| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-15页 |
| 1.1 DTC与血清Tg | 第11页 |
| 1.2 甲状腺球蛋白的简介 | 第11-12页 |
| 1.3 尿碘不足与血清Tg | 第12页 |
| 1.4 检测Tg的方法 | 第12-14页 |
| 1.4.1 放射免疫分析法 | 第13页 |
| 1.4.2 免疫放射分析法 | 第13页 |
| 1.4.3 电化学发光免疫分析法 | 第13-14页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-32页 |
| 2.1 材料 | 第15-19页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 常用溶液和培养基配制 | 第17-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-32页 |
| 2.2.1 天然Tg蛋白的动物免疫 | 第19-20页 |
| 2.2.2 单克隆抗体的制备 | 第20-24页 |
| 2.2.3 单克隆抗体的纯化 | 第24-26页 |
| 2.2.4 单克隆抗体的性质分析 | 第26-28页 |
| 2.2.5 双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第28-29页 |
| 2.2.6 双抗体夹心ELISA方法的建立与优化 | 第29-30页 |
| 2.2.7 灵敏度的检测 | 第30页 |
| 2.2.8 临床血清样本的检测 | 第30-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-45页 |
| 3.1 免疫小鼠血清抗体效价 | 第32-33页 |
| 3.2 阳性杂交瘤细胞的筛选、亚克隆 | 第33页 |
| 3.3 小鼠腹水抗体效价 | 第33-34页 |
| 3.4 纯化后的单克隆抗体蛋白浓度 | 第34-36页 |
| 3.5 SDS-PAGE鉴定纯化后的单克隆抗体 | 第36页 |
| 3.6 单克隆抗体的性质鉴定 | 第36-39页 |
| 3.6.1 单克隆抗体的亚型鉴定 | 第36-37页 |
| 3.6.2 单克隆抗体的相对亲和力常数的测定 | 第37-38页 |
| 3.6.3 纯化抗体的效价 | 第38-39页 |
| 3.7 双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第39-40页 |
| 3.7.1 HRP标记单克隆抗体效果 | 第39页 |
| 3.7.2 双抗体夹心法对不同抗体进行配对 | 第39-40页 |
| 3.8 双抗体夹心ELISA方法的优化 | 第40-42页 |
| 3.8.1 捕获抗体包被浓度和检测抗体工作浓度的优化 | 第40-41页 |
| 3.8.2 包被条件的优化 | 第41页 |
| 3.8.3 封闭时间的优化 | 第41-42页 |
| 3.8.4 样品反应时间的优化 | 第42页 |
| 3.8.5 酶标抗体反应时间的优化 | 第42页 |
| 3.9 双抗体夹心ELISA检测方法灵敏度的检测 | 第42-43页 |
| 3.10 双抗体夹心ELISA检测临床血清样本 | 第43-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 测定方法的影响 | 第45页 |
| 4.2 高浓度Tg钩状效应的影响 | 第45-46页 |
| 4.3 TgAb和人鼠抗体的影响 | 第46页 |
| 4.4 关于动物免疫 | 第46-47页 |
| 4.5 关于细胞融合和杂交瘤细胞的筛选 | 第47页 |
| 4.6 关于腹水的制备 | 第47-48页 |
| 4.7 关于单克隆抗体的的纯化 | 第48-49页 |
| 第五章 结论与展望 | 第49-50页 |
| 5.1 结论 | 第49页 |
| 5.2 展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |