中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语 | 第13-14页 |
前言 | 第14-17页 |
研究现状及成果 | 第14-16页 |
研究目的、方法 | 第16-17页 |
一、H/R诱导HUVECs损伤模型的建立 | 第17-24页 |
1.1 实验材料 | 第17-18页 |
1.1.1 细胞 | 第17页 |
1.1.2 实验仪器 | 第17页 |
1.1.3 实验耗材与器材 | 第17-18页 |
1.1.4 药品与试剂 | 第18页 |
1.2 实验方法 | 第18-22页 |
1.2.1 主要溶液的配制 | 第18-20页 |
1.2.2 HUVECs的培养 | 第20页 |
1.2.3 实验分组及H/R损伤模型的建立 | 第20-22页 |
1.2.4 MTT法检测细胞存活率 | 第22页 |
1.2.5 数据处理 | 第22页 |
1.3 结果 | 第22-23页 |
H/R诱导HUVECs损伤模型的建立 | 第22-23页 |
1.4 小结 | 第23-24页 |
二、H/R诱导HUVECs释放MV | 第24-31页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-28页 |
2.2.1 主要溶液的配制 | 第25页 |
2.2.2 HUVECs的培养 | 第25页 |
2.2.3 H/R诱导HUVECs释放MV | 第25-26页 |
2.2.4 H/R-EMV的流式鉴定和计数 | 第26-28页 |
2.2.5 H/R-EMV的蛋白定量(BCA法) | 第28页 |
2.2.6 数据处理 | 第28页 |
2.3 结果 | 第28-30页 |
2.3.1 H/R-EMV的流式鉴定和计数结果 | 第28-29页 |
2.3.2 H/R-EMV的蛋白定量 | 第29-30页 |
2.4 小结 | 第30-31页 |
三、H/R-EMV对H9c2细胞的影响 | 第31-50页 |
3.1 实验材料 | 第31-32页 |
3.1.1 细胞 | 第31页 |
3.1.2 实验仪器 | 第31页 |
3.1.3 实验耗材与器材 | 第31页 |
3.1.4 药品与试剂 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-42页 |
3.2.1 主要溶液的配制 | 第32-34页 |
3.2.2 实验分组及给药方案 | 第34-35页 |
3.2.3 MTT法检测细胞存活率 | 第35页 |
3.2.4 细胞培养液中LDH活性测定 | 第35-36页 |
3.2.5 Hoechst 33258染色 | 第36-37页 |
3.2.6 caspase 3活性检测 | 第37-39页 |
3.2.7 流式检测细胞凋亡 | 第39-40页 |
3.2.8 Western Blot检测 | 第40-42页 |
3.2.9 数据处理 | 第42页 |
3.3 结果 | 第42-48页 |
3.3.1 细胞存活率 | 第42-43页 |
3.3.2 细胞培养液中LDH活性 | 第43-44页 |
3.3.3 Hoechst33258染色 | 第44-45页 |
3.3.4 caspase 3活性检测 | 第45-46页 |
3.3.5 流式检测细胞凋亡 | 第46-47页 |
3.3.6 Bcl-2/Bax蛋白表达变化 | 第47-48页 |
3.4 小结 | 第48-50页 |
讨论 | 第50-58页 |
1 H/R诱导HUVECs损伤模型的选择及建立 | 第50-51页 |
2 H/R诱导HUVECs释放MV | 第51-53页 |
2.1 H/R-EMV的分离提取 | 第51页 |
2.2 H/R-EMV的流式检测及表型鉴定 | 第51-52页 |
2.3 H/R诱导HUVECs产生MV | 第52-53页 |
3 H/R-EMV对H9c2细胞的影响 | 第53-57页 |
3.1 H/R-EMV对H9c2细胞存活的影响 | 第54页 |
3.2 H/R-EMV对H9c2细胞的凋亡作用 | 第54-55页 |
3.3 H/R-EMV对H9c2细胞的凋亡相关蛋白表达的影响 | 第55-57页 |
总结与展望 | 第57-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
综述 内皮微囊泡的生物学作用 | 第68-83页 |
参考文献 | 第76-83页 |
致谢 | 第83页 |