| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| ·小鼠胚胎干（ES）细胞 | 第10-11页 |
| ·胚胎干细胞自我更新的分子机制 | 第11-12页 |
| ·转录因子Oct4 | 第11页 |
| ·转录因子Nanog | 第11页 |
| ·LIF 信号通路 | 第11-12页 |
| ·Wnt 信号通路 | 第12页 |
| ·P13K 信号通路 | 第12页 |
| ·影响小鼠ES 细胞衍生的因素 | 第12-13页 |
| ·Rho/ROCK | 第13-15页 |
| ·Rho | 第13页 |
| ·Rho 下游效应器ROCK | 第13-14页 |
| ·ROCK 抑制剂 | 第14-15页 |
| ·通过ES 细胞生产转基因小鼠 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第16-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-24页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要设备 | 第17-18页 |
| ·主要溶液配制方法 | 第18-20页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞培养基 | 第18页 |
| ·小鼠ES 细胞培养基 | 第18页 |
| ·培养基配制 | 第18-20页 |
| ·固定液的配制 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·实验动物维持 | 第20页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）及饲养层的制备 | 第20-21页 |
| ·小鼠ES 细胞的维持 | 第21页 |
| ·Y-27632 对小鼠ES 细胞相关生物学特性的影响 | 第21-22页 |
| ·Y-27632 在嵌合体小鼠生产中的应用 | 第22页 |
| ·应用accutase 结合Y-27632 对小鼠ES 细胞的分离方法进行改进 | 第22-23页 |
| ·统计方法 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-30页 |
| ·小鼠ES 细胞生长状态 | 第24页 |
| ·Y-27632 引起小鼠ES 细胞形态发生改变 | 第24-25页 |
| ·传代过程中Y-27632 的使用促进ES 细胞集落形成 | 第25页 |
| ·Y-27632 对小鼠ES 细胞多能性的影响 | 第25-27页 |
| ·Y-27632 在嵌合体小鼠生产中的应用 | 第27-29页 |
| ·Accutase 结合Y-27632 的使用提高小鼠ES 细胞分离效率 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-33页 |
| ·Y-27632 在小鼠ES 细胞传代过程中对细胞存活力的影响 | 第30页 |
| ·紧密的细胞连接不是维持ES 细胞多能性的必要条件 | 第30-31页 |
| ·通过提高离散后ICM 细胞存活力进而获得高效ES 细胞衍生 | 第31-32页 |
| ·pizeo 辅助显微操作在嵌合体小鼠生产中的应用及操作注意事项 | 第32-33页 |
| 5 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-42页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第42-43页 |
| 作者简历 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
