中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第10-17页 |
1 肿瘤转移及其分子机制 | 第10-12页 |
2 锰超氧化物歧化酶(MnSOD)及其剪接异构体 | 第12-13页 |
3 超氧化物歧化酶与肿瘤发展转移 | 第13-16页 |
4 课题思路 | 第16页 |
5 技术路线 | 第16-17页 |
第二章 不同种类细胞中hMnSOD及异构体含量、SOD活力的测定 | 第17-24页 |
1. 实验仪器和材料 | 第17-18页 |
1.1 实验材料 | 第17-18页 |
1.2 主要实验仪器 | 第18页 |
2 实验方法 | 第18-21页 |
2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
2.2 Q-PCR测定不同种类细胞中hMnSOD及其截短型异构体水平 | 第19-21页 |
2.3 测定不同种类细胞中SOD活力 | 第21页 |
3 实验结果 | 第21-23页 |
3.1 不同种类细胞hMnSOD及其截短型异构体水平 | 第21-22页 |
3.2 不同种类细胞中的总SOD活力 | 第22-23页 |
4 讨论 | 第23-24页 |
第三章 hMnSOD及其异构体过表达、敲降、敲除载体构建 | 第24-38页 |
1 实验仪器和材料 | 第24-26页 |
1.1 实验材料 | 第24-25页 |
1.2 实验仪器 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-32页 |
2.1 hMnSOD及其异构体逆转录病毒过表达载体的构建 | 第26-29页 |
2.2 hMnSOD shRNA逆转录病毒载体的构建 | 第29-30页 |
2.3 hMnSOD基因打靶载体的构建 | 第30-32页 |
3 实验结果 | 第32-36页 |
3.1 hMnSOD及其异构体逆转录病毒过表达载体的构建 | 第32-34页 |
3.2 hMnSOD shRNA逆转录病毒载体的构建 | 第34-35页 |
3.3 hMnSOD基因打靶载体的构建 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
第四章 hMnSOD及其异构体对肿瘤转移的影响 | 第38-61页 |
1 实验仪器和材料 | 第38-41页 |
1.1 实验材料 | 第38-41页 |
1.2 实验仪器 | 第41页 |
2 实验方法 | 第41-46页 |
2.1 大提过表达、敲降、对照及包装质粒 | 第41-42页 |
2.2 转染 293T细胞包装病毒并感染肿瘤细胞 | 第42-43页 |
2.3 Western Blot和Q-PCR检测hMnSOD基因过表达/敲降效率 | 第43-45页 |
2.4 Transwell迁移实验检测肿瘤迁移能力 | 第45-46页 |
2.5 Western Blot和Q-PCR检测肿瘤转移及其信号通路相关基因 | 第46页 |
3 实验结果 | 第46-58页 |
3.1 大提过表达、敲降、对照及包装质粒 | 第46-47页 |
3.2 转染 293T细胞包装病毒并感染肿瘤细胞效率 | 第47-49页 |
3.3 Transwell迁移实验检测肿瘤迁移能力 | 第49-52页 |
3.4 Western Blot和Q-PCR分析肿瘤转移及其信号通路相关基因 | 第52-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
第五章hMnSOD-R9 蛋白及SOD抑制剂对肿瘤转移的影响 | 第61-65页 |
1. 前言 | 第61页 |
2 实验仪器和材料 | 第61-62页 |
2.1 实验材料 | 第61-62页 |
3 实验方法 | 第62页 |
3.1 MTT法检测hMnSOD-R9 蛋白及SOD抑制剂DDC对 95-D细胞的IC50 | 第62页 |
3.2 Tranwell迁移实验检测hMnSOD-R9 蛋白、DDC对肿瘤转移能力的影响 | 第62页 |
4 实验结果 | 第62-64页 |
4.1 MTT法检测hMnSOD-R9 蛋白及SOD抑制剂DDC对 95-D细胞的IC50 | 第62-63页 |
4.2 Tranwell迁移实验检测hMnSOD-R9 蛋白、DDC对肿瘤转移能力的影响 | 第63-64页 |
5 讨论 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
附录 | 第75-77页 |
部分测序结果 | 第77-78页 |
英文缩略词表 | 第78-79页 |
硕士期间发表的论文 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |