| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-20页 |
| 1 绪论 | 第20-54页 |
| ·类风湿性关节炎 | 第20-31页 |
| ·RA 的临床症状及病理改变 | 第20-21页 |
| ·RA 的病因 | 第21-22页 |
| ·RA 的发病机制研究 | 第22-30页 |
| ·RA 的治疗 | 第30-31页 |
| ·关节炎动物模型 | 第31-38页 |
| ·概述 | 第31-32页 |
| ·主要的关节炎动物模型 | 第32-38页 |
| ·Toll 样受体 | 第38-46页 |
| ·TLRs 的结构 | 第38-39页 |
| ·TLRs 的表达分布 | 第39-40页 |
| ·TLRs 识别的配体 | 第40-42页 |
| ·TLRs 的信号通路 | 第42-44页 |
| ·TLRs 的生物学功能 | 第44-46页 |
| ·TLRs 与RA | 第46-52页 |
| ·TLR2 与关节炎 | 第46-48页 |
| ·TLR3 与关节炎 | 第48页 |
| ·TLR4 与关节炎 | 第48-50页 |
| ·TLR7/8 与关节炎 | 第50页 |
| ·TLR9 与关节炎 | 第50-51页 |
| ·其它TLR 与关节炎 | 第51页 |
| ·各种TLR 在RA 中的相互关系 | 第51-52页 |
| ·TLR 通路中的接头分子与RA 的关系 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 2 PIA 大鼠模型免疫器官中关键TLRs 的筛选 | 第54-69页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·实验动物 | 第54页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第54-57页 |
| ·试剂 | 第54-55页 |
| ·溶液配制 | 第55-57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·实验方法与模型构建 | 第57-62页 |
| ·动物模型构建及评估 | 第57-58页 |
| ·血清学检测 | 第58-59页 |
| ·大鼠脾脏和腘窝淋巴结组织的总RNA 提取 | 第59-60页 |
| ·合成cDNA 第一链（逆转录） | 第60-61页 |
| ·Real-time PCR | 第61页 |
| ·统计分析方法 | 第61-62页 |
| ·实验结果 | 第62-66页 |
| ·动物模型评估 | 第62-63页 |
| ·动物模型脾脏和腘窝淋巴结总RNA 提取结果 | 第63-64页 |
| ·模型大鼠脾脏中TLR1-9 mRNA 表达 | 第64-65页 |
| ·模型大鼠脾脏中TLR 相关细胞因子的mRNA 表达 | 第65页 |
| ·PIA 模型大鼠腘窝淋巴结TLR1-9 mRNA 表达 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| ·动物模型构建 | 第66页 |
| ·关键TLRs 筛选 | 第66-69页 |
| 3 关键TLRs 的验证 | 第69-79页 |
| ·引言 | 第69页 |
| ·实验动物 | 第69页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第69-70页 |
| ·试剂 | 第69-70页 |
| ·溶液配制 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70页 |
| ·实验方法与模型构建 | 第70-72页 |
| ·大鼠剑突软骨胶原提取 | 第70-71页 |
| ·动物模型构建及评估 | 第71页 |
| ·血清学检测 | 第71页 |
| ·脾脏总RNA 提取、逆转录及real-time PCR | 第71页 |
| ·统计分析方法 | 第71-72页 |
| ·实验结果 | 第72-76页 |
| ·E3 大鼠注射pristane 后不同时间点脾脏中TLR1-9 和相关细胞因子的表达 | 第72页 |
| ·PIA 和CIA 大鼠脾脏中TLR1-9 mRNA 表达 | 第72-73页 |
| ·phytol 处理的动物模型（DA 大鼠）的临床表现及TLR1-9 的mRNA 表达 | 第73-75页 |
| ·DA.1U 大鼠注射pristane 后不同时间点脾脏中TLR3 的mRNA 表达 | 第75-76页 |
| ·DA 大鼠PIA 模型MTX 预防后脾脏TLR3 的mRNA 表达 | 第76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| 4 关键TLRs 的细胞定位 | 第79-89页 |
| ·引言 | 第79页 |
| ·实验动物 | 第79页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第79-80页 |
| ·试剂 | 第79-80页 |
| ·溶液配制 | 第80页 |
| ·主要仪器 | 第80页 |
| ·实验方法 | 第80-81页 |
| ·实验动物分组及处理 | 第80页 |
