| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 序言 | 第12-16页 |
| 1.1 研究背景 | 第12-15页 |
| 1.1.1 白细胞介素7及其剪接变异体 | 第12-13页 |
| 1.1.2 选择性剪接 | 第13-15页 |
| 1.1.3 纤维化疾病 | 第15页 |
| 1.2 研究思路 | 第15-16页 |
| 第二章 剪接变异体蛋白rhIL-7δ4 的原核表达、纯化以及鉴定 | 第16-38页 |
| 2.1 前言 | 第16页 |
| 2.2 实验材料 | 第16-24页 |
| 2.2.1 菌株 | 第16页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.2.3 合成引物 | 第17页 |
| 2.2.4 主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.2.5 主要溶液配制 | 第18-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-31页 |
| 2.3.1 制备感受态DH5α 及BL21 | 第24页 |
| 2.3.2 rhIL-7δ4 表达载体的构建 | 第24-26页 |
| 2.3.3 rhIL-7δ4 蛋白诱导表达条件的优化、可溶性鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.4 rhIL-7δ4 蛋白变性与复性 | 第27-28页 |
| 2.3.5 rhIL-7δ4 蛋白的纯化 | 第28-30页 |
| 2.3.6 rhIL-7δ4 蛋白Western-blot鉴定 | 第30-31页 |
| 2.4 实验结果 | 第31-36页 |
| 2.4.1 成功构建rhIL-7δ4 原核表达载体 | 第31-33页 |
| 2.4.2 rhIL-7δ4 蛋白诱导表达条件优化、可溶性分析 | 第33-34页 |
| 2.4.3 rhIL-7δ4 蛋白的复性及纯化 | 第34-35页 |
| 2.4.4 Western-blot鉴定rhIL-7δ4 蛋白 | 第35-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 rhIL-7δ4 蛋白对人外周血单核细胞PBMCs的作用 | 第38-50页 |
| 3.1 前言 | 第38页 |
| 3.2 实验材料 | 第38-41页 |
| 3.2.1 人外周静脉血 | 第38页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第38-39页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第39页 |
| 3.2.4 主要溶液配制 | 第39-41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-44页 |
| 3.3.1 rhIL-7δ4 蛋白的脱盐和保存 | 第41页 |
| 3.3.2 rhIL-7δ4 蛋白含量测定 | 第41-42页 |
| 3.3.3 rhIL-7δ4 蛋白对外周血单个核细胞（PBMCs） BCL-2 蛋白表达的影响 | 第42-44页 |
| 3.3.4 Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测 | 第44页 |
| 3.3.5 统计学处理 | 第44页 |
| 3.4 实验结果 | 第44-48页 |
| 3.4.1 rhIL-7δ4 蛋白稳定性试验 | 第44-45页 |
| 3.4.2 蛋白含量测定 | 第45-46页 |
| 3.4.3 BCL-2 蛋白表达的检测 | 第46-47页 |
| 3.4.4 Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测 | 第47-48页 |
| 3.5 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 rhIL-7δ4 蛋白对肺成纤维细胞MRC-5 的作用 | 第50-63页 |
| 4.1 前言 | 第50-51页 |
| 4.2 实验材料 | 第51-53页 |
| 4.2.1 细胞株 | 第51页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第51页 |
| 4.2.3 主要仪器设备 | 第51页 |
| 4.2.4 主要溶液配制 | 第51-53页 |
| 4.3 实验方法 | 第53-56页 |
| 4.3.1 MRC-5 培养方法 | 第53-54页 |
| 4.3.2 TGF-β1 对MRC-5 增殖及collagen I蛋白、α-SMA蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
| 4.3.3 rhIL-7δ4 蛋白对MRC-5 增殖及collagen I蛋白、α-SMA蛋白的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.4 抗IL-7R /CD127 抗体干预细胞MRC-5 后的影响 | 第56页 |
| 4.4 实验结果 | 第56-61页 |
| 4.4.1 MTT法检测细胞增殖率 | 第56-57页 |
| 4.4.2 Western Blot检测collagen I蛋白、α-SMA蛋白的表达 | 第57-61页 |
| 4.5 讨论 | 第61-63页 |
| 全文总结 | 第63-64页 |
| 研究展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 攻读学位期间科研情况 | 第73-74页 |
| 附录1英文缩写语中文对照 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
