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转录因子Pax3对胶质纤维酸性蛋白基因的负性转录调控研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一章 绪论第10-12页
   ·课题来源、研究的目的和意义第10页
   ·国内外研究概况第10-11页
     ·国外研究概况第10-11页
     ·国内研究概况第11页
   ·论文的主要研究内容第11-12页
第二章 材料和方法第12-28页
   ·研究资料及仪器设备第12-17页
     ·实验动物第12页
     ·细胞株第12页
     ·试剂第12-15页
     ·实验仪器及耗材第15-16页
     ·寡核苷酸探针及引物第16-17页
   ·实验流程与方法方法第17-28页
     ·预测大鼠GFAP 基因约2kb 启动子区域序列(UCSC)第17页
     ·预测大鼠GFAP 基因启动子上Pax3 的结合位点(genomatix software)第17页
     ·构建大鼠GFAP 启动子报告基因质粒第17-18页
     ·构建大鼠Pax3 真核表达质粒第18页
     ·体外EMSA 检测两者的结合第18-28页
第三章 结果第28-51页
   ·构建大鼠GFAP 启动子报告基因质粒第28-31页
     ·预测大鼠GFAP 基因约2kb 启动子区域序列(UCSC)第28页
     ·预测大鼠GFAP 基因启动子上Pax3 的结合位点(genomatix software)第28-29页
     ·大鼠GFAP 基因启动子报告基因质粒构建第29-31页
   ·大鼠Pax3 真核表达载体构建第31-32页
   ·EMSA 检测Pax3 与GFAP 基因启动子上相应转录结合位点结合第32-34页
   ·Luciferase Assay 检测Pax3 对GFAP 基因的转录的调控效应第34-35页
     ·Luciferase assay 检测RSC96 中Pax3 对GFAP 基因的转录活性起负性调控作用第34-35页
     ·Luciferase assay 检测RSC96 中过表达Pax3 对GFAP 基因的转录活性起负性调控作用第35页
   ·RSC96 中过表达Pax3 对GFAP 基因表达的影响第35-38页
     ·RT-PCR 检测在RSC96 中过表达Pax3 对GFAP 基因表达的影响第35-37页
     ·Western Blot 检测在RSC96 中过表达Pax3 对GFAP 表达的影响第37-38页
   ·血清诱导神经干细胞分化为星型胶质细胞过程中Pax3 与GFAP 的表达第38-41页
     ·免疫荧光细胞化学检测星型胶质细胞分化前后Pax3 与GFAP 的表达第38-40页
     ·RT-PCR 检测神经干细胞分化前后Pax3 与GFAP 的表达第40页
     ·ChIP 进一步验证Pax3 与GFAP 基因启动子区域序列在神经干细胞分化为星型胶质细胞过程中的结合第40-41页
   ·神经干细胞球中过表达Pax3 或干扰Pax3 对其分化的影响第41-45页
   ·神经干细胞球分化后,过表达Pax3 对其分化的影响第45-47页
   ·神经干细胞中过表达Pax3 或干扰Pax3 对其分化的影响第47-49页
   ·LPS 刺激星型胶质细胞活化模型中Pax3 与GFAP 的表达第49-51页
     ·RT-PCR 检测LPS 刺激星型胶质细胞活化模型中Pax3 与GFAP 的表达第49-50页
     ·2 星型胶质细胞中过表达 Pax3 对其活化的影响第50-51页
第四章 讨论第51-56页
第五章 结论第56-57页
参考文献第57-60页
英文缩略词表第60-62页
胶质纤维酸性蛋白在神经系统中转录调控的研究进展第62-75页
 综述参考文献第71-75页
在读期间所获奖励第75页
攻读学位期间参加的学术会议第75-76页
致谢第76页

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