| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-14页 |
| 1.1 研究背景 | 第10-12页 |
| 1.1.1 癌症的危害 | 第10页 |
| 1.1.2 癌干细胞 | 第10页 |
| 1.1.3 ECs与癌细胞的交互对话 | 第10-11页 |
| 1.1.4 ECs与癌干细胞的交互对话 | 第11-12页 |
| 1.1.5 细胞力学特性与肿瘤转移 | 第12页 |
| 1.1.6 ECs与肝癌细胞以及肝癌干细胞的交互对话 | 第12页 |
| 1.2 本文关心的内容 | 第12-13页 |
| 1.3 本文研究的内容和主要目的 | 第13-14页 |
| 1.3.1 本文研究的主要目的 | 第13页 |
| 1.3.2 本文研究的主要内容 | 第13-14页 |
| 2 EC-CM对肝癌细胞癌干细胞表型的影响 | 第14-28页 |
| 2.1 引言 | 第14页 |
| 2.2 实验材料 | 第14-16页 |
| 2.2.1 细胞 | 第14页 |
| 2.2.2 主要仪器、耗材 | 第14-15页 |
| 2.2.3 主要药品、试剂 | 第15-16页 |
| 2.2.4 主要实验试剂的配制 | 第16页 |
| 2.3 实验方法 | 第16-20页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第16-17页 |
| 2.3.2 EC-CM收集 | 第17页 |
| 2.3.3 药敏试验 | 第17页 |
| 2.3.4 克隆形成实验 | 第17-18页 |
| 2.3.5 球体形成实验 | 第18页 |
| 2.3.6 基质胶侵袭实验 | 第18-19页 |
| 2.3.7 迁移实验 | 第19-20页 |
| 2.3.8 细胞表面抗原检测 | 第20页 |
| 2.4 实验结果 | 第20-26页 |
| 2.4.1 细胞形态学观察 | 第20-21页 |
| 2.4.2 EC-CM增强MHCC97H的耐药性 | 第21-22页 |
| 2.4.3 EC-CM影响MHCC97H细胞的克隆形成能力 | 第22-23页 |
| 2.4.5 EC-CM增强MHCC97H细胞的侵袭能力 | 第23-24页 |
| 2.4.6 EC-CM增加MHCC97H细胞迁移能力 | 第24-25页 |
| 2.4.7 EC-CM处理上调MHCC97H细胞CD133 的表达 | 第25-26页 |
| 2.5 讨论 | 第26-27页 |
| 2.6 本章小结 | 第27-28页 |
| 3 LCSCS的分离鉴定 | 第28-38页 |
| 3.1 引言 | 第28-29页 |
| 3.2 实验材料 | 第29-30页 |
| 3.2.1 主要仪器、耗材 | 第29页 |
| 3.2.2 主要药品、试剂 | 第29页 |
| 3.2.3 主要实验试剂的配制 | 第29-30页 |
| 3.3 实验方法 | 第30-33页 |
| 3.3.1 LCSCs富集 | 第30页 |
| 3.3.2 药敏试验 | 第30-31页 |
| 3.3.3 克隆形成实验 | 第31页 |
| 3.3.4 流式细胞术检测癌干细胞标志物 | 第31-33页 |
| 3.4 实验结果 | 第33-37页 |
| 3.4.1 球体细胞和MHCC97H细胞的形态观察 | 第33-34页 |
| 3.4.2 球体细胞与MHCC97H细胞耐药性比较 | 第34-35页 |
| 3.4.3 球体细胞克隆形成能力强于MHCC97H细胞 | 第35页 |
| 3.4.4 球体细胞癌干细胞表面标志物表达 | 第35-37页 |
| 3.5 讨论 | 第37页 |
| 3.6 本章小结 | 第37-38页 |
| 4 EC-CM对LCSCS迁移能力的影响 | 第38-46页 |
| 4.1 引言 | 第38-39页 |
| 4.2 实验材料 | 第39-40页 |
| 4.2.1 主要仪器、耗材 | 第39页 |
| 4.2.2 主要药品、试剂 | 第39-40页 |
| 4.2.3 主要试剂配制 | 第40页 |
| 4.3 实验方法 | 第40-42页 |
| 4.3.1 细胞迁移实验（Transwell实验） | 第40页 |
| 4.3.2 细胞增殖分析 | 第40-41页 |
| 4.3.3 免疫荧光染色 | 第41页 |
| 4.3.4 原子力显微镜检测LCSCs杨氏模量 | 第41-42页 |
| 4.4 实验结果 | 第42-44页 |
| 4.4.1 EC-CM促进LCSCs的迁移 | 第42-43页 |
| 4.4.2 EC-CM下调LCSCs细胞骨架F-actin的表达 | 第43-44页 |
| 4.4.2 EC-CM降低LCSCs的杨氏模量 | 第44页 |
| 4.5 讨论 | 第44-45页 |
| 4.6 本章小结 | 第45-46页 |
| 5 结论与展望 | 第46-48页 |
| 5.1 主要结论 | 第46页 |
| 5.2 后续研究工作的展望 | 第46-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录 | 第54页 |
| A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第54页 |
| B.作者在攻读学位期间参与的科研项目 | 第54页 |
