北极深海沉积物宏基因组文库构建及一种新的几丁质脱乙酰酶基因鉴定
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 宏基因组技术 | 第11-15页 |
| ·未培养微生物 | 第11页 |
| ·宏基因组及宏基因组学的定义 | 第11-12页 |
| ·宏基因组学的研究过程 | 第12-15页 |
| 2 宏基因组学在研究深海沉积物微生物资源上的应用 | 第15-17页 |
| 3 几丁质脱乙酰酶研究进展 | 第17-21页 |
| ·几丁质与壳聚糖 | 第17页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的研究概况 | 第17-21页 |
| 第二章 北极深海沉积物宏基因组文库构建 | 第21-31页 |
| 1 材料与方法 | 第21-24页 |
| ·沉积物样品 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·质粒与载体 | 第22页 |
| ·沉积物总DNA提取 | 第22页 |
| ·沉积物总DNA纯化 | 第22页 |
| ·酶切沉积物总DNA | 第22-23页 |
| ·载体质量DNA的去磷酸化处理 | 第23页 |
| ·一步法感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·连接反应 | 第23页 |
| ·化学法转化 | 第23页 |
| ·文库保存 | 第23页 |
| ·宏基因组文库鉴定 | 第23-24页 |
| ·克隆序列的Gen Bank登录号 | 第24页 |
| 2 结果 | 第24-29页 |
| ·北极深海沉积物总DNA提取及酶切 | 第24-25页 |
| ·北极深海沉积物宏基因组文库构建 | 第25页 |
| ·克隆基因功能的初步分析 | 第25-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 一种新几丁质脱乙酰酶基因鉴定 | 第31-42页 |
| 1 材料与方法 | 第31-34页 |
| ·几丁质脱乙酰酶基因 | 第31-32页 |
| ·几丁质脱乙酰酶基因的序列分析 | 第32页 |
| ·CDAαp-arc基因亚克隆 | 第32页 |
| ·CDAαp-arc基因的表达 | 第32-33页 |
| ·CDAαp-arc基因表达产物的纯化 | 第33页 |
| ·几丁质脱乙酰酶活性测定 | 第33页 |
| ·温度、pH对酶活的影响 | 第33-34页 |
| 2 结果 | 第34-40页 |
| ·CDAαp-arc基因序列生物信息学分析 | 第34-36页 |
| ·CDAαp-arc基因的亚克隆 | 第36-37页 |
| ·CDAαp-arc基因的原核表达 | 第37页 |
| ·CDAαp-arc基因表达产物的纯化 | 第37-38页 |
| ·温度及pH对酶活的影响 | 第38-39页 |
| ·系统发育树分析 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 总结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 在校期间发表的和待发的论文、科研成果等 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
