摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-17页 |
1.1 乳蛋白的合成机理 | 第12-14页 |
1.1.1 乳蛋白的组成、功能及其营养价值 | 第12页 |
1.1.2 乳蛋白的生物合成 | 第12-13页 |
1.1.3 乳蛋白合成的调控 | 第13页 |
1.1.4 氨基酸对乳蛋白合成的调控 | 第13-14页 |
1.2 L型氨基酸转运载体1的研究进展 | 第14-16页 |
1.2.1 LAT1基因简介 | 第14页 |
1.2.2 LAT1的表达 | 第14-15页 |
1.2.3 LAT1表达的调节 | 第15-16页 |
1.3 研究的目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-30页 |
2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第17-22页 |
2.1.1 实验动物的选取 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.3 所用试剂的配制 | 第18-20页 |
2.1.4 Western blot中抗体使用说明 | 第20-21页 |
2.1.5 主要仪器 | 第21-22页 |
2.2 奶牛乳腺上皮细胞的分离培养 | 第22-23页 |
2.2.1 奶牛乳腺上皮细胞系的建立 | 第22页 |
2.2.2 奶牛乳腺上皮细胞的纯化及传代 | 第22页 |
2.2.3 奶牛乳腺上皮细胞的鉴定 | 第22-23页 |
2.3 甲硫氨酸对奶牛乳腺上皮细胞LAT1/4F2hc表达的影响 | 第23-26页 |
2.3.1 甲硫氨酸对LAT1、4F2hc以及β-酪蛋白mRNA表达的影响 | 第23-25页 |
2.3.2 甲硫氨酸对LAT1、4F2hc以及β-酪蛋白蛋白水平表达的影响 | 第25-26页 |
2.4 MTT检测甲硫氨酸对乳腺上皮细胞活力的影响 | 第26-27页 |
2.5 甲硫氨酸调节LAT1表达的信号通路研究 | 第27-29页 |
2.5.1 Western blot方法检测甲硫氨酸对mTOR信号通路分子及LAT1表达的影响 | 第27页 |
2.5.2 雷帕霉素抑制剂对甲硫氨酸调节LAT1表达的影响 | 第27页 |
2.5.3 RNAi抑制mTOR信号通路研究其对甲硫氨酸调节LAT1表达的影响 | 第27-29页 |
2.6 实验数据的处理分析 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-42页 |
3.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养及鉴定 | 第30-31页 |
3.2 甲硫氨酸对奶牛乳腺上皮细胞LAT1/4F2hc表达的影响 | 第31-34页 |
3.2.1 不同浓度甲硫氨酸对奶牛乳腺上皮细胞中β-酪蛋白mRNA表达的影响 | 第31-32页 |
3.2.2 Western blot检测不同浓度甲硫氨酸对奶牛乳腺上皮细胞中β-酪蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
3.2.3 不同浓度甲硫氨酸对奶牛乳腺上皮细胞中LAT1/4F2hc mRNA表达的影响 | 第33页 |
3.2.4 Western blot检测不同浓度甲硫氨酸对奶牛乳腺上皮细胞中LAT1和4F2hc表达的影响 | 第33-34页 |
3.3 MTT检测甲硫氨酸对细胞活力的影响 | 第34-35页 |
3.4 甲硫氨酸调节LAT1表达的信号通路研究 | 第35-42页 |
3.4.1 Western blot方法检测甲硫氨酸对mTOR信号通路分子及LAT1表达的影响 | 第35页 |
3.4.2 雷帕霉素抑制剂对甲硫氨酸调节LAT1表达的影响 | 第35页 |
3.4.3 RNAi抑制mTORC1信号通路研究其对甲硫氨酸调节LAT1表达的影响 | 第35-39页 |
3.4.4 RNAi抑制mTORC2信号通路研究其对甲硫氨酸调节LAT1表达的影响 | 第39-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
4.1 甲硫氨酸浓度与LAT1/4F2hc表达之间的关系 | 第42-43页 |
4.2 甲硫氨酸调节LAT1表达的信号通路 | 第43-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
附录 | 第53-54页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |