 |
| 2.6 几丁质含量测定 | 第77页 |
| 3. 实验结果 | 第77-85页 |
| 3.1 靶向调控LmCHS1和LmCHT10的潜在miRNA预测 | 第77-78页 |
| 3.2 miRNAs及其靶标LmCHS1和LmCHT10在飞蝗2龄不同天数的表达情况 | 第78-79页 |
| 3.3 体外荧光素酶实验验证LmCHS1/LmCHT10基因与miR-71/miR-263 的相互作用 | 第79-80页 |
| 3.4 体内RIP验证LmCHS1/LmCHT10和miR-71/miR-263 之间的相互作用 | 第80-81页 |
| 3.5 体内过表达或沉默miR-71/mi R-263 后miRNA的检测 | 第81-82页 |
| 3.6 体内过表达或沉默miR-71/mi R-263 后靶标基因LmCHS1和LmCHT10的变化 | 第82-83页 |
| 3.7 体内过表达或沉默miR-71/mi R-263 后几丁质含量的变化 | 第83页 |
| 3.8 体内过表达或沉默miR-71/mi R-263 后对飞蝗蜕皮发育的影响 | 第83-85页 |
| 4. 讨论 | 第85-87页 |
| 第六章 飞蝗miRNA对表皮代谢基因的调控 | 第87-95页 |
| 1. 引言 | 第87页 |
| 2. 材料与方法 | 第87-89页 |
| 2.1 飞蝗饲养 | 第87页 |
| 2.2 参与飞蝗表皮代谢相关基因的选择及其miRNA的预测 | 第87-88页 |
| 2.3 飞蝗表皮代谢相关基因及其miRNA在飞蝗不同发育时期的荧光定量PCR检测 | 第88-89页 |
| 2.4 体内RNA免疫共沉淀（RIP）实验 | 第89页 |
| 2.5 体外荧光素酶实验验证表皮代谢基因与其miRNA之间的相互作用 | 第89页 |
| 3. 实验结果 | 第89-93页 |
| 3.1 表皮代谢相关基因的miRNAs的预测 | 第89-90页 |
| 3.2 表皮代谢基因与其miRNAs在飞蝗2龄和3龄不同天数的表达分析 | 第90-91页 |
| 3.3 免疫共沉淀（RIP）验证4个表皮代谢基因与其对应miRNA的结合 | 第91-92页 |
| 3.4 体外荧光素酶实验验证飞蝗表皮代谢基因与其对应miRNA的相互作用 | 第92-93页 |
| 4. 讨论 | 第93-95页 |
| 第七章 全文总结 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-114页 |
| 博士期间发表论文 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 个人简历 | 第116-118页 |
