| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 第一篇 文献综述 | 第16-27页 |
| 第一章 MIRNAS对细胞增殖、凋亡的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.1 MIRNAS对增殖的研究 | 第16-17页 |
| 1.1.1 细胞增殖 | 第16页 |
| 1.1.2 miRNAs对细胞增殖的影响 | 第16-17页 |
| 1.1.3 miRNAs对癌细胞增殖的影响 | 第17页 |
| 1.2 MIRNAS对细胞凋亡的研究 | 第17-19页 |
| 1.2.1 细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 1.2.2 miRNAs对细胞凋亡的影响 | 第18-19页 |
| 第二章 睾丸支持细胞的研究进展 | 第19-24页 |
| 2.1 睾丸支持细胞的特点 | 第19-21页 |
| 2.1.1 睾丸支持细胞的结构 | 第19页 |
| 2.1.2 睾丸支持细胞的功能 | 第19-21页 |
| 2.2 睾丸支持细胞的增殖与凋亡 | 第21-24页 |
| 2.2.1 睾丸支持细胞增殖的特点 | 第21-22页 |
| 2.2.2 睾丸支持细胞对增殖的调控 | 第22页 |
| 2.2.3 睾丸支持细胞的凋亡 | 第22-24页 |
| 第三章 MIR-375的研究进展 | 第24-27页 |
| 3.1 MIR-375的特点 | 第24页 |
| 3.2 MIR-375的生物学功能 | 第24-26页 |
| 3.3 MIR-375的靶基因HIGD1A | 第26-27页 |
| 第二篇 研究内容 | 第27-60页 |
| 第一章 MIR-375对猪ST细胞增殖及凋亡的影响 | 第27-39页 |
| 1.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 1.1.1 实验样品 | 第27页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第28页 |
| 1.2 实验方法 | 第28-33页 |
| 1.2.1 细胞培养及转染 | 第28-29页 |
| 1.2.2 引物设计 | 第29页 |
| 1.2.3 总RNA提取 | 第29-30页 |
| 1.2.4 RNA的反转录 | 第30-31页 |
| 1.2.5 实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 1.2.6 MTS实验 | 第32页 |
| 1.2.7 流式细胞术检测细胞周期 | 第32页 |
| 1.2.8 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第32-33页 |
| 1.2.9 统计分析 | 第33页 |
| 1.3 实验结果 | 第33-37页 |
| 1.3.1 RNA提取结果 | 第33-34页 |
| 1.3.2 miR-375表达量检测 | 第34页 |
| 1.3.3 miR-375对PCNA表达量的影响 | 第34-35页 |
| 1.3.4 MTS及细胞周期检测 | 第35-37页 |
| 1.3.5 细胞凋亡检测 | 第37页 |
| 1.4 讨论 | 第37-38页 |
| 1.5 小结 | 第38-39页 |
| 第二章 MIR-375与HIGD1A靶标关系验证 | 第39-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.1 实验样本 | 第39页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第39页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第39-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第40页 |
| 2.2.2 RNA提取 | 第40页 |
| 2.2.3 RNA反转录 | 第40页 |
| 2.2.4 引物设计 | 第40页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR实验 | 第40-41页 |
| 2.2.6 蛋白提取 | 第41页 |
| 2.2.7 BCA蛋白浓度检测 | 第41页 |
| 2.2.8 ELISA试剂盒检测蛋白表达量 | 第41-42页 |
| 2.2.9 双荧光素酶共转染 | 第42页 |
| 2.2.10 双荧光活性检测 | 第42-43页 |
| 2.3 实验结果 | 第43-45页 |
| 2.3.1 候选靶基因预测 | 第43-44页 |
| 2.3.2 转染miR-375后HIGD1A的表达水平 | 第44-45页 |
| 2.3.3 miR-375与HIGD1A结合性检测 | 第45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 MIR-375调节HIGD1A对猪ST细胞ROS及凋亡影响 | 第47-60页 |
| 3.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 实验样本 | 第47页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第47-48页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第48页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-53页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第48-49页 |
| 3.2.2 目的片段扩增 | 第49页 |
| 3.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第49页 |
| 3.2.4 胶回收及纯化 | 第49页 |
| 3.2.5 目的片段与T载体连接 | 第49-50页 |
| 3.2.6 转化 | 第50页 |
| 3.2.7 单克隆挑取及菌液获得 | 第50页 |
| 3.2.8 菌液PCR | 第50页 |
| 3.2.9 小提质粒 | 第50-51页 |
| 3.2.10 双酶切 | 第51页 |
| 3.2.12 转化、涂板、摇菌 | 第51页 |
| 3.2.13 无内毒素质粒提取 | 第51-52页 |
| 3.2.14 细胞培养 | 第52页 |
| 3.2.15 RNA提取 | 第52页 |
| 3.2.16 RNA反转录 | 第52页 |
| 3.2.17 荧光定量PCR实验 | 第52页 |
| 3.2.18 细胞活性氧ROS检测 | 第52-53页 |
| 3.2.19 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第53页 |
| 3.3 实验结果 | 第53-58页 |
| 3.3.1 HIGD1ACDs区PCR扩增结果 | 第53-54页 |
| 3.3.2 HIGD1A过表达载体测序结果比对 | 第54页 |
| 3.3.3 HIGD1A过表达载体效果验证 | 第54-55页 |
| 3.3.4 ROS表达量检测 | 第55-56页 |
| 3.3.5 caspase3表达量检测 | 第56-57页 |
| 3.3.6 流式细胞术检测ST细胞的凋亡 | 第57-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-59页 |
| 3.5 小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-74页 |
| 导师简介 | 第74-75页 |
| 作者简介及在学期间所取得的研究成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
