| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-21页 |
| 1.1 猪流行性腹泻病毒概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 PEDV的流行历史 | 第13-14页 |
| 1.1.2 PEDV基因组与病毒结构 | 第14-16页 |
| 1.2 糖原合成酶激酶-3(GSK-3)相关机制的概述 | 第16-20页 |
| 1.2.1 PI3K/AKT通路 | 第16-17页 |
| 1.2.2 糖原合成酶激酶-3(GSK-3) | 第17-18页 |
| 1.2.3 GSK-3底物蛋白—β-catenin简介 | 第18-20页 |
| 1.3 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 PI3K/AKT信号通路调控PEDV复制的研究 | 第21-31页 |
| 2.1 材料方法 | 第21-26页 |
| 2.1.1 毒株和细胞 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 PEDV感染 | 第22页 |
| 2.1.5 MTS法检测抑制剂毒性 | 第22-23页 |
| 2.1.6 细胞蛋白活性抑制试验 | 第23页 |
| 2.1.7 荧光定量PCR分析 | 第23-25页 |
| 2.1.8 Western blot检测 | 第25-26页 |
| 2.1.9 TCID_(50)测定 | 第26页 |
| 2.2 试验结果 | 第26-29页 |
| 2.2.1 PEDV激活Marc-145细胞内PI3K/AKT信号通路 | 第26-27页 |
| 2.2.2 抑制剂对细胞活性的影响 | 第27页 |
| 2.2.3 PI3K/AKT信号通路促进PEDV的增殖 | 第27-29页 |
| 2.2.4 抑制PI3K/AKT活性及PEDV感染后相关蛋白水平变化 | 第29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 GSK-3调控PEDV复制增殖的分子机制 | 第31-39页 |
| 3.1 材料方法 | 第31-33页 |
| 3.1.1 毒株和细胞 | 第31页 |
| 3.1.2 试剂 | 第31-32页 |
| 3.1.3 仪器 | 第32页 |
| 3.1.4 质粒转染 | 第32页 |
| 3.1.5 PEDV感染 | 第32页 |
| 3.1.6 抑制剂毒性检测及细胞抑制试验 | 第32页 |
| 3.1.7 荧光定量分析 | 第32-33页 |
| 3.1.8 Western blot检测 | 第33页 |
| 3.1.9 TCID_(50)测定 | 第33页 |
| 3.2 试验结果 | 第33-37页 |
| 3.2.1 抑制剂对细胞活性的影响 | 第33页 |
| 3.2.2 GSK-3活性抑制后能够抑制PEDV在Marc-145细胞中增殖 | 第33-34页 |
| 3.2.3 抑制GSK-3活性后相关蛋白水平变化情况 | 第34-35页 |
| 3.2.4 GSK-3抑制后对PEDVN蛋白过表达的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.5 过表达PEDVN蛋白对β-catenin表达的影响 | 第36-37页 |
| 3.3 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 β-catenin调控PEDV复制机制的研究 | 第39-48页 |
| 4.1 材料方法 | 第39-44页 |
| 4.1.1 毒株和细胞 | 第39页 |
| 4.1.2 试剂 | 第39-40页 |
| 4.1.3 仪器 | 第40页 |
| 4.1.4 PEDV感染与检测 | 第40页 |
| 4.1.5 抑制剂毒性检测及细胞抑制试验 | 第40页 |
| 4.1.6 猪β-catenin真核表达载体的构建 | 第40-43页 |
| 4.1.7 质粒共转染 | 第43页 |
| 4.1.8 荧光定量分析 | 第43页 |
| 4.1.9 Western blot检测 | 第43页 |
| 4.1.10 TCID_(50)检测 | 第43-44页 |
| 4.2 试验结果 | 第44-47页 |
| 4.2.1 抑制剂Salinomycin对细胞活性的影响 | 第44页 |
| 4.2.2 抑制Wnt/β-catenin通路后对PEDV复制的影响 | 第44-45页 |
| 4.2.3 猪β-catenin 真核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 4.2.4 β-catenin与PEDVN蛋白表达相互抑制 | 第46-47页 |
| 4.3 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 全文结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-58页 |
| 作者简历 | 第58页 |
