| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| ·细胞凋亡概述 | 第14-16页 |
| ·细胞凋亡概念 | 第14页 |
| ·细胞凋亡的特征 | 第14-15页 |
| ·细胞凋亡的生物学意义 | 第15-16页 |
| ·细胞凋亡的途径 | 第16-18页 |
| ·线粒体信号通路 | 第16-17页 |
| ·死亡受体信号通路 | 第17页 |
| ·内质网信号通路 | 第17-18页 |
| ·细胞凋亡的机制 | 第18-20页 |
| ·线虫的细胞凋亡机制 | 第18页 |
| ·果蝇的细胞凋亡机制 | 第18页 |
| ·哺乳动物的细胞凋亡机制 | 第18-20页 |
| ·Bcl-2(B-cell lymphoma/leukemia-2)家族 | 第20-23页 |
| ·Bcl-2蛋白家族成员的分类 | 第20-22页 |
| ·Bcl-2蛋白家族的作用模式 | 第22-23页 |
| ·细胞凋亡常用检测方法 | 第23-25页 |
| ·形态学观察 | 第23-24页 |
| ·DNA Ladder分析 | 第24页 |
| ·酶活性鉴定 | 第24页 |
| ·TUNEL分析 | 第24页 |
| ·mRNA水平的检测 | 第24页 |
| ·流式细胞仪分析 | 第24-25页 |
| ·家蚕细胞凋亡研究现状与前景 | 第25-28页 |
| 第二章 引言 | 第28-30页 |
| ·研究背景及意义 | 第28页 |
| ·主要内容和技术路线 | 第28-30页 |
| ·主要内容 | 第28页 |
| ·技术路线 | 第28-30页 |
| 第三章 家蚕Bmbuffy基因的克隆及序列分析 | 第30-46页 |
| ·材料和试剂 | 第30-32页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·数据库和基因组序列 | 第30页 |
| ·分析的工具软件 | 第30页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第30-32页 |
| ·方法 | 第32-39页 |
| ·同源性搜索与EST拼接 | 第32-33页 |
| ·Bmbuffy基因全长的克隆 | 第33-38页 |
| ·Bmbuffy基因的序列分析 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·家蚕Bmbuffy基因的同源性检索、EST拼接与引物设计 | 第39-40页 |
| ·家蚕胚胎细胞BmE-SWU1的RNA制备 | 第40页 |
| ·cDNA检测 | 第40页 |
| ·家蚕Bmbuffy基因cDNA末端扩增 | 第40-41页 |
| ·家蚕BmBuffy基因的序列分析 | 第41-43页 |
| ·家蚕BmBuffy基因系统进化分析 | 第43-44页 |
| ·小结与讨论 | 第44-46页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第四章 家蚕Bmbuffy基因的原核表达 | 第46-62页 |
| ·材料 | 第46-48页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·试剂配制 | 第46-48页 |
| ·设备 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-56页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第48-52页 |
| ·宿主菌的诱导 | 第52-53页 |
| ·目的蛋白的鉴定 | 第53-55页 |
| ·蛋白表达形式的鉴定 | 第55-56页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-61页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第56-59页 |
| ·Bmbuffy/pET-28a-c(+)/BL21的诱导表达 | 第59-60页 |
| ·目的蛋白的鉴定 | 第60页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第五章 Bmbuffy抗体制备及功能初探 | 第62-80页 |
| ·材料 | 第62-66页 |
| ·试剂 | 第62页 |
| ·主要仪器 | 第62-63页 |
| ·试剂配制 | 第63-66页 |
| ·方法 | 第66-71页 |
| ·Bmbuffy蛋白包涵体的提取 | 第66页 |
| ·Bmbuffy蛋白的纯化 | 第66-68页 |
| ·抗体的制备及纯化 | 第68-69页 |
| ·Western blotting检测表达蛋白 | 第69-70页 |
| ·家蚕BmE-SWU1细胞的凋亡诱导 | 第70页 |
| ·Hoechst 33258核染色 | 第70页 |
| ·家蚕BmE-SWU1细胞总蛋白的提取 | 第70页 |
| ·家蚕BmE-SWU1细胞蛋白浓度的测定 | 第70-71页 |
| ·家蚕Bmbuffy基因、BmDredd基因和BmGsk3基因表达谱 | 第71页 |
| ·家蚕BmE-SWU1凋亡细胞中Bmbuffy蛋白的检测 | 第71页 |
| ·结果与分析 | 第71-77页 |
| ·包涵体的提取与纯化 | 第71-72页 |
| ·抗体的制备及纯化 | 第72页 |
| ·Western blotting检测表达蛋白 | 第72-73页 |
| ·家蚕BmE-SWU1细胞的凋亡诱导 | 第73-75页 |
| ·家蚕BmE-SWU1细胞蛋白浓度的测定 | 第75页 |
| ·Bmbuffy基因功能的初探 | 第75-77页 |
| ·小结与讨论 | 第77-80页 |
| ·小结 | 第77页 |
| ·讨论 | 第77-80页 |
| 第六章 小结 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 附录 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
