摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
前言 | 第8-20页 |
1 Notch信号通路 | 第8-11页 |
2 Notch信号与Th17细胞的分化 | 第11-14页 |
3 Hes-1在Jagged-1信号通路中的作用 | 第14-17页 |
4 Hes-1-siRNA的应用 | 第17-19页 |
5 研究思路和目的 | 第19-20页 |
材料与方法 | 第20-31页 |
1 动物 | 第20页 |
2 主要试剂 | 第20页 |
3 主要仪器 | 第20-21页 |
4 主要溶液的配制 | 第21-24页 |
·磷酸盐缓冲液(PBS)溶液成份 | 第21页 |
·细胞培养液 | 第21-22页 |
·十二烷基硫酸钠SDS溶液 | 第22页 |
·分离胶缓冲液 | 第22页 |
·浓缩胶缓冲 | 第22页 |
·封闭液(10X TBS) | 第22-23页 |
·电泳缓冲液 | 第23页 |
·转移缓冲液 | 第23页 |
·TBS缓冲液(tris bufferd saline,TBS) | 第23页 |
·鞘液(FCM) | 第23-24页 |
5 淋巴细胞的制备 | 第24页 |
6 RNA的提取及RT-PCR | 第24-26页 |
·Trizol法提取总RNA | 第24页 |
·RNA样品完整性及定量 | 第24-25页 |
·RT-PCR | 第25-26页 |
7 Western Blot | 第26-28页 |
·siRNA脂质体的制备 | 第26页 |
·蛋白样品制备 | 第26-27页 |
·蛋白定量 | 第27页 |
·电泳 | 第27页 |
·转膜 | 第27-28页 |
·封闭及抗体杂交显色 | 第28页 |
8 Elisa检测外周T淋巴细胞IL-17细胞因子表达 | 第28-29页 |
9 流式细胞术检测外周T淋巴细胞胞内IL-17和IFN-γ的水平 | 第29页 |
10 流式细胞术检测CD4~+T淋巴细胞胞内IL-17的水平 | 第29-30页 |
11 统计学处理 | 第30-31页 |
结果 | 第31-45页 |
1 RNA的完整性 | 第31-32页 |
2 不同时间Jagged-1作用对Hes-1 mRNA表达的影响 | 第32-33页 |
3 不同时间Jagged-1作用对Deltex-1 mRNA表达的影响 | 第33-36页 |
4 不同时间Hes-1 siRNA作用对Hes-1蛋白表达的影响 | 第36-38页 |
5 不同浓度Hes-1 siRNA作用对Hes-1蛋白表达的影响 | 第38-39页 |
6 靶向Hes-1 siRNA作用对IL-17分泌的影响 | 第39-41页 |
7 靶向Hes-1 siRNA干扰对外周T淋巴细胞胞内IL-17和IFN-γ表达的影响 | 第41-43页 |
8 靶向Hes-1 siRNA干扰对CD4~+T淋巴细胞胞内IL-17表达的影响 | 第43-45页 |
讨论 | 第45-49页 |
小结 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
发表论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
英文缩略词表 | 第58页 |