摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第12-18页 |
1.1 大黄鱼养殖概况 | 第12页 |
1.2 大黄鱼耐寒能力的研究现状 | 第12页 |
1.3 鱼类耐寒机理的研究进展 | 第12-16页 |
1.3.1 脂肪酸组成对低温胁迫的响应 | 第12-13页 |
1.3.2 鱼类脂肪酸代谢相关基因对低温胁迫的响应机制 | 第13-15页 |
1.3.3 GPDH基因在鱼类耐寒机制中的作用 | 第15-16页 |
1.3.4 CSD结构域蛋白在适应低温中的机制 | 第16页 |
1.4 血液生理生化指标在低温应激下的变化 | 第16页 |
1.5 本研究的主要内容、意义和技术路线 | 第16-18页 |
1.5.1 主要内容和意义 | 第16-17页 |
1.5.2 技术路线 | 第17-18页 |
第2章 饥饿胁迫后大黄鱼生理生化指标对低温胁迫的响应 | 第18-30页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 实验材料 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-20页 |
2.2.1 饥饿和低温胁迫实验 | 第19页 |
2.2.2 取样及样品的制备 | 第19页 |
2.2.3 大黄鱼血液生化指标的测定 | 第19页 |
2.2.4 大黄鱼肌肉脂肪酸含量的测定 | 第19-20页 |
2.3 实验结果 | 第20-28页 |
2.3.1 饥饿与低温胁迫处理后大黄鱼的行为反应和成活率比较 | 第20-21页 |
2.3.2 大黄鱼血液生理生化指标的变化 | 第21-25页 |
2.3.3 大黄鱼肌肉脂肪酸成分的变化 | 第25-28页 |
2.4 讨论 | 第28-30页 |
2.4.1 饥饿和低温胁迫对大黄鱼血液生理指标的影响 | 第28页 |
2.4.2 饥饿和低温胁迫对大黄鱼血脂含量的影响 | 第28-29页 |
2.4.3 饥饿和低温胁迫对大黄鱼肌肉脂肪酸成分的影响 | 第29-30页 |
第3章 大黄鱼SCD基因的克隆与表达分析 | 第30-56页 |
3.1 材料 | 第30-34页 |
3.1.1 实验材料 | 第30页 |
3.1.2 主要试剂 | 第30页 |
3.1.3 常用溶液与培养基 | 第30-33页 |
3.1.4 引物 | 第33页 |
3.1.5 主要实验仪器 | 第33-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-40页 |
3.2.1 饥饿胁迫及低温刺激实验 | 第34页 |
3.2.2 取样及样品保存 | 第34页 |
3.2.3 SCD基因cDNA全长的克隆 | 第34-37页 |
3.2.4 SCD基因组全长的扩增 | 第37页 |
3.2.5 SCD基因的组织表达变化分析 | 第37-38页 |
3.2.6 Westernblot | 第38-39页 |
3.2.7 免疫电镜 | 第39-40页 |
3.3 实验结果 | 第40-54页 |
3.3.1 SCD基因cDNA全长克隆 | 第40-45页 |
3.3.2 大黄鱼SCD基因的基因组全长的克隆 | 第45-46页 |
3.3.3 荧光定量结果分析 | 第46-50页 |
3.3.4 westernblot实验结果 | 第50-53页 |
3.3.5 免疫电镜观察结果 | 第53-54页 |
3.4 讨论 | 第54-56页 |
3.4.1 大黄鱼SCD基因的结构特征 | 第54页 |
3.4.2 SCD基因组织表达特征和饥饿与低温胁迫对SCD基因表达的影响 | 第54-55页 |
3.4.3 大黄鱼SCD蛋白的亚细胞定位 | 第55-56页 |
第4章 大黄鱼3种GPDH基因的克隆与表达分析 | 第56-79页 |
4.1 材料 | 第56-58页 |
4.1.1 实验材料 | 第56页 |
4.1.2 主要试剂 | 第56页 |
4.1.3 常用溶液与培养基 | 第56页 |
4.1.4 引物 | 第56-57页 |
4.1.5 主要实验仪器 | 第57-58页 |
4.2 实验方法 | 第58-60页 |
4.2.1 饥饿和低温胁迫实验 | 第58页 |
4.2.2 取样和样品保存 | 第58页 |
4.2.3 大黄鱼3种GPDH基因cDNA全长的克隆 | 第58-59页 |
4.2.4 大黄鱼3种GPDH基因组全长的获得 | 第59页 |
4.2.5 大黄鱼3种GPDH基因的组织表达变化分析 | 第59-60页 |
4.3 实验结果 | 第60-78页 |
4.3.1 大黄鱼3种GPDH基因全长cDNA的克隆 | 第60-65页 |
4.3.2 大黄鱼3种GPDH的蛋白结构 | 第65-67页 |
4.3.3 大黄鱼3种GPDH的系统进化分析 | 第67-69页 |
4.3.4 大黄鱼3种GPDH基因的基因组序列结构 | 第69页 |
4.3.5 大黄鱼3种GPDH基因的组织表达情况 | 第69-73页 |
4.3.6 饥饿和低温胁迫后大黄鱼3种GPDH基因的表达变化 | 第73-78页 |
4.4 讨论 | 第78-79页 |
第5章 大黄鱼CSDE1基因的克隆与表达分析 | 第79-94页 |
5.1 材料 | 第79-80页 |
5.1.1 实验材料 | 第79页 |
5.1.2 主要试剂 | 第79页 |
5.1.3 常用溶液与培养基 | 第79页 |
5.1.4 引物 | 第79-80页 |
5.1.5 主要实验仪器 | 第80页 |
5.2 实验方法 | 第80-82页 |
5.2.1 饥饿和低温胁迫实验 | 第80页 |
5.2.2 取样和样品保存 | 第80页 |
5.2.3 大黄鱼CSDE1基因cDNA全长的克隆 | 第80-81页 |
5.2.4 大黄鱼CSDE1基因组全长的获得 | 第81页 |
5.2.5 大黄鱼CSDE1基因的组织表达变化分析 | 第81-82页 |
5.2.6 Westernblot | 第82页 |
5.3 实验结果 | 第82-93页 |
5.3.1 大黄鱼CSDE1基因ORF的克隆 | 第82-84页 |
5.3.2 大黄鱼CSDE1的蛋白结构 | 第84页 |
5.3.3 大黄鱼CSDE1基因的系统进化分析 | 第84-85页 |
5.3.4 大黄鱼CSDE1基因的基因组结构 | 第85页 |
5.3.5 大黄鱼CSDE1基因的组织表达谱 | 第85-86页 |
5.3.6 饥饿和低温胁迫后大黄鱼CSDE1基因的表达变化 | 第86-89页 |
5.3.7 饥饿和低温胁迫对大黄鱼CSDE1蛋白表达的影响 | 第89-93页 |
5.4 讨论 | 第93-94页 |
第6章 研究结论、创新及展望 | 第94-96页 |
6.1 研究结论 | 第94-95页 |
6.2 创新点 | 第95页 |
6.3 展望 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-103页 |
在学期间发表的学术论文 | 第103页 |