| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-32页 |
| 1.1 骨组织工程 | 第14-16页 |
| 1.2 骨组织工程的种子细胞 | 第16-20页 |
| 1.2.1 成骨细胞 | 第16-17页 |
| 1.2.2 成体干细胞 | 第17-18页 |
| 1.2.3 全能干细胞 | 第18-19页 |
| 1.2.4 iPSC-MSCs | 第19-20页 |
| 1.3 骨组织工程的生物材料支架 | 第20-25页 |
| 1.3.1 天然骨组织的组成与结构 | 第21页 |
| 1.3.2 骨组织工程支架的构建要求 | 第21-22页 |
| 1.3.3 骨组织工程支架的制备方法 | 第22-23页 |
| 1.3.4 骨组织工程支架的材料特性 | 第23-24页 |
| 1.3.5 生物材料支架对细胞行为的影响 | 第24-25页 |
| 1.4 生物材料支架诱导干细胞成骨分化研究进展 | 第25-28页 |
| 1.4.1 生物材料支架诱导 MSCs 成骨分化 | 第26-27页 |
| 1.4.2 生物材料诱导 ESCs 成骨分化 | 第27页 |
| 1.4.3 生物材料诱导 iPSCs 成骨分化 | 第27-28页 |
| 1.5 课题的提出、研究内容及创新点 | 第28-32页 |
| 1.5.1 课题的提出 | 第28-29页 |
| 1.5.2 课题的研究内容 | 第29-30页 |
| 1.5.3 课题的创新点 | 第30-32页 |
| 第二章 HAp/Col/CTS 纳米纤维支架的制备与表征 | 第32-41页 |
| 2.1 引言 | 第32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-36页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第33页 |
| 2.2.3 HAp/Col/CTS 纳米纤维的制备 | 第33-34页 |
| 2.2.4 HAp/Col/CTS 纳米纤维的形貌观察 | 第34-35页 |
| 2.2.5 HAp/Col/CTS 纳米纤维的化学结构与成分分析 | 第35页 |
| 2.2.6 热重分析 | 第35页 |
| 2.2.7 HAp/Col/CTS 纳米纤维的力学性能分析 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第36-40页 |
| 2.3.1 HAp/Col/CTS 纳米纤维的形貌特点 | 第36-37页 |
| 2.3.2 HAp/Col/CTS 纳米纤维的组成成分与化学结构 | 第37-38页 |
| 2.3.3 HAp/Col/CTS 纳米纤维的热力学性能 | 第38-39页 |
| 2.3.4 HAp/Col/CTS 纳米纤维的力学性能 | 第39-40页 |
| 2.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 iPSC-MSCs 的获取与鉴定 | 第41-54页 |
| 3.1 引言 | 第41-42页 |
| 3.2 材料与方法 | 第42-48页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第43页 |
| 3.2.3 培养基配方 | 第43-44页 |
| 3.2.4 iPSCs 的培养 | 第44-45页 |
| 3.2.4.1 MEF 的提取及培养 | 第44页 |
| 3.2.4.2 滋养层细胞的预处理 | 第44-45页 |
| 3.2.4.3 iPSCs 的复苏 | 第45页 |
| 3.2.4.4 iPSCs 的传代 | 第45页 |
| 3.2.4.5 iPSCs 的冻存 | 第45页 |
| 3.2.5 iPSC-MSCs 的诱导培养 | 第45-46页 |
| 3.2.6 iPSC-MSCs 的鉴定 | 第46页 |
| 3.2.6.1 表面抗原检测 | 第46页 |
| 3.2.6.2 三系分化检测 | 第46页 |
| 3.2.7 iPSC-MSCs 多能性检测 | 第46-48页 |
| 3.2.7.1 多能基因检测 | 第47页 |
| 3.2.7.2 细胞增殖曲线 | 第47-48页 |
| 3.2.8 iPSC-MSCs 致瘤性检测 | 第48页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第48-53页 |
| 3.3.1 MEF 细胞提取及形貌观察 | 第48-49页 |
| 3.3.2 iPSCs 培养及形貌观察 | 第49页 |
| 3.3.3 iPSC-MSCs 的培养 | 第49-50页 |
| 3.3.4 iPSC-MSCs 的流式及分化能力鉴定 | 第50-51页 |
| 3.3.5 iPSC-MSCs 多能性检测 | 第51-52页 |
| 3.3.6 iPSC-MSCs 安全性鉴定 | 第52-53页 |
| 3.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 HAp/Col/CTS 纳米纤维支架对 iPSC-MSCs 的成骨诱导作用研究 | 第54-67页 |
| 4.1 引言 | 第54页 |
| 4.2 材料与方法 | 第54-59页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第55-56页 |
| 4.2.3 培养基配方 | 第56页 |
| 4.2.4 支架材料的预处理 | 第56页 |
| 4.2.5 iPSC-MSCs 种植 | 第56页 |
| 4.2.6 iPSC-MSCs 迁移检测 | 第56-57页 |
| 4.2.7 iPSC-MSCs 增殖检测 | 第57页 |
| 4.2.8 iPSC-MSCs 形貌观察 | 第57-58页 |
| 4.2.9 iPSC-MSCs 于 HAp/Col/CTS 纳米纤维膜上成骨性能检测 | 第58-59页 |
| 4.2.9.1 成骨相关基因检测 | 第58-59页 |
| 4.2.9.2 成骨标志蛋白免疫荧光染色 | 第59页 |
| 4.2.9.3 成骨分泌蛋白检测 | 第59页 |
| 4.2.10 统计学分析 | 第59页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第59-66页 |
| 4.3.1 HAp/Col/CTS 纳米纤维对 iPSC-MSCs 迁移能力的影响 | 第59-61页 |
| 4.3.2 HAp/Col/CTS 纳米纤维对 iPSC-MSCs 粘附能力的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.3 HAp/Col/CTS 纳米纤维对 iPSC-MSCs 增殖能力的影响 | 第62页 |
| 4.3.4 HAp/Col/CTS 纳米纤维对 iPSC-MSCs 成骨诱导能力的影响 | 第62-66页 |
| 4.3.4.1 成骨相关基因检测 | 第62-64页 |
| 4.3.4.2 碱性磷酸酶与胶原定量 | 第64-65页 |
| 4.3.4.3 骨相关蛋白染色 | 第65-66页 |
| 4.4 本章小结 | 第66-67页 |
| 第五章 iPSC-MSCs 复合 HAp/Col/CTS 仿生支架的体内成骨功效研究 | 第67-75页 |
| 5.1 引言 | 第67-68页 |
| 5.2 材料与方法 | 第68-70页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第68页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第68页 |
| 5.2.3 干细胞-支架复合体系的制备 | 第68-69页 |
| 5.2.4 构建小鼠颅骨缺损模型 | 第69页 |
| 5.2.5 小鼠颅骨双源 CT 扫描分析及骨密度测试 | 第69-70页 |
| 5.2.6 组织学分析 | 第70页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第70-74页 |
| 5.3.1 颅骨修复结果 | 第70-72页 |
| 5.3.2 苏木精伊红染色结果 | 第72-74页 |
| 5.4 本章小结 | 第74-75页 |
| 第六章 结论和展望 | 第75-77页 |
| 6.1 本文主要结论 | 第75-76页 |
| 6.2 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 攻读硕士期间科研及获奖情况 | 第84-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
