| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-30页 |
| ·细胞凋亡 | 第14-24页 |
| ·细胞凋亡的概念 | 第14页 |
| ·细胞凋亡的特征 | 第14-15页 |
| ·细胞凋亡的检测方法 | 第15-16页 |
| ·细胞凋亡的调节 | 第16-18页 |
| ·细胞凋亡途径 | 第18-22页 |
| ·UV和放线菌素D诱导细胞凋亡 | 第22-23页 |
| ·细胞凋亡的生物学意义 | 第23-24页 |
| ·CASPASE家族的研究进展 | 第24-27页 |
| ·Caspase家族的分类 | 第24页 |
| ·Caspase家族的特征 | 第24-25页 |
| ·Caspase的活化机制 | 第25页 |
| ·Caspase的作用底物 | 第25-26页 |
| ·Caspase的效应机制 | 第26页 |
| ·Caspase家族与细胞凋亡 | 第26页 |
| ·Caspase-9研究进展 | 第26-27页 |
| ·家蚕细胞凋亡研究进展 | 第27-30页 |
| 第二章 引言 | 第30-32页 |
| ·研究背景 | 第30页 |
| ·研究目的和意义 | 第30-31页 |
| ·研究目的 | 第30页 |
| ·研究意义 | 第30-31页 |
| ·研究的主要内容和技术路线 | 第31-32页 |
| ·研究的主要内容 | 第31页 |
| ·研究的技术路线 | 第31-32页 |
| 第三章 家蚕BMCASPASE-9基因的克隆及序列分析 | 第32-50页 |
| ·材料 | 第32-34页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·试剂及配制 | 第32-33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·载体及菌株 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-39页 |
| ·同源性检索 | 第34页 |
| ·家蚕Bmcaspase-9基因的cDNA克隆 | 第34-38页 |
| ·家蚕caspase-9同源基因的结构分析 | 第38-39页 |
| ·各物种中Caspase-9同源体的多序列比对 | 第39页 |
| ·物种间Caspase-9蛋白同源基因系统发生树重构 | 第39页 |
| ·家蚕基因组芯片数据中Bmcaspase-9基因的表达分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-48页 |
| ·同源性检索 | 第39-40页 |
| ·引物 | 第40-41页 |
| ·家蚕Bmcaspase-9基因的cDNA克隆 | 第41-43页 |
| ·家蚕Bmcaspase-9基因的序列分析 | 第43-44页 |
| ·各物种Caspase-9同源蛋白的多序列比对分析 | 第44-46页 |
| ·物种间Caspase-9蛋白同源基因系统发生树重构 | 第46页 |
| ·家蚕基因组芯片数据中Bmcaspase-9基因的表达 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 家蚕BMCASPASE-9基因的原核表达与抗体制备 | 第50-72页 |
| ·材料 | 第50-55页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·试剂配制 | 第50-54页 |
| ·主要仪器 | 第54-55页 |
| ·方法 | 第55-63页 |
| ·目的片段的选择与克隆 | 第55-56页 |
| ·重组质粒的构建 | 第56-57页 |
| ·重组质粒的原核表达 | 第57-59页 |
| ·重组蛋白的可溶性鉴定 | 第59-60页 |
| ·家蚕Bmcaspase-9包涵体的提取 | 第60页 |
| ·家蚕Bmcaspase-9蛋白的纯化及检测 | 第60-62页 |
| ·抗体的制备与纯化 | 第62-63页 |
| ·Western blotting检测原核表达蛋白 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-71页 |
| ·目的片段的克隆 | 第63-64页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第64-66页 |
| ·Bmcaspase-9的原核表达及重组蛋白鉴定 | 第66-67页 |
| ·重组蛋白表达形式的鉴定 | 第67-68页 |
| ·重组蛋白的表达优化 | 第68-69页 |
| ·家蚕Bmaspase-9包涵体的提取与纯化 | 第69-70页 |
| ·Western blotting检测表达蛋白 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| ·原核表达片段的选择 | 第71页 |
| ·抗体检测结果 | 第71-72页 |
| 第五章 BMCASPASE-9在家蚕凋亡细胞中的表达 | 第72-84页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·实验材料 | 第72页 |
| ·培养基及血清 | 第72页 |
| ·试剂及配制 | 第72-73页 |
| ·主要仪器 | 第73页 |
| ·方法 | 第73-76页 |
| ·UV诱导家蚕BmE-SWU1细胞凋亡 | 第73-74页 |
| ·放线菌素D诱导家蚕BmE-SWU1细胞凋亡 | 第74页 |
| ·家蚕BmE-SWU1细胞凋亡检测 | 第74-75页 |
| ·家蚕BmE-SWU1细胞总蛋白提取 | 第75-76页 |
| ·家蚕Bmaspase-9在正常和凋亡细胞中的表达分析 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-81页 |
| ·UV诱导家蚕BmE-SWU1细胞的凋亡 | 第76-77页 |
| ·放线菌素D诱导家蚕BmE-SWU1细胞的凋亡 | 第77-79页 |
| ·家蚕Bmcaspase-9在BmE-SWU1正常细胞和凋亡细胞中的表达分析 | 第79-81页 |
| ·讨论 | 第81-84页 |
| ·家蚕Bmcaspase-9在家蚕BmE-SWU1正常细胞和凋亡细胞中的表达分析 | 第81-82页 |
| ·家蚕Bmcaspase-9基因的进一步研究思考 | 第82-84页 |
| 第六章 小结 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-90页 |
| 论文发表 | 第90-92页 |
| 附录 | 第92-98页 |
| 一:BMCASPASE-9L基因序列 | 第92-93页 |
| 二:BMCASPASE-9S基因序列 | 第93-94页 |
| 三:缩略词表 | 第94-95页 |
| 四:氨基酸缩写一览表 | 第95-96页 |
| 五:PMD18-TSIMPLE载体图谱 | 第96-97页 |
| 六:PET-28A-C(+)载体图谱 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
