致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
目次 | 第11-13页 |
1 绪论 | 第13-19页 |
·RNA干扰 | 第13-14页 |
·RNA激活 | 第14-15页 |
·RNAa的相关机制 | 第15-16页 |
·RNAa与基因启动子区saRNA靶位序列的关系 | 第15页 |
·RNAa的作用机制是否与RNAi类似 | 第15-16页 |
·RNAa现象中的靶基因是否发生了表观遗传学改变 | 第16页 |
·反义转录产物是saRNA诱导基因激活的媒介 | 第16页 |
·小RNAs调节基因表达在肿瘤治疗中的应用潜力 | 第16-17页 |
·本文的研究内容 | 第17-19页 |
2. 功能性saRNAs的筛选 | 第19-38页 |
·引言 | 第19页 |
·材料和方法 | 第19-26页 |
·细胞系和主要试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器和设备 | 第20页 |
·dsRNAs的设计及合成 | 第20页 |
·细胞培养及转染 | 第20-21页 |
·逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) | 第21-23页 |
·蛋白印迹(Western Blot) | 第23-26页 |
·统计学分析 | 第26页 |
·结果 | 第26-36页 |
·dsRNAs上调p21的表达 | 第26-28页 |
·dsRNAs上调par-4的表达 | 第28-32页 |
·dsRNAs未能上调KAI1的表达 | 第32-34页 |
·dsRNAs未能上调NKX3-1的表达 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
3. 功能性saRNAs的序列特征和相关作用机制的探讨 | 第38-59页 |
·引言 | 第38页 |
·材料和方法 | 第38-45页 |
·细胞系和主要试剂 | 第38-39页 |
·主要仪器和设备 | 第39页 |
·dsRNAs的设计及合成 | 第39页 |
·细胞培养及转染 | 第39-40页 |
·逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) | 第40-42页 |
·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第42-45页 |
·统计学分析 | 第45页 |
·结果 | 第45-56页 |
·saRNAs序列位移对RNAa的影响 | 第45-49页 |
·已发现的功能性saRNAs的序列特征分析 | 第49-51页 |
·表观遗传学修饰与RNAa的关系 | 第51-53页 |
·启动子区转录产物与RNAa的关系 | 第53-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·小结 | 第57-59页 |
4. 功能性saRNAs对膀胱癌治疗作用的研究 | 第59-78页 |
·引言 | 第59-60页 |
·材料和方法 | 第60-66页 |
·细胞系和主要试剂 | 第60页 |
·主要仪器和设备 | 第60-61页 |
·dsRNAs的设计及合成 | 第61页 |
·细胞培养及转染 | 第61页 |
·四唑盐(MTT)比色法 | 第61-62页 |
·流式细胞仪检测细胞周期 | 第62页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第62页 |
·蛋白印迹(Western Blot) | 第62-65页 |
·统计学分析 | 第65-66页 |
·结果 | 第66-76页 |
·dsP21-306上调p21对膀胱癌细胞的治疗作用 | 第66-73页 |
·dsPar4-435上调par-4对膀胱癌细胞的治疗作用 | 第73-76页 |
·讨论 | 第76-77页 |
·小结 | 第77-78页 |
5. 总结和展望 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-86页 |
文献综述 | 第86-113页 |
附录一 | 第113-115页 |
附录二 | 第115-123页 |