| ·脾脏单细胞悬液制备及流式细胞检测术 | 第80-81页 |
| ·统计分析方法 | 第81页 |
| ·实验结果 | 第81-87页 |
| ·PIA 大鼠脾脏细胞的TLR2、TLR3 和TLR4 的表达 | 第81-83页 |
| ·PIA 大鼠不同时间点各种细胞比例变化 | 第83-84页 |
| ·PIA 大鼠不同时间点巨噬细胞的TLR2、3、4 的表达 | 第84-85页 |
| ·PIA 大鼠不同时间点DC 的TLR2、3、4 的表达 | 第85-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| 5 TLRs 配体在体刺激实验 | 第89-95页 |
| ·引言 | 第89页 |
| ·实验动物 | 第89页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第89-90页 |
| ·试剂 | 第89页 |
| ·溶液配制 | 第89-90页 |
| ·主要仪器 | 第90页 |
| ·实验方法 | 第90页 |
| ·实验动物分组及处理 | 第90页 |
| ·血清学检测 | 第90页 |
| ·病理学检测 | 第90页 |
| ·统计分析方法 | 第90页 |
| ·实验结果 | 第90-93页 |
| ·各实验组临床症状 | 第90-91页 |
| ·病理学检测 | 第91-92页 |
| ·血清学指标 | 第92-93页 |
| ·讨论 | 第93-95页 |
| 6 TLR3 的系统RNAi 实验 | 第95-104页 |
| ·引言 | 第95页 |
| ·实验动物 | 第95页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第95-96页 |
| ·试剂 | 第95-96页 |
| ·TLR3 干扰质粒 | 第96页 |
| ·溶液配制 | 第96页 |
| ·主要仪器 | 第96-97页 |
| ·实验方法 | 第97-100页 |
| ·感受态制备 | 第97页 |
| ·转化 | 第97-98页 |
| ·无内毒素质粒提取（中提） | 第98页 |
| ·干扰质粒效率验证及筛选 | 第98-99页 |
| ·实验动物分组及处理 | 第99-100页 |
| ·统计分析方法 | 第100页 |
| ·实验结果 | 第100-102页 |
| ·干扰质粒筛选及在体干扰实验 | 第100-101页 |
| ·各实验组临床表现 | 第101-102页 |
| ·讨论 | 第102-104页 |
| 7 巨噬细胞模型实验 | 第104-112页 |
| ·引言 | 第104页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第104-105页 |
| ·试剂 | 第104页 |
| ·溶液配制 | 第104-105页 |
| ·主要仪器 | 第105页 |
| ·实验方法 | 第105-106页 |
| ·实验分组及处理 | 第105页 |
| ·RNA 提取、反转录及real-time PCR | 第105页 |
| ·TLR3 干预实验 | 第105-106页 |
| ·统计分析方法 | 第106页 |
| ·实验结果 | 第106-110页 |
| ·pristane 刺激NR8383 后TLRs 的表达 | 第106-109页 |
| ·TLR3 的干预阻断了下游细胞因子的分泌 | 第109-110页 |
| ·讨论 | 第110-112页 |
| 8 TLR3 在PIA 大鼠滑膜组织中的作用研究 | 第112-124页 |
| ·引言 | 第112页 |
| ·实验动物 | 第112页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第112-113页 |
| ·试剂 | 第112-113页 |
| ·溶液配制 | 第113页 |
| ·主要仪器 | 第113页 |
| ·实验方法 | 第113-115页 |
| ·实验动物分组及处理 | 第113页 |
| ·TLR3 及相关细胞因子mRNA 表达检测 | 第113页 |
| ·TLR3 免疫组织化学 | 第113-114页 |
| ·PIA 大鼠脾脏T 细胞与FLS 共孵育实验 | 第114页 |
| ·FLS 迁移能力检测 | 第114-115页 |
| ·FLS 的TLR3 RNAi 实验 | 第115页 |
| ·统计分析方法 | 第115页 |
| ·实验结果 | 第115-122页 |
| ·PIA 模型大鼠滑膜中TLR1-9 基因mRNA 表达 | 第115页 |
| ·PIA 大鼠踝关节TLR3 的蛋白表达 | 第115页 |
| ·polyI:C 局部刺激实验各组临床表现 | 第115-118页 |
| ·polyI:C 局部刺激实验各组病理学检测 | 第118-120页 |
| ·滑膜组织TLR3 及相关细胞因子mRNA 表达检测 | 第120-121页 |
| ·FLS 与T 细胞的共孵育实验 | 第121-122页 |
| ·讨论 | 第122-124页 |
| 9 结论与展望 | 第124-126页 |
| ·结论 | 第124页 |
| ·展望 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第139-141页 |
