| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 植物开花途径和花器官形成研究 | 第13-15页 |
| 1.1 植物成花诱导途径 | 第13-15页 |
| 1.2 植物花器官形成的ABCDE模型 | 第15页 |
| 2 植物MADS-box基因家族研究进展 | 第15-16页 |
| 3 microRNA参与植物开花调控的研究进展 | 第16-19页 |
| 3.1 植物miRNA合成及基因沉默 | 第17页 |
| 3.2 植物miRNA与开花时间调控 | 第17-19页 |
| 4 人工microRNA技术应用及其研究进展 | 第19-21页 |
| 4.1 人工miRNA构建 | 第20页 |
| 4.2 人工miRNA在调控植物开花中应用 | 第20-21页 |
| 5 本研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 萝卜MADS-box转录因子基因家族全基因组分析 | 第23-43页 |
| 1 材料与方法 | 第23-28页 |
| 1.1 MADS-box基因鉴定 | 第23-24页 |
| 1.2 蛋白序列特征预测和进化分析 | 第24页 |
| 1.3 基因连锁群定位及同源序列鉴定 | 第24-25页 |
| 1.4 萝卜RNA-seq数据分析 | 第25页 |
| 1.5 植物材料处理 | 第25页 |
| 1.6 总RNA提取及反转录 | 第25-26页 |
| 1.7 萝卜MIKC~C基因RT-qPCR分析 | 第26-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-40页 |
| 2.1 萝卜MADS-box蛋白鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2 RsMADS蛋白系统进化分析 | 第29-31页 |
| 2.3 蛋白序列特征预测及基因结构分析 | 第31-35页 |
| 2.4 RsMADS基因连锁群定位 | 第35页 |
| 2.5 RsMADS基因在不同组织和时期的差异表达 | 第35-36页 |
| 2.6 MIKC~C类基因的表达特性分析 | 第36-40页 |
| 3 讨论 | 第40-43页 |
| 3.1 萝卜MADS-box家族鉴定和分析 | 第40页 |
| 3.2 萝卜抽薹开花时间控制和花器官形成相关RsMADS基因鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3 MADS-box基因介导的开花与花器官形成调控网络 | 第41-43页 |
| 第三章 特异沉默萝卜FLC基因的人工miRNA体系建立 | 第43-63页 |
| 1 材料与方法 | 第43-51页 |
| 1.1 试验材料 | 第43-44页 |
| 1.2 试验方法 | 第44-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-60页 |
| 2.1 拟南芥miR319a前体克隆与序列分析 | 第51页 |
| 2.2 人工miRFLC设计及pMD-pre-amiRFLC载体构建 | 第51-55页 |
| 2.3 表达载体pCAMBIA-pre-amiRFLC的酶切验证 | 第55-56页 |
| 2.4 表达载体pCAMBIA-pre-amiRFLC转化农杆菌鉴定 | 第56页 |
| 2.5 利用瞬时表达验证表达载体pCAMBIA-pre-amiRFLC | 第56-58页 |
| 2.6 转基因拟南芥鉴定 | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 3.1 人工miRNA介导的基因沉默优势 | 第60-61页 |
| 3.2 表达载体构建及验证体系建立 | 第61页 |
| 3.3 萝卜RsFLC基因功能验证 | 第61-63页 |
| 第四章 萝卜抽薹开花相关miR172a克隆与功能验证 | 第63-77页 |
| 1 材料与方法 | 第63-67页 |
| 1.1 试验材料 | 第63页 |
| 1.2 试验方法 | 第63-67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-75页 |
| 2.1 萝卜miR172a前体克隆与序列分析 | 第67-69页 |
| 2.2 萝卜mR172靶基因AP2、TOE1和TOE3的克隆 | 第69-70页 |
| 2.3 中间载体pMD-pre-miR172a的酶切验证 | 第70页 |
| 2.4 表达载体pCAMBIA-pre-miR172a的酶切验证 | 第70-71页 |
| 2.5 表达载体pCAMBIA-pre-miR172a转化农杆菌鉴定 | 第71-72页 |
| 2.6 利用瞬时表达验证表达载体pCAMBIA-pre-miR172a | 第72-73页 |
| 2.7 转基因的拟南芥鉴定 | 第73-75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| 3.1 萝卜miR172a进化分析 | 第76页 |
| 3.2 萝卜miRNA功能验证方法 | 第76页 |
| 3.3 萝卜miR172a生物功能分析 | 第76-77页 |
| 全文结论 | 第77-79页 |
| 创新之处 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
