| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| 1 课题的提出 | 第12-13页 |
| 2 前人研究进展 | 第13-24页 |
| 2.1 柿果脱涩机理研究进展 | 第13-23页 |
| 2.1.1 柿品种分类体系及其特点 | 第14-15页 |
| 2.1.2 柿单宁的形成过程 | 第15-19页 |
| 2.1.2.1 柿单宁的生物合成途径 | 第15-18页 |
| 2.1.2.2 柿单宁单体的形成及其种类 | 第18页 |
| 2.1.2.3 柿单宁单体的跨膜转运 | 第18-19页 |
| 2.1.2.4 柿单宁单体在液泡中的聚合 | 第19页 |
| 2.1.3 非完全甜柿的人工脱涩 | 第19-21页 |
| 2.1.3.1 与乙醛作用直接相关的脱涩过程 | 第19-20页 |
| 2.1.3.2 乙醛作用以外的脱涩过程 | 第20-21页 |
| 2.1.4 完全甜柿的自然脱涩 | 第21-23页 |
| 2.1.4.1 中国甜柿与日本甜柿自然脱涩的特点 | 第21-22页 |
| 2.1.4.2 中国甜柿与日本甜柿自然脱涩的分子机理 | 第22-23页 |
| 2.2 植物ALDH2基因家族研究进展 | 第23-24页 |
| 3 研究目的和内容 | 第24-26页 |
| 3.1 研究目的 | 第24页 |
| 3.2 研究内容 | 第24-26页 |
| 第二章 ALDH2基因的克隆及其功能分析 | 第26-37页 |
| 1 引言 | 第26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.2.1 单宁含量测定 | 第27页 |
| 2.2.2 RNA的提取和cDNA的合成 | 第27页 |
| 2.2.3 qRT-PCR表达分析 | 第27-28页 |
| 2.2.4 DkALDH2a和DkALDH2b基因的克隆和序列分析 | 第28页 |
| 2.2.5 DkALDH2a和DkALDH2b在柿叶片中进行体内瞬时表达 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-35页 |
| 3.1 不同脱涩类型柿果发育过程中单宁含量变化比较 | 第29页 |
| 3.2 DkALDH2a和DkALDH2b的克隆及序列分析 | 第29-31页 |
| 3.3 DkALDH2a和DkALDH2b在不同脱涩类型柿果发育过程中的表达量分析 | 第31-32页 |
| 3.4 DkALDH2a和DkALDH2b在中国甜柿不同组织器官中的表达分析 | 第32-33页 |
| 3.5 DkALDH2a和DkALDH2b在活体柿叶片瞬时表达体系中的功能分析 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 应用酵母单杂交系统筛选DkALDH2互作转录因子 | 第37-50页 |
| 1 引言 | 第37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-44页 |
| 2.1 试验材料 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-44页 |
| 2.2.1 DNA提取 | 第38页 |
| 2.2.2 染色体步移 | 第38-40页 |
| 2.2.3 诱饵载体pALDH2b-AbAi构建 | 第40-41页 |
| 2.2.4 Y1HGold[pALDH2b-AbAi]菌株构建 | 第41-43页 |
| 2.2.5 AbA最低抑制浓度筛选 | 第43页 |
| 2.2.6 酵母文库筛选 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-48页 |
| 3.1 启动子序列分析 | 第44-45页 |
| 3.2 诱饵菌株AbA~r基因本底表达水平检测 | 第45-46页 |
| 3.3 Y1HGold[pALDH2b-AbAi]文库筛选 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 ALDH2及部分单宁代谢相关基因瞬时超表达后的转录组分析 | 第50-63页 |
| 1 引言 | 第50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-52页 |
| 2.1 试验材料 | 第50-51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 2.2.1 超表达载体构建及农杆菌侵染菌液制备 | 第51页 |
| 2.2.2 测序样品的制备 | 第51页 |
| 2.2.3 RNA的提取及检验 | 第51页 |
| 2.2.4 RNA文库构建、质控及测序平台 | 第51-52页 |
| 2.2.5 转录组测序、拼接及注释 | 第52页 |
| 2.2.6 单宁含量测定 | 第52页 |
| 2.2.7 基因表达量计算、差异表达筛选及功能分析 | 第52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-61页 |
| 3.1 ‘鄂柿1号’叶片中单宁含量变化分析 | 第53页 |
| 3.2 组装结果概述 | 第53-56页 |
| 3.3 差异表达基因分析 | 第56-60页 |
| 3.3.1 差异表达基因筛选 | 第56-57页 |
| 3.3.2 三种处理共有差异表达基因功能分析 | 第57-59页 |
| 3.3.2.1 共同上调表达基因分析 | 第57-58页 |
| 3.3.2.2 共同下调表达基因分析 | 第58-59页 |
| 3.3.3 候选共同差异表达基因的表达量分析 | 第59-60页 |
| 3.4 OE-ALDH2b处理的差异表达基因分析 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 全文总结与展望 | 第63-66页 |
| 1 全文总结 | 第63-64页 |
| 2 本研究创新之处 | 第64页 |
| 3 本研究不足之处与进一步研究思路 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-78页 |
| 附录 | 第78-91页 |
| 作者在学期间的科研实践 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
