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柑橘园黄龙病分布及老果园病原菌和伴生菌分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1 前言第10-18页
    1.1 课题的提出第10-11页
    1.2 前人研究进展第11-17页
        1.2.1 柑橘黄龙病发生与传播规律第11-12页
        1.2.2 柑橘黄龙病防控相关研究第12-15页
        1.2.3 柑橘黄龙病菌研究第15-17页
    1.3 研究目的与内容第17-18页
2 材料与方法第18-25页
    2.1 材料采集第18页
        2.1.1 江西赣州安远县6个果园调查材料采集第18页
        2.1.2 福建永春天马柑橘场果园调查材料采集第18页
        2.1.3 福建永春猛虎柑橘场果园调查材料采集第18页
    2.2 巢式PCR法检测柑橘黄龙病菌第18-20页
        2.2.1 植物总DNA提取第18-19页
        2.2.2 Nested PCR检测第19-20页
        2.2.3 琼脂糖凝胶电泳第20页
        2.2.4 数据分析第20页
    2.3 噬菌体检测及基因片段克隆第20-22页
        2.3.1 黄龙病菌原噬菌体检测第20-21页
        2.3.2 DNA片段的回收与纯化第21页
        2.3.3 E.coli TOP10感受态细胞制备(氯化钙制备法)第21-22页
        2.3.4 热击转化TOP10感受态细胞第22页
        2.3.5 单克隆菌落阳性鉴定与测序第22页
    2.4 16S扩增子测序第22-25页
        2.4.1 样品表面消毒第22-23页
        2.4.2 CTAB法提取植物总DNA第23页
        2.4.3 16S扩增子测序分析第23-24页
        2.4.4 16S扩增子测序数据预处理第24页
        2.4.5 16S扩增子测序结果验证第24-25页
3 结果与分析第25-42页
    3.1 柑橘黄龙病菌在感病果园中的分布情况第25-29页
        3.1.1 江西赣州新果园柑橘黄龙病感病情况第25-27页
        3.1.2 果园感病植株感病等级分布情况第27-28页
        3.1.3 柑橘黄龙病菌在植株不同方位上的分布情况第28-29页
        3.1.4 柑橘黄龙病菌在果园不同位置的分布情况第29页
    3.2 黄龙病疫区种植新模式对HLB防控效果的调查第29-31页
        3.2.1 天马柑橘场柑橘黄龙病调查第29-30页
        3.2.2 天马柑橘场感病植株重复验证结果第30-31页
    3.3 感病老果园正常生产植株伴生菌研究第31-37页
        3.3.1 猛虎厂柑橘黄龙病感病情况调查结果第31-32页
        3.3.2 健康植株与感病植株伴生菌情况分析第32-37页
    3.4 柑橘黄龙病菌噬菌体多样性分析第37-42页
        3.4.1 福建、江西样品黄龙病菌分离物中原噬菌体种类检测第37-39页
        3.4.2 不同来源病原菌分离物中SC1噬菌体特异基因序列分析第39-40页
        3.4.3 不同来源病原菌分离物中SC2噬菌体特异基因序列分析第40-42页
4 讨论第42-47页
    4.1 病菌分布情况对柑橘黄龙病调查采样的影响第42-43页
    4.2 天马柑橘场黄龙病综合防控模式的效果分析第43-44页
    4.3 感病老果园维持生产的原因解析第44-47页
5 结论与展望第47-48页
参考文献第48-58页
附录Ⅰ:主要试剂及溶液的配置第58-59页
附录Ⅱ:猛虎柑橘场局部情况图第59-60页
附录Ⅲ:16S扩增子数据质控结果第60-62页
致谢第62页

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