摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第10-18页 |
1.1 课题的提出 | 第10-11页 |
1.2 前人研究进展 | 第11-17页 |
1.2.1 柑橘黄龙病发生与传播规律 | 第11-12页 |
1.2.2 柑橘黄龙病防控相关研究 | 第12-15页 |
1.2.3 柑橘黄龙病菌研究 | 第15-17页 |
1.3 研究目的与内容 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-25页 |
2.1 材料采集 | 第18页 |
2.1.1 江西赣州安远县6个果园调查材料采集 | 第18页 |
2.1.2 福建永春天马柑橘场果园调查材料采集 | 第18页 |
2.1.3 福建永春猛虎柑橘场果园调查材料采集 | 第18页 |
2.2 巢式PCR法检测柑橘黄龙病菌 | 第18-20页 |
2.2.1 植物总DNA提取 | 第18-19页 |
2.2.2 Nested PCR检测 | 第19-20页 |
2.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第20页 |
2.2.4 数据分析 | 第20页 |
2.3 噬菌体检测及基因片段克隆 | 第20-22页 |
2.3.1 黄龙病菌原噬菌体检测 | 第20-21页 |
2.3.2 DNA片段的回收与纯化 | 第21页 |
2.3.3 E.coli TOP10感受态细胞制备(氯化钙制备法) | 第21-22页 |
2.3.4 热击转化TOP10感受态细胞 | 第22页 |
2.3.5 单克隆菌落阳性鉴定与测序 | 第22页 |
2.4 16S扩增子测序 | 第22-25页 |
2.4.1 样品表面消毒 | 第22-23页 |
2.4.2 CTAB法提取植物总DNA | 第23页 |
2.4.3 16S扩增子测序分析 | 第23-24页 |
2.4.4 16S扩增子测序数据预处理 | 第24页 |
2.4.5 16S扩增子测序结果验证 | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-42页 |
3.1 柑橘黄龙病菌在感病果园中的分布情况 | 第25-29页 |
3.1.1 江西赣州新果园柑橘黄龙病感病情况 | 第25-27页 |
3.1.2 果园感病植株感病等级分布情况 | 第27-28页 |
3.1.3 柑橘黄龙病菌在植株不同方位上的分布情况 | 第28-29页 |
3.1.4 柑橘黄龙病菌在果园不同位置的分布情况 | 第29页 |
3.2 黄龙病疫区种植新模式对HLB防控效果的调查 | 第29-31页 |
3.2.1 天马柑橘场柑橘黄龙病调查 | 第29-30页 |
3.2.2 天马柑橘场感病植株重复验证结果 | 第30-31页 |
3.3 感病老果园正常生产植株伴生菌研究 | 第31-37页 |
3.3.1 猛虎厂柑橘黄龙病感病情况调查结果 | 第31-32页 |
3.3.2 健康植株与感病植株伴生菌情况分析 | 第32-37页 |
3.4 柑橘黄龙病菌噬菌体多样性分析 | 第37-42页 |
3.4.1 福建、江西样品黄龙病菌分离物中原噬菌体种类检测 | 第37-39页 |
3.4.2 不同来源病原菌分离物中SC1噬菌体特异基因序列分析 | 第39-40页 |
3.4.3 不同来源病原菌分离物中SC2噬菌体特异基因序列分析 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-47页 |
4.1 病菌分布情况对柑橘黄龙病调查采样的影响 | 第42-43页 |
4.2 天马柑橘场黄龙病综合防控模式的效果分析 | 第43-44页 |
4.3 感病老果园维持生产的原因解析 | 第44-47页 |
5 结论与展望 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-58页 |
附录Ⅰ:主要试剂及溶液的配置 | 第58-59页 |
附录Ⅱ:猛虎柑橘场局部情况图 | 第59-60页 |
附录Ⅲ:16S扩增子数据质控结果 | 第60-62页 |
致谢 | 第62页 